【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及鱼类胚胎冷冻保存,具体地说是一种海洋鱼类真鲷胚胎冷冻保存方法,把真鲷胚胎通过降温、液氮保存及解冻洗脱,获取复活胚胎的过程。
技术介绍
鱼类胚胎冷冻保存研究约有20年历史,由于鱼类胚胎体积较大、含水量多、卵黄含量高、卵膜通透性差,冷冻保存较哺乳类胚胎困难得多。国内外学者对鱼类胚胎冷冻保存的损伤机理、冷冻降温速率、解冻复温、抗冻剂种类和毒性等方面进行了大量研究,并取得很大进展。目前鲤科鱼类胚胎在-100℃以上温度的冷冻保存已获得较稳定的复活率[张克俭,楼允东,张饮江等。三种淡水鱼类胚胎低温保存及其降温和复温速率的研究。水产学报1997,21(4)366-372];鲑鳟鱼类胚胎亦突破-25℃的界限(Erdahl,D.A.,Preservation of spermatozoa and ova from freshwaterfish.Thesis of the University of Minnesota,U.S.A 1986);鲤鱼和泥鳅胚胎的冷冻保存已突破了液氮温区,Zhang等于1989年将16个鲤胚胎冷冻到-196℃,解冻后有4个复活,并有3尾孵出鱼苗(Zhang,X.S.,Zhao,L.,Hua,T.C.,et al.A study on thecryopreservation of common carp embryos.CryoLetters,1989,10271-278);张克俭等在1997年将心跳期泥鳅胚胎冷冻到-196℃,在16个胚胎中,有1个完全复活并孵出鱼苗[张克俭,楼允东,张饮江等。三种淡水鱼类胚胎低温保存及其降温和复温速率的 ...
【技术保护点】
一种真鲷胚胎冷冻保存方法,其特征在于:选择真鲷心跳期胚胎,放入抗冻液中在0~4℃,预冷90分钟;分段降温,降温期间在-12℃时置核,降温至-30℃直接投入液氮中保存。
【技术特征摘要】
1.一种真鲷胚胎冷冻保存方法,其特征在于选择真鲷心跳期胚胎,放入抗冻液中在0~4℃,预冷90分钟;分段降温,降温期间在-12℃时置核,降温至-30℃直接投入液氮中保存。2.按照权利要求1所述真鲷胚胎冷冻保存方法,其特征在于所述真鲷心跳期胚胎的心跳次数大于60次/分钟。3.按照权利要求1所述真鲷胚胎冷冻保存方法,其特征在于所述抗冻液是以平衡盐溶液Cortland为基液,其中含有体积含量5%的二甲基亚砜和5%的丙二醇二种抗冻剂。4.按照权...
【专利技术属性】
技术研发人员:李军,肖志忠,丁福红,马道远,徐世宏,
申请(专利权)人:中国科学院海洋研究所,
类型:发明
国别省市:95[中国|青岛]
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