本发明专利技术属于抗真菌药物领域，具体涉及一种增强抗真菌药物抑菌效果的方法。该方法是是采用阻断钙离子信号系统的方法和阻断真菌麦角固醇生物合成类药物联合处理真菌；所说的阻断钙离子信号系统的方法是采用钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂、重要蛋白的抑制剂或基因敲除。本发明专利技术将钙信号系统阻断剂和真菌麦角固醇合成阻断剂，以次抑菌浓度的唑类药物和一定浓度对菌体无毒害作用的钙离子信号系统阻断剂混合后，一同添加到真菌培养基中，再在混有药物的培养基上点真菌孢子，结果表明两类药物共给药的平板上菌落直径明显减小，说明两类药物联合给药的抑菌效果更好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗真菌药物领域，具体涉及一种增强抗真菌药物抑菌效果的方法。
技术介绍
目前，根据其抑菌途径抗真菌药物主要有阻断病原菌DNA、RNA合成类药物，多烯类药物，阻断麦角固醇生物合成类药物，阻断细胞壁组分D- β -1，3-葡聚糖生物合成类药物。但是，由于真菌的多样性、不同真菌侵染途径的相对独立性、已有抗真菌药物的抑真菌效果并不尽如人意。尤为突出的是病原真菌可以通过药物外排泵的功能性高表达表现为多药耐药性，这是目前治疗真菌感染所面临最为严峻的问题。因此，十分有必要采用更为有效的方法提高现有药物的抑菌效果，并通过有效的方法阻止真菌多药耐药性的发生
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种更为有效的抑制真菌的方法，该方法可以有效提高目前临床使用的一线抗真菌药物的抑菌活性，同时可以减少真菌多药抗性的产生。本专利技术公开了一种增强抗真菌药物抑菌效果的方法，是采用阻断钙离子信号系统的方法和阻断真菌麦角固醇生物合成类药物联合处理真菌。所说的阻断钙离子信号系统的方法可以是采用钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂、重要蛋白的抑制剂、基因敲除，该方法能明显增强抗深度真菌感染的真菌药物抑制真菌生长的效果。本专利技术中所说的钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂，包括钙离子螯合剂，如 BAPTA(1, 2-bis(o-aminophenoxy)ethane-N, N, N' , N' -tetraacetic acid)、EGTA(ethylene glycol tetraacetic acid)等，钙调蛋白抑制剂，如氟非那嗪(fluphenazine)、卡米达佐(calmidazolium)、ff-7 (N-(6-氨基己烷基)_5_氯_1萘-黄胺)、氯丙嗪(chlorpromazine, CPZ)和吩噻嗪类药物-三氟拉嗪(trifluoperazine, TFP)等，钙调磷酸酶抑制剂，如Π(506、环孢菌素(cyclosporin)等。本专利技术中所说的真菌麦角固醇合成阻断剂主要是指唑类药物，它们是通过抑制真菌细胞膜成分麦角固醇合成途径中酶的活性从而起到抑真菌的效果。本专利技术中使用的真菌麦角固醇合成阻断剂唑类药物的浓度都是指其次抑菌浓度， 即低于各自的抑菌浓度的浓度，单独使用时该浓度药物时抑菌效果不明显。本专利技术中使用的唑类药物是现在临床上常用于治疗深度曲霉感染的伊曲康唑 (ITZ)和伏立康唑(VRC)，其中本实验室测得ITZ的最低抑菌浓度为0. 2μ g/mL，VRC的最低抑菌浓度为0. 18μ g/mL。伊曲康唑(ITZ)的次抑菌浓度为0. 1 μ g/mL，伏立康唑(VRC)的次抑菌浓度为0. 15 μ g/mL。本专利技术所涉及的方法为将钙信号系统阻断剂和真菌麦角固醇合成阻断剂，以次抑菌浓度的唑类药物和一定浓度(5mM)对菌体无毒害作用的钙离子信号系统阻断剂混合后， 一同添加到真菌培养基中，再在混有药物的培养基上点真菌孢子，37°C培养2 3天，发现两类药物共给药的平板上菌落直径明显减小，说明两类药物联合给药的抑菌效果更好。本专利技术的方法特别是对曲霉类丝状真菌的抑菌效果明显。本专利技术的方法是利用模式真菌构巢曲霉或烟曲霉作为测试材料，在其培养基中同时添加钙信号系统阻断剂和次抑菌浓度的真菌麦角固醇合成阻断剂，然后在平板上点接真菌孢子，37°c培养2 3天，观察菌落直径。结果显示联合用药组菌落直径明显小于单独给药组。本专利技术同时在钙信号系统重要蛋白的缺失菌株背景条件下，对真菌施用传统抗真菌药物，观察真菌对药物的敏感性。我们发现缺失钙信号系统的重要蛋白Calcineurin或下游转录因子CrzA时，缺失菌株相较于野生型菌株对传统抗真菌药物超敏感。具体实施方法1、测试菌株表1使用菌株情况列表权利要求1.一种增强抗真菌药物抑菌效果的方法，是采用阻断钙离子信号系统的方法和阻断真菌麦角固醇生物合成类药物联合处理真菌；所说的阻断钙离子信号系统的方法是采用钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂、重要蛋白的抑制剂或基因敲除。2.根据权利要求1所述的增强抗真菌药物抑菌效果的方法，其特征在于，所说的钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂，是钙离子螯合剂、钙调蛋白抑制剂和调磷酸酶抑制剂。3.根据权利要求1所述的增强抗真菌药物抑菌效果的方法，其特征在于，所说的真菌麦角固醇合成阻断剂是唑类药物。4.根据权利要求1所述的增强抗真菌药物抑菌效果的方法，其特征在于，真菌麦角固醇合成阻断剂的使用浓度是指其次抑菌浓度。5.根据权利要求1所述的增强抗真菌药物抑菌效果的方法，其特征在于，所说的唑类药物是伊曲康唑和伏立康唑。全文摘要本专利技术属于抗真菌药物领域，具体涉及一种增强抗真菌药物抑菌效果的方法。该方法是是采用阻断钙离子信号系统的方法和阻断真菌麦角固醇生物合成类药物联合处理真菌；所说的阻断钙离子信号系统的方法是采用钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂、重要蛋白的抑制剂或基因敲除。本专利技术将钙信号系统阻断剂和真菌麦角固醇合成阻断剂，以次抑菌浓度的唑类药物和一定浓度对菌体无毒害作用的钙离子信号系统阻断剂混合后，一同添加到真菌培养基中，再在混有药物的培养基上点真菌孢子，结果表明两类药物共给药的平板上菌落直径明显减小，说明两类药物联合给药的抑菌效果更好。文档编号A61K45/06GK102218142SQ20111009976公开日2011年10月19日 申请日期2011年4月21日 优先权日2011年4月21日专利技术者浦莉, 王莎, 蒋鹤春, 陆玲 申请人:南京师范大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种增强抗真菌药物抑菌效果的方法，是采用阻断钙离子信号系统的方法和阻断真菌麦角固醇生物合成类药物联合处理真菌；所说的阻断钙离子信号系统的方法是采用钙离子信号系统中钙信号转导的阻断剂、重要蛋白的抑制剂或基因敲除。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：浦莉，王莎，蒋鹤春，陆玲，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：84
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