用于改进对表达CD138的肿瘤细胞的靶向的方法和试剂技术

本申请公开了对CD138具有特异性的免疫缀合物及其使用方法，该免疫缀合物减少表达CD138的肿瘤细胞粘着至基质细胞。该粘着的减少使得肿瘤细胞不仅对所述免疫缀合物易感，还对其它试剂、特别是细胞毒性剂易感。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于改进对表达CD138的肿瘤细胞的靶向的方法和试剂相关申请的交叉引用本申请要求于2007年12月26日提交的美国临时申请61/016,614、2008年8月8日提交的临时申请61/087,466和同样于2008年8月8日提交的临时申请61/087,590的权益，本文通过参考并入其全部内容。
本专利技术涉及抵抗抗原CD138的免疫缀合物和包含所述免疫缀合物的组合物在减少基质细胞粘着至表达CD138的靶细胞上的应用，从而更有效地治疗涉及表达CD138的细胞的疾病状态。
技术介绍
作为细胞外基质的受体的CD138在多发性骨髓瘤(MM)细胞上过表达，并且已经表现出影响MM细胞发育和/或增殖。举例而言，CD138还在卵巢癌、肾癌、胆囊癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、结肠癌细胞和霍奇金氏淋巴瘤与非霍奇金氏淋巴瘤、慢性淋巴性白血病(CLL)等的细胞上表达。在此用于说明本专利技术，特别是提供关于实施的额外详细说明的出版物和包括专利等的其它材料，均通过参考并入。方便起见，所述出版物在下文中按照作者和日期引用，和/或按照所附目录中的作者依照字母顺序列出。Tassone等(2004)已经报道了鼠IgG1抗体B-B4对在MM细胞表面上表达的CD138抗原的良好结合。Tassone还报道了包含类美登素(maytansinoid)DM1作为效应分子的免疫缀合物B-B4-DM1对多发性骨髓瘤细胞的高细胞毒性活性(还参见美国专利公开20070183971)。Tassone还指出其B-B4缀合物即使在骨髓微环境中也有效，所述骨髓微环境诱导多发性骨髓瘤(MM)细胞对通常施用至MM患者的许多药物(包括例如地塞米松)产生抗性。Tassone的免疫缀合物能够有效地破坏骨髓基质环境中的MM肿瘤细胞。尽管Tassone等已经为提供MM的有效治疗和可以在此类治疗中使用的物质的组成作为贡献，但本领域仍然存在许多需要。仍然存在对改进使用基于B-B4的免疫缀合物的治疗的需要。还存在对使用显示一种或多种有利性质的基于B-B4的免疫缀合物的有效治疗的需要。免疫缀合物的性质优选包括改进的抗原结合、改进的肿瘤细胞(特别是表达CD138的肿瘤细胞以及其附属细胞)杀伤或对靶标更均匀的结合，但特别是更有效地抗击与表达CD138的细胞有关的疾病状态的能力。
技术实现思路
本专利技术涉及一种用于减少有需要的受试对象的肿瘤细胞中基质细胞粘着至表达CD138的肿瘤细胞的方法，所述方法包括：以对于减少基质细胞粘着至表达CD138的肿瘤细胞而言有效的量对所述肿瘤细胞施用靶向所述表达CD138的肿瘤细胞(特别是含有如本文所公开的可切割连接子和效应子的表达CD138的肿瘤细胞)的免疫缀合物，以及可选地以抑制、延缓和/或预防肿瘤细胞生长的量对所述肿瘤细胞施用其它细胞毒性剂。所述粘着可以减少至少约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％以上，和/或可以导致对粘着介导的药物抗性的缓解，所述抗性包括粘着介导的抵抗其它细胞毒性剂(其不是上述免疫缀合物中的一种)的药物抗性，并且其中以抑制、延缓和/或预防肿瘤细胞生长的量施用所述其它细胞毒性剂。可以依次地施用所述免疫缀合物和该细胞毒性剂，其中所述细胞毒性剂可以在施用所述免疫缀合物之后施用，或可以同时施用。