毛橘红总黄酮及其提取方法和用途技术

本发明专利技术属于医药卫生、食品化工行业。主要是毛橘红总黄酮、毛橘红总黄酮分散片、柚皮苷、野漆树苷的制法和用途。化橘红是芸香科植物化州柚或柚的未成熟或近成熟干燥外层果皮，为镇咳化痰的道地药材。毛橘红中的黄酮类成分是其主要有效成分。毛橘红总黄酮中，柚皮苷与野漆树苷含量较高，两者合计占总黄酮的８５％以上。本发明专利技术提供一种以溶剂法提取，经浓缩、沉淀及重结晶后得总黄酮、柚皮苷、野漆树苷以及一种毛橘红总黄酮制剂的方法，所得产品能够显著提高传统中药的疗效和科技含量。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药卫生、食品化工等行业。主要是提供一种毛橘红总黄酮、及其简便经济的提取分离方法和用途。
技术介绍
化橘红是芸香科植物化州柚Citrus grandis‘tomentosa’或柚Citrusgrandis(L.)Osbeck的未成熟或近成熟干燥外层果皮。前者习称“毛橘红”，后者习称“光橘红”，有散寒、燥湿、利气、消痰的功能。主要用于风寒咳嗽、喉痒痰多、食积伤酒、呕吐痞闷等疾病。其中毛橘红产于广东化州，为镇咳化痰的道地药材。毛橘红中的黄酮类成分有抗炎、镇痛、解热的作用，是其主要有效成分。其中，柚皮苷与野漆树苷含量较高，两者合计占毛橘红总黄酮的85％以上。经文献检索，柚皮苷有抗菌、抗病毒作用、有抗变态反应作用、有抗氧化作用以及抗癌作用；野漆树苷有抗氧化作用、有明显的肾细胞膜保护作用以及具有明显的降压作用等。目前，贾冬英等曾报道了光橘红总黄酮的提取工艺，但繁琐，不适合工业化生产，且成本较高，得率较低；毛橘红总黄酮的详细提取工艺，尚未见报道。另外，由于柚皮苷与野漆树苷结构相似，难以分开，目前尚未见用普通溶剂法将两者分离的研究报道。
技术实现思路
本专利技术的目的主要是通过采用简单的醇-水处理方法得到毛橘红总黄酮，以便于工业化生产及其制剂的开发利用。同时通过采用简单的溶剂法，将其中结构相似的柚皮苷与野漆树苷相分离，从而获取高纯度的柚皮苷与野漆树苷单体。本专利技术所叙述的毛橘红总黄酮的主要成份是从中药毛橘红中提取分离得到的化学部位，它是毛橘红中一类性质结构相似的化学成分，它是化学成分(主要是黄酮和二氢黄酮)的总称，外观为黄色固体粉末，易溶于水，可溶于甲醇，柚皮苷和野漆树苷是毛橘红总黄酮中的两个主要有效成分，柚皮苷和野漆树苷的分子式、分子量、结构式如表1 表1柚皮苷和野漆树苷 本专利技术所叙述的毛橘红总黄酮、及毛橘红总黄酮的有效成份柚皮苷、野漆树苷的提取分离方法包括1、毛橘红总黄酮的提取工艺取毛橘红适量，水煎煮，经浓缩、醇沉、水沉等步骤得到毛橘红总黄酮。2、从毛橘红总黄酮中分离柚皮苷与野漆树苷的技术取毛橘红总黄酮适量，用70％甲醇溶液重结晶1～2次，先获得野漆树苷结晶，母液回收甲醇后室温放置48h，分取沉淀，丙酮重结晶1～2次，即得柚皮苷结晶，分别用高效液相色谱法检测其含量。制备方法包括以下具体步骤(1)毛橘红总黄酮的提取工艺毛橘红药材→水提取→浓缩至药材1g/ml→加乙醇至80％→滤过→滤液浓缩至药材2g/ml→加水至生药浓度为0.4g/ml→调pH值至1.5→冷藏72h→分取沉淀→蒸馏水洗涤沉淀→60℃烘干即可。