本发明专利技术涉及一种化合物蛋氨酸脑啡肽用于治疗血液、骨髓造血系统癌症的领域，特别是涉及一种蛋氨酸脑啡肽在体内注射和体外细胞培养条件下对血液系统（包括造血系统）癌症细胞进行治疗，以达到治疗目的的方法。所述的蛋氨酸脑啡肽以０．０００１－１０ｍｇ／ｍｌ制备成注射剂或在体外Ｔ淋巴细胞的细胞培养条件中进行培养，使其浓度范围为：１０↑［－２］～１０↑［－１６］克分子／升制成混合注射剂。本发明专利技术的特点在于蛋氨酸脑啡肽在体内或体外直接作用于培养条件下的免疫系统细胞，用量小，效率高。经蛋氨酸脑啡肽激活的免疫系统细胞具有比普通方法激活更高效的免疫细胞增殖数量和细胞活性，一般应高出５－１０倍，特别是Ｔ淋巴细胞数量明显增加。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于采用免疫治疗法治疗肿瘤的
，特别是涉及 一种蛋氨酸脑啡肽在体内注射和体外细胞培养条件下对血液系统(包括造血系 统)癌症细胞进行治疗，以达到治疗目的的方法。
技术介绍
1975年Hughes等人从猪脑抽提液中分离的、具有内源性吗啡 样活性的蛋氨酸脑啡肽(methionine enk印halin， MEK)。后来研究发现是由 肾上腺产生的前激素和前脑啡肽衍生来，释放入血，由酪-甘-甘-苯丙-蛋氨酸 五个氨基酸构成的五肽。正常体内含量极低，每毫升血浆50-150pg。 1975年 被首次发现蛋氨酸脑啡肽具有免疫调节作用。白细胞包括有粒白细胞(中性 粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞)无粒白细胞(淋巴细胞，单核细胞). 正常的T淋巴细胞，巨噬细胞，自然杀伤细胞(NK)含有MEK受体， 一些的肿 瘤细胞也含有MEK受体。近年来研究证明蛋氨酸脑啡肽对免疫系统具有如下作 用增加淋巴细胞数量和活性，增加CD2， CD4， CD8等受体分子的表达，增加 T细胞玫瑰花节形成百分率，增加NK细胞数量活性，增加有丝分裂素诱导的 细胞增殖，增加Y-干扰素^白介素和肿瘤坏死因子等多种细胞因子的产生， 增加单核细胞(巨噬细胞)和中性粒细胞的趋化作用，对树突状细胞的成熟和 活性有明显的促进作用，同时可以诱导肿瘤细胞调亡。我们的研究也证明了上 述部分结果。虽然蛋氨酸脑啡肽具有显著的免疫调节作用，诱导肿瘤细胞凋亡 作用，但如何对血液系统肿瘤患者加以治疗，却没有具体方法。有些文献中提 到在患者血液中加入蛋氨酸脑啡肽溶液，在一定条件下培养，再输入人体内。 但经大量的实验等研究发I见，这些方法不能有效地用于肿瘤患者的治疗，也不 能增加患者的免疫能力。
技术实现思路
专利技术目的本专利技术提供一种化合物蛋氨酸脑啡肽作为制备治疗血液、骨髓 造血系统癌症药物的应用，其目的在于解决现有的蛋氨酸脑啡肽在治疗白血病 方面不能有效治疗、也不能增加患者的免疫力方面存在的问题。技术方案本专利技术是通过以下技术方案实现的化合物蛋氨酸脑啡肽作为制备治疗血液、骨髓造血系统癌症药物的应用， 所述的蛋氨酸脑啡肽以0. 0001-10mg/ml制备成注射剂作为治疗血液、骨髓造 血系统癌症的药物。将上述浓度范围内的蛋氨酸脑啡肽在体外T淋巴细胞的细胞培养条件中 进行培养，体外培养的温度25-38C°范围、2-7天的时间，使其浓度范围为 10—2 10—16克分子/升制成混合注射剂。蛋氨酸脑啡肽加在体外淋巴细胞的细胞培养条件中与一定浓度的淋巴因 子、胸腺肽中的一种一起使用，淋巴因子选用白细胞介素，蛋氨酸脑啡肽与白 细胞介素的重量比为l: 100 10000;蛋氨酸脑啡肽与胸腺肽的重量比为1: 100 10000。蛋氨酸脑啡肽还包括其它蛋氨酸脑啡肽的类似物，如亮氨酸脑啡肽以相同的方法使用。优点及效果本专利技术的特点在于蛋氨酸脑啡肽在体内或体外直接作用于培 养条件下的免疫系统细胞，用量小，效率高。经蛋氨酸脑啡肽激活的免疫系统 细胞具有比普通方法激活更高效的免疫细胞增殖数量和细胞活性，一般应高出 5-10倍，特别是T淋巴细胞数量明显增加。但是，应当指出，蛋氨酸脑啡肽是一种对免疫系统细胞数量和活性双向调节剂，仅仅在一定的浓度范围内有正向 调节作用，超出此范围及呈现负向调节作用，抑制免疫系统细胞的生长。具体实施例方式下面通过具体实施例详细说明如下 实施例l:将化合物蛋氨酸脑啡肽溶解于注射用水或生理盐水，分别制成浓度为 0. 0005mg/ml、 0. 001mg/ml 0. 7mg/ml、 2mg/ml注射齐lj。实施例2:将化合物蛋氨酸脑啡肽溶解于注射用水或生理盐水，分别制成浓度为 0.0005mg/ml、 0. 001mg/ml 0. 7mg/ml、 2mg/ml的冻干粉针制剂。给药方式为通过皮下、静脉或腹腔注射的方式直接施用于患者。 实施例3:取正常人静脉血30毫升，放入含有肝素抗凝剂的试管内(每毫升血液加 入O. 1毫升125-205U)，领取含有淋巴细胞分离液20毫升的试管，将血液轻 轻加到淋巴细胞分离液上，2000转/分，离心20分钟，用吸管吸取淋巴细胞 层，用1640培养液洗涤两次，每次加入30毫升，1500转/分，5分钟。