一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒及其检测方法技术

技术编号:6880021 阅读:434 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒及其检测方法,该检测β-内酰胺酶的试剂盒试剂包括β-内酰胺酶标准品、青霉素钾标准液品、蛋白质沉淀剂三氯乙酸(TCA)、显色剂2,2'-联喹啉乙醇溶液和络合剂CuSO4。该检测方法为首先设定检测仪器参数,在空白管、标准管和样品管分别加入蒸馏水、标准液和样品,同时加入蛋白质沉淀剂TCA,充分振荡混合后放入离心机,4000rpm离心10min,取上清液加入2,2'-联喹啉乙醇溶液充分摇匀,室温静置5min后,通过仪器进行比色测定,根据显色反应的指示β-内酰胺酶的含量。本发明专利技术中的试剂盒及其检测方法操作简便易行,检测成本低,检测结果准确,能够实现对原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的快速检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于检测和半定量测定原料乳及乳品中β-内酰胺酶的试剂盒及其制备方法,属于食品安全检测领域。
技术介绍
β -内酰胺酶(β-lactamase),俗称生鲜牛乳抗生素分解剂,又名解抗剂或金玉兰酶制剂,它是由革兰氏阳性细菌产生和分泌的,可选择性分解牛奶中残留的内酰胺类抗生素,使微生物法、酶联免疫法等常规的检测方法失效,从而无法正确判断是否为“无抗奶”,掩盖抗生素超标的事实。内酰胺类抗生素是在牛奶生产中应用最广泛的抗生素,用于治疗牛乳房炎和其他细菌感染性疾病,如果不严格按照规定治疗牛乳炎等疾病,滥用抗生素,就会造成牛乳中的抗生素超标。由于抗生素的存在,一方面难以成为安全合格的产品,另一方面,还会影响酸奶、奶酪等奶制品的加工生产。Korycka-Dahl Μ.等(1985)利用β -内酰胺酶降解牛奶中残留的抗生素,可降低至常规检测方法无法检测的水平。一些不法分子将内酰胺酶用作牛奶中抗生素的分解剂,以掩盖其抗生素残留超标的事实,从而使抗生素超标奶变成合格奶,这就造成了外源性内酰胺酶的违法添加。β -内酰胺酶能够使青霉素内酰胺结构破坏而失去活性,导致青霉素、头孢菌素等抗生素类药物耐本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒,其特征在于:包括β-内酰胺酶标准品、青霉素钾标准液品、蛋白质沉淀剂三氯乙酸(TCA)、显色剂2,2'-联喹啉乙醇溶液和络合剂CuSO4;其中所述试剂β-内酰胺酶标准品酶活度为2000U/L, 青霉素钾标准液品活度为50000U/mL,蛋白质沉淀剂TCA 浓度为10%~15%,2,2'-联喹啉乙醇溶液浓度为0.05%~0.1%,络合剂CuSO4浓度为20~40mmol/L。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒,其特征在于包括β-内酰胺酶标准品、青霉素钾标准液品、蛋白质沉淀剂三氯乙酸(TCA)、显色剂2,2’-联喹啉乙醇溶液和络合剂CuSO4 ;其中所述试剂β -内酰胺酶标准品酶活度为2000U/L,青霉素钾标准液品活度为50000U/mL,蛋白质沉淀剂TCA浓度为10% 15%,2,2’ -联喹啉乙醇溶液浓度为 0. 05% 0. 1%,络合剂 CuSO4 浓度为 2(T40mmol/L。2.根据权利要求1所述的一种用于检测原料乳及乳制品中内酰胺酶的试剂盒, 其特征在于所述青霉素噻唑酸标准反应液是按照如下方法制备得到的,青霉素钾底物浓度为50000U/mL,加入2000U/mL β -内酰胺酶标准品,37 °C水浴60min ;高速冷冻离心 (IOOOOrpm) IOmin,上清液即为青霉素噻唑酸标准反应液。3...

【专利技术属性】
技术研发人员:谢岩黎李雪琴张鑫潇韩小贤霍权恭陈颖
申请(专利权)人:河南工业大学
类型:发明
国别省市:41

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