(2)毛橘红总黄酮中野漆树苷与柚皮苷的分离取毛橘红总黄酮适量→70％重量浓度甲醇溶解使成饱和溶液(80℃)→室温放置48h→分取沉淀→70％重量浓度甲醇重结晶1～2次，即得到野漆树苷(其纯度不得低于98％)，分取野漆树苷后的甲醇液(母液)回收甲醇后室温放置48h，分取沉淀，丙酮重结晶1～2次，即得柚皮苷结晶(纯度不得低于95％)。本专利技术所提供的毛橘红总黄酮的用途可用于毛橘红总黄酮制剂的制备制剂(分散片)处方组成毛橘红总黄酮，MCC，CMS-Na，PVPP，硬脂酸镁，十二烷基硫酸钠，微粉硅胶。毛橘红总黄酮分散片制法及组成为毛橘红总黄酮34.25％，MCC 34.25％，CMS-Na 20.55％，PVPP 8.22％，硬脂酸镁0.68％，十二烷基硫酸钠0.68％，微粉硅胶1.37％。制法各原辅料分别过100目筛后，将毛橘红总黄酮粉末与MCC，CMC-Na混匀，加入0.5％PVP水溶液制成软材，30目制粒，70℃干燥，30目整粒后，加入其他辅料，压制成片剂，控制片剂硬度在4.5kg力左右。毛橘红总黄酮及总黄酮制剂具有化痰、止咳、抗炎等作用，在医药工业方面主要可用于医药中间原料、功能产品的原料或添加剂在医疗卫生方面主要可用于咳嗽、痰多、支气管炎、肺炎等的治疗和预防以及心血管疾病的治疗和预防。附图说明图1重结晶前毛橘红总黄酮HPLC图谱图2一次重结晶后野漆树苷甲醇溶液指纹图谱图3一次重结晶后柚皮苷甲醇溶液的HPLC图谱具体实施例方式实施例1取毛橘红药材500g，加水12500ml，浸泡0.5小时后，煮沸2小时，滤过，药渣用水10000再煮沸1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至500ml，缓缓加入乙醇，边加边搅拌，使含醇量达到80％，滤过，滤渣用适量80％乙醇分次洗涤，并入滤液，回收乙醇，浓缩至2g/ml，加入适量蒸馏水使其浓度为0.4g/ml，5mol/L盐酸调pH值至1.5，冷藏，72小时后取出，滤过，沉淀用适量蒸馏水洗涤，60℃干燥，粉碎，过筛，得毛橘红总黄酮，总黄酮的含量以柚皮苷计不得低于80％。实施例2取毛橘红总黄酮粉末10.0g，加入70％甲醇35ml，80℃水浴回流，待全部溶解后，趁热滤过，滤液至50ml具塞三角烧瓶，密闭。室温放置48h，分取粗晶，粗晶再用70％甲醇重结晶1～2次，即得野漆树苷结晶(其纯度达到98.53％)。分取野漆树苷后的甲醇液(母液)回收甲醇后室温放置48h，分取沉淀，丙酮重结晶1～2次，即得柚皮苷结晶(其纯度达到96.85％)实施例3毛橘红总黄酮对小鼠气管段酚红分泌量的影响NIH小鼠44只，随机分成4组，即毛橘红总黄酮高、中、低剂量组(分别为；和生理盐水组。按20ml/kg灌胃给药，每天一次，连续四天，于末次给药后30min，腹腔注射5g/dl酚红0.1ml/10g，30min后处死动物，分离气管段，放入盛有生理盐水的试管中，加入1mol/L氢氧化钠0.1ml，用721型分光光度计，检测波长为546nm，测OD值，并由酚红标准曲线计算酚红含量，q检验比较给药组与空白对照组之间差异的显著性。结果见表2表2 毛橘红总黄酮对小鼠气管段酚红分泌量的影响(x±s) 与生理盐水组比较，**表示P＜0.01结果显示毛橘红总黄酮可明显促进小鼠气管段酚红排出量，与对照组比较有显著性差异，表明毛橘红总黄酮有一定的化痰作用。