调整 细胞浓度为106个/毫升，按下列设计分组培养(1) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清的细胞培养液；(2) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—2克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(3) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—5克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(4) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，1(T克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(5) ， 106淋巴细胞+ 10亳升含有10%小牛血清，10—7克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(6) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—8克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(7) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—9克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(8) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—1()克分子/升蛋氨酸脑啡肽的细胞培养液；(9) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，1(T'克分子/升蛋氨酸 脑啡肽的细胞培养液；(10) ， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—'6克分子/升蛋氨 酸脑啡肽的细胞培养液；将上述培养放入37t:细胞培养箱中进行培养，分别在24、 48、 72、 96、 120、 168小时时取样进行细胞计数，按照免疫学实验技术进行E-花环形成试 验，检测阳性百分率(百分率越高，表示T细胞活性越高)，并将120小时的 结果作为最终结果，通过静脉或腹腔注射的方法回输患者体内。通过实验证明， 蛋氨酸脑啡肽在体外培养再回输体内的方法，只有在此浓度下(10—2 10—'6克 分子/升)及这种培养条件(体外培养的温度25-38C。范围、2-7天的时间) 才有治疗和免疫的效果，其它情况均为无效。实施例4:.1， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清的细胞培养液；2， 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清，10—3克分子/升蛋氨酸脑啡 肽的细胞培养液+ 1毫克小牛胸腺肽；胸腺肽的浓度为1毫克/毫升。将上述培养放入37。C细胞培养箱中进行培养，分别在24、 48、 72、 96、 120小时时取样进行细胞计数，按照免疫学实验技术进行E-花环形成试验，并 将120小时的结果作为最终结果，将细胞处理后回输体内。实施例5:1, 106淋巴细胞+ 10毫升含有10%小牛血清的细胞培养液；2， 106淋巴细胞+10毫升含有10%小牛血清，10—3克分子/升蛋氨酸脑啡 肽的细胞培养液+ l毫克白细胞介素；白细胞介素的浓度为2毫克/毫升。将上述培养放入37-C细胞培养箱中进行培养，分别在24、 48、 72、 96、 120小时时取样进行细胞计数，按照免疫学实验技术进行E-花环形成试验，并将120小时的结果作为最终结果，将细胞处理后回输体内。 在以上实施例的研究基础上；李某，男，25岁，中性粒细胞白血病晚期，本文档来自技高网...
【技术保护点】
化合物蛋氨酸脑啡肽作为制备治疗血液、骨髓造血系统癌症药物的应用，所述的蛋氨酸脑啡肽以０．０００１－１０ｍｇ／ｍｌ制备成注射剂作为治疗血液、骨髓造血系统癌症的药物。
【技术特征摘要】
1、化合物蛋氨酸脑啡肽作为制备治疗血液、骨髓造血系统癌症药物的应用，所述的蛋氨酸脑啡肽以0.0001-10mg/ml制备成注射剂作为治疗血液、骨髓造血系统癌症的药物。2、 根据权利要求1所述的化合物蛋氨酸脑啡肽作为制备治疗血液、骨髓 造血系统癌症药物的应用，其特征在于将权利要求l浓度范围内的蛋氨酸 脑啡肽在体外T淋巴细胞的细胞培养条件中进行培养，体外培养的温度25-38C °范围、2-7天的时间，使其浓度范围为10—2 10—16克分子/升制成混合注射 剂。3、 根据权利要求2所述的化...
【专利技术属性】
技术研发人员：单风平，吕昌龙，尼古拉波罗尼可夫，黄建寅，
申请(专利权)人：单风平，
类型：发明
国别省市：89[]
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