本发明专利技术属医药技术领域，具体地说涉及一种查尔霉素的制备方法。具体化合物为式一化合物、式二化合物和式三化合物，制备方法为将海洋链霉菌M491，经发酵积累粗提物，利用硅胶层析等多种层析方法分离得到式一化合物、式二化合物和式三化合物，同时所述式一化合物、式二化合物或式三化合物可在制备抗肿瘤、抗菌、或抗病毒药物中。本发明专利技术利用海洋微生物资源，寻找到一种化学结构新颖的化合物，它具有抗肿瘤活性，对多种人体肿瘤细胞有抑制作用；为临床提供了新型药物或先导化合物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，具体地说是。
技术介绍
查耳霉素首次从链霉菌Sti^ptomyces bikiniensis分离得到，为16元环大环内酯，其糖苷配基带有2，3反向双键。查耳霉素具有非常强的抑菌活性，可以抑制多种细菌如 Staphylococcus aureus 的生长(Frohardt RP, Pitillo RF, andEhrlich J. Chalcomycin and its fermentative production. 1962. U. S. patent3, 065，137.)。同时，chalcomycin 能够抑制 HeLa 细胞的蛋白合成(Gupta RS, Murray W, and Gupta R.Cross resistance pattern towards anticancer drugs of ahuman carcinoma multidrug-resistant cell line. Br J Cancer. 1988(58) =441-447) 目前已报道多例查耳霉素同系物，它们在 C-5 和 C-19 各连有一个中性糖(Kim SD, Ryoo IJ, Kim CJ, Kim WG, Kim JP, Kong JY, Koshino H, Uramoto M, and Yoo ID. GERI—155, a new macroIide antibiotic related tochalcomycin. J Antibiot. 1996(49) 955 957 ；Goo YM, Lee YY, and Kim BT. A new 16-membered chalcomycin type macrolide antibiotic,250-144C. JAntibiot.1997(50) 85 88 ；Asolkar RN,Maskey RP,Helmke Ε,and LaatschH. Chalcomycin B,a new macrolide antibiotic from the marine isoIateStreptomyces sp. B7064. J Antibiot.2002(55) 893 898 ；Chatterjee S, ReddyGCS, Franco CMM, Rupp RH, Ganguli BN, Fehlhaber HW, and Kogler H.Swalpamycin, a new macrolide antibiotic ii.Structure elucidation. Journal ofAntibiotics. 1987(40) : 1368-1374)。鉴于查耳霉素类化合物的活性，进一步发现新结构的查耳霉素类化合物具有重要意义。同时，该族化合物的抗肿瘤活性却未见有专利保护。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供。为了实现上述目的，本专利技术采用的的技术方案为查尔霉素化合物具有式一、式二或式三的结构式，分别为权利要求1.，其特征在于按如下步骤操作1)固体培养将海洋链霉菌M491接种于M2+固体培养基，在28-30°C下培养直至长出青灰色的孢子；其中链霉菌M491保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 CGMCC，保藏编号为CGMCC No. 2446 ；2)摇床培养将上述培养的0.5-1. Ocm2带有孢子丝的琼脂块接种到200-250ml豆粉液体培养基，在28-35°C温度以110-130rpm的转速下进行摇床培养4_5天后，待用；3)萃取将上述发酵液用有机溶剂浸提3-4次，合并有机相浓缩得粗提物；4)纯化将粗提物经硅胶柱层析，以1-3L二氯甲烷，2-4L 二氯甲烷/2%甲醇，1-3L 二氯甲烷/5%甲醇，1-3L 二氯甲烷/10%甲醇梯度进行洗脱，流速为8-1 lmL/min，将所得组分 3经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带，经葡聚糖层析后，在展开剂为二氯甲烷/10% 甲醇时Rf = 0. 50-0. 52分离得到式一化合物；组分4经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带，再将组分4经硅胶柱层析以二氯甲烷/7%甲醇进行梯度洗脱，待以展开剂为二氯甲烷/10%甲醇时Rf = 0. 22-0. 24处，分离得到式二化合物，在Rf = 0. 25-0. 27分离得到式三化合物。2.按权利要求1所述的查尔霉素化合物的制备方法，其特征在于所述所述M2琼脂平板培养基成份为大麦提取物9-1 lg，酵母粉3-5g，葡萄糖3-5g，琼脂粉12-18g，IL天然海水，pH 7. 5-8. 0 ；所述豆粉液体培养基为大豆粉19-21g，甘露醇19_21g，IL天然海水，pH 7. 5-8. O03.按权利要求1所述的查尔霉素化合物的制备方法，其特征在于所述豆粉液体培养基为大豆粉19-21g，甘露醇19-21g，人工海水450-550ml，自来水450_550ml，调整pH为 7. 6-8. O。全文摘要本专利技术属医药
，具体地说涉及一种查尔霉素的制备方法。具体化合物为式一化合物、式二化合物和式三化合物，制备方法为将海洋链霉菌M491，经发酵积累粗提物，利用硅胶层析等多种层析方法分离得到式一化合物、式二化合物和式三化合物，同时所述式一化合物、式二化合物或式三化合物可在制备抗肿瘤、抗菌、或抗病毒药物中。本专利技术利用海洋微生物资源，寻找到一种化学结构新颖的化合物，它具有抗肿瘤活性，对多种人体肿瘤细胞有抑制作用；为临床提供了新型药物或先导化合物。文档编号C12R1/50GK102220399SQ20111008056公开日2011年10月19日 申请日期2008年7月11日 优先权日2008年7月11日专利技术者丁玲, 哈特穆特·拉赤, 张伟杰, 李富超, 秦松 申请人:中国科学院海洋研究所本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种查尔霉素化合物的制备方法，其特征在于：按如下步骤操作：１）固体培养：将海洋链霉菌Ｍ４９１接种于Ｍ２＋固体培养基，在２８－３０℃下培养直至长出青灰色的孢子；其中链霉菌Ｍ４９１保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心ＣＧＭＣＣ，剂为二氯甲烷／１０％甲醇时Ｒｆ＝０．２２－０．２４处，分离得到式二化合物，在Ｒｆ＝０．２５－０．２７分离得到式三化合物。３经浓硫酸／茴香醛显色待含棕黄色的条带，经葡聚糖层析后，在展开剂为二氯甲烷／１０％甲醇时Ｒｆ＝０．５０－０．５２分离得到式一化合物；组分４经浓硫酸／茴香醛显色待含棕黄色的条带，再将组分４经硅胶柱层析以二氯甲烷／７％甲醇进行梯度洗脱，待以展开酵液用有机溶剂浸提３－４次，合并有机相浓缩得粗提物；４）纯化：将粗提物经硅胶柱层析，以１－３Ｌ二氯甲烷，２－４Ｌ二氯甲烷／２％甲醇，１－３Ｌ二氯甲烷／５％甲醇，１－３Ｌ二氯甲烷／１０％甲醇梯度进行洗脱，流速为８－１１ｍＬ／ｍｉｎ，将所得组分保藏编号为：ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．２４４６；２）摇床培养：将上述培养的０．５－１．０ｃｍ２带有孢子丝的琼脂块接种到２００－２５０ｍｌ豆粉液体培养基，在２８－３５℃温度以１１０－１３０ｒｐｍ的转速下进行摇床培养４－５天后，待用；３）萃取：将上述发...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：丁玲，秦松，李富超，张伟杰，哈特穆特·拉赤，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：95
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