实施例4毛橘红总黄酮对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响取NIH小鼠44只，随机分为4组，既毛橘红总黄酮高、中、低剂量组和生理盐水组。每组11只，按20ml/kg体重灌胃给药，每天一次，连续四天，于末次给药后60min，在小鼠右耳涂上二甲苯(正、反面各涂20μl)，60min后处死动物，用直径为0.6cm的打孔器在左、右耳相同位置上取相同的面积，称重，计算左右耳重量的差异，结果见表3。表3 毛橘红总黄酮对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(x±s) 与生理盐水组比较，**表示P＜0.01结果显示毛橘红总黄酮高、中、低三个剂量组与生理盐水组比较有显著性差异，表明毛橘红总黄酮有较好的抗炎作用。实施例5毛橘红总黄酮对氨水致咳的影响取NIH小鼠48只，雌雄各半，随机分成毛橘红总黄酮高、中、低剂量组和生理盐水组，按20ml/kg体重灌胃给药，每天一次，连续4d，于末次给药后1h，按小鼠氨水引咳实验法测定各组小鼠咳嗽次数，以给药前后咳嗽次数的差值为指标。q检验比较给药组与空白对照组之间差异的显著性，结果见表4。表4 毛橘红总黄酮对氨水致咳的影响(x±s) 与对照组比较，***表示P＜0.001结果显示毛橘红总黄酮中、低剂量组和生理盐水组比较有极显著性差本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种毛橘红总黄酮，是指从中药毛橘红中提取分离得到的一类有效化学部位，化学成分主要是黄酮和二氢黄酮，外观为黄色固体粉末，易溶于水，可溶于甲醇，柚皮苷和野漆树苷是毛橘红总黄酮中的两个主要有效成分，其特征在于毛橘红总黄酮是用权利要求２中所述的方法从中药材毛橘红中提取制备的。

【技术特征摘要】
1.一种毛橘红总黄酮，是指从中药毛橘红中提取分离得到的一类有效化学部位，化学成分主要是黄酮和二氢黄酮，外观为黄色固体粉末，易溶于水，可溶于甲醇，柚皮苷和野漆树苷是毛橘红总黄酮中的两个主要有效成分，其特征在于毛橘红总黄酮是用权利要求2中所述的方法从中药材毛橘红中提取制备的。2.一种制备权利要求1中所述的毛橘红总黄酮的方法，其特征在于毛橘红总黄酮及其有效成份柚皮苷、野漆树苷是从中药材毛橘红中提取制备的，其制备方法包括1)、毛橘红总黄酮的提取工艺取毛橘红适量，水煎煮，经浓缩、醇沉、水沉步骤得到毛橘红总黄酮；2)、从毛橘红总黄酮中分离柚皮苷与野漆树苷的技术取毛橘红总黄酮适量，用重量含量70％甲醇溶液重结晶1～2次，先获得野漆树苷结晶，母液回收甲醇后室温放置48h，分取沉淀，丙酮重结晶1～2次，即得柚皮苷结晶；制备方法包括以下具体步骤(1)毛橘红总黄酮的提取工艺毛橘红药材→水提取→浓缩→加乙醇至重量浓度为80％→滤过→滤液浓缩→加水→调pH值至1.5→冷藏72h→分取沉淀→蒸馏水洗涤沉淀→60℃烘干即可。(2)毛橘红总黄酮中野漆树苷与柚皮苷的分离取毛橘红总黄酮适量→用重量浓度...

【专利技术属性】
技术研发人员：林励，
申请(专利权)人：化州市绿色生命有限公司，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]