一种岩藻半乳聚糖硫酸酯及其提取分离纯化方法与应用技术

技术编号:6840377 阅读:308 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种结构新颖的岩藻半乳聚糖硫酸酯。本发明专利技术的岩藻半乳聚糖硫酸酯,是一种以岩藻糖和半乳糖组成的硫酸多糖。糖链的化学结构以-4-α-L-Fuc-(1,3)-α-L-Fuc-(1,3)-α-L-Fuc-(1,3)-α-L-Fuc-(1-残基形成主链,平均每4个糖残基含有一个支链,支链由α-L-Fuc(1-或者β-D-Gla-(1,6)-β-D-Gla-(1-组成。硫酸基连接在岩藻糖的2,4位或者半乳糖的3,4位上。本发明专利技术同时公开了其制备方法和应用。本发明专利技术的岩藻半乳聚糖硫酸酯可以开发为治疗肾脏疾病的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物化学领域,具体说是一种岩藻半乳聚糖硫酸酯及其分离纯化方法与应用。
技术介绍
岩藻多糖又名褐藻多糖硫酸酯,英文名称fucan或fucoidan,是存在于海洋褐藻或海洋无脊椎动物中的一大类由岩藻糖组成的硫酸化多糖,具有抗凝血、抗肿瘤、抗血栓、 抗炎等多种生物活性。现在人们对岩藻半乳聚糖的组成有较为清晰的了解,它是一类化学组成和结构非常复杂的多糖。岩藻多糖化学结构非常复杂,不同褐藻中分离到的岩藻多糖其结构有很大差异。 到目前为止,对来源于墨角藻(Fucus vesiculosus)和泡叶藻(Ascophyllum nodosum)的岩藻多糖的结构研究最多,墨角藻岩藻多糖主要以α (1 — 3)糖苷键连接,硫酸化主要发生在(4位。对泡叶藻岩藻多糖的多项研究都表明其中存在大量的α (1 — 3)和α (1 — 4) 糖苷键。此外还有几种褐藻岩藻多糖的结构被报道。昆布(Ecklonia kurome)岩藻多糖主要为α (1 — 3)连接,硫酸化在C4位。来源于枝管藻(Cladosiphonokamuranus)和绳藻 (Chorda filum)的岩藻多糖主链均为α (1 — 3)的岩藻糖,硫酸化在C4位,而且,二者均有少量的2-0-乙酰化。权利要求1.一种岩藻半乳聚糖硫酸酯,其特征在于其主要含有岩藻糖和半乳糖;糖链化学结构以-4-a -L-FUC-(1 — 3)-α-L-Fuc-(1 —3)-α-L-Fuc-(1 — 3) - α-L-Fuc-(1-残基形成主链,主链中1 — 3的岩藻糖占75%, 1 — 4的岩藻糖占25%,平均每4个糖残基含有一个支链,支链由α-L-Fucd-或者 β -D-Gla-(1 — 6) - β -D-Gla-(1-组成;硫酸基连接在岩藻糖的2,4位或者半乳糖的3,4位上。2.按照权利要求1所述岩藻半乳聚糖硫酸酯,其特征在于其包含两个结构单元结构A 和结构B ;结构A由1 — 3的岩藻糖和1 — 4的岩藻糖构成主链,在1 — 3的岩藻糖的2位上连有α -L-Fuc (1-支链;结构B由1 — 3的岩藻糖和1 — 4的岩藻糖构成主链,在1 — 3 的岩藻糖的2位上连有β-D-Gla-(1 — 6)-β-D-Gla-(1-支链;3.按照权利要求1所述岩藻半乳聚糖硫酸酯,其特征在于它是由2个结构A和1个结构B的AAB结构依次交替连接构成主链,每12个岩藻糖单位构成一个重复单元;在主链的第2个和第6个岩藻糖残基的2位上连有1-连接的岩藻糖支链,在主链的第10个岩藻糖残基的4位上连有(1 — 6)连接的2个半乳糖单元。4.一种权利要求1所述岩藻半乳聚糖硫酸酯的提取分离纯化方法,其特征在于操作步骤如下(1)将褐藻除去泥沙,加水,60-120°C加热提取1-4次;合并提取液,抽滤,减压浓缩,用乙醇沉淀,干燥得粗提物;所述加水的量为10-40倍藻体重量;所述的抽滤用硅藻土助滤;所述沉淀过程乙醇于体系中的最终体积浓度为50-80% ;(2)将粗提物加水复溶,使其质量浓度为1-1.5%,加入氯化镁和乙醇溶液,离心除去沉淀,收集上清液,其中所述氯化镁于复溶物中的终浓度为0. 05mol/L,乙醇于体系中最终重量浓度为20% ;上清液经减压浓缩,再加入乙醇沉淀,乙醇于体系中的最终体积浓度为50-80%,过滤得沉淀;(3)将沉淀溶于水,用截留分子量为3500Da透析袋透析,透析结束后将袋内溶液减压浓缩,冷冻干燥得纯化的褐藻多糖;(4)将(3)得到的褐藻多糖溶于水,使其质量浓度为1-3%,以DEAE-S印haroSe-CL-6B 为载体柱层析,依次用 0. lmol/L NaCl、0. 5mol/LNaCl、l. Omol/L NaCl、1. 5mol/L NaCl 和 2. Omol/L NaCl溶液洗脱,收集各洗脱液,分别透析、冻干;其中由1. Omol/L NaCl洗脱所得的白色样品即为岩藻半乳聚糖硫酸酯。5.一种权利要求1所述的岩藻半乳聚糖硫酸酯在制备治疗肾脏疾病药物中的应用。6.按照权利要求5所述岩藻半乳聚糖硫酸酯的应用,其特征在于所述肾脏疾病药物为治疗肾功能衰竭、肾病综合症和/或糖尿病肾病的药物。全文摘要本专利技术公开了一种结构新颖的岩藻半乳聚糖硫酸酯。本专利技术的岩藻半乳聚糖硫酸酯,是一种以岩藻糖和半乳糖组成的硫酸多糖。糖链的化学结构以-4-α-L-Fuc-(1,3)-α-L-Fuc-(1,3)-α-L-Fuc-(1,3)-α-L-Fuc-(1-残基形成主链,平均每4个糖残基含有一个支链,支链由α-L-Fuc(1-或者β-D-Gla-(1,6)-β-D-Gla-(1-组成。硫酸基连接在岩藻糖的2,4位或者半乳糖的3,4位上。本专利技术同时公开了其制备方法和应用。本专利技术的岩藻半乳聚糖硫酸酯可以开发为治疗肾脏疾病的药物。文档编号C08B37/00GK102234336SQ20101015793公开日2011年11月9日 申请日期2010年4月24日 优先权日2010年4月24日专利技术者张全斌, 张忠山, 张虹, 牛锡珍, 王晶 申请人:中国科学院海洋研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种岩藻半乳聚糖硫酸酯,其特征在于:其主要含有岩藻糖和半乳糖;糖链化学结构以-4-α-L-Fuc-(1→3)-α-L-Fuc-(1→3)-α-L-Fuc-(1→3)-α-L-Fuc-(1-残基形成主链,主链中1→3的岩藻糖占75%,1→4的岩藻糖占25%,平均每4个糖残基含有一个支链,支链由α-L-Fuc(1-或者β-D-Gla-(1→6)-β-D-Gla-(1-组成;硫酸基连接在岩藻糖的2,4位或者半乳糖的3,4位上。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张全斌王晶张忠山张虹牛锡珍
申请(专利权)人:中国科学院海洋研究所
类型:发明
国别省市:95

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