本专利技术的免疫缀合物特别地包含：(a)基因工程靶向抗体，和(b)效应分子，其中所述免疫缀合物均匀地靶向表达CD138的靶细胞。本专利技术的基因工程靶向抗体可以(i)基本上由非人类抗体的抗CD138抗原结合区构成，或(ii)包含抗CD138抗原结合区(ABR)，其中所述抗原结合区出自非人类抗体，和另外的抗体区，其中所述另外的抗体区的至少一部分出自人类抗体。所述ABR可以分别包含：(a)包含SEQIDNO：1的氨基酸残基99～111的重链可变区CDR3和(b)包含SEQIDNO：2的氨基酸残基89～97的轻链可变区CDR3。所述ABR还可以分别包含：(a)包含SEQIDNO：1的氨基酸残基31～35和51～68的重链可变区CDR1和CDR2，和/或(b)包含SEQIDNO：2的氨基酸残基24～34和50～56的轻链可变区CDR1和CDR2。所述另外的抗体区可以分别包含：(a)SEQIDNO：1的氨基酸残基123～448，和/或(b)SEQIDNO：2的氨基酸残基108～214，以及其突变体，所述突变体(i)维持或降低所述基因工程靶向抗体的抗体依赖性细胞毒性和/或补体依赖性细胞毒性，和/或(ii)稳定所述基因工程靶向抗体。效应分子可以经由连接子连接至所述基因工程靶向抗体。所述连接子可以包含二硫键。效应分子(例如DM4)可以在靶向抗体和该效应分子之间提供空间位阻。效应分子可以为至少一种类美登素(maytansinoid)(例如DM1、DM3或DM4)、紫杉烷或CC1065，或其类似物。所述免疫缀合物可以结合CD138，靶向变异(targetingvariation)小于150％、140％、130％、120％、110％、100％、90％、80％、70％、60％或50％。本专利技术还涉及一种免疫缀合物，所述免疫缀合物包含：靶向CD138的靶向剂，所述靶向剂包含分离的多肽，所述多肽包含免疫球蛋白重链或其一部分的氨基酸序列，其中所述免疫球蛋白重链或其一部分与SEQIDNO：1具有至少70％序列同一性。所述免疫球蛋白重链或其一部分的恒定区可以为IgG4同型的恒定区。本专利技术还涉及一种治疗受试对象中的MM的方法，所述方法包括：提供一种或多种本文指定的免疫缀合物，和以对治疗多发性骨髓瘤而言有效的量对所述受试对象施用所述免疫缀合物。所述免疫缀合物的靶向剂可以包含与SEQIDNO：2具有至少约70％序列同一性的轻链序列。所述免疫缀合物的靶向剂还可以包含与SEQIDNO：1具有至少约70％序列同一性的重链序列。本专利技术还涉及一种用于免疫缀合物介导的药物输送的方法，所述方法包括：提供一种或多种本文指定的免疫缀合物，和以治疗有效量施用所述免疫缀合物，其中所述IgG4同型缓解ADCC、补体依赖性细胞毒性和/或Fc-介导的肝FcR的靶向。本专利技术还涉及一种抑制、延缓和/或预防细胞培养物中的肿瘤细胞生长的方法，所述方法包括：以抑制、延缓和/或预防肿瘤细胞生长有效的量对所述细胞培养物施用一种或多种本文指定的一种或多种免疫缀合物。所述有效的量可以诱导表达CD138的肿瘤细胞和可选的不表达CD138的辅助细胞(特别是肿瘤基质细胞)中的细胞死亡或连续细胞周期的停滞。所述细胞培养物中的细胞可以获自癌症患者，并且在施用所述有效量的所述免疫缀合物后，可以将所述细胞培养物的细胞再植入所述癌症患者。本专利技术还涉及一种用于在有需要的患者中抑制、延缓和/或预防包含CD138肿瘤细胞的肿瘤生长和/或此类肿瘤的肿瘤细胞的扩散的方法，所述方法包括：以抑制或降低所述肿瘤生长和/或所述肿瘤细胞扩散的量，对所述患者施用至少一种或多种上述免疫缀合物，其中所述免疫缀合物抑制、延缓或预防所述肿瘤细胞的生长和/或扩散。所述免疫缀合物的效应分子可以为毒素、细胞毒性酶、低分子量细胞毒性药物、成孔剂、生物响应修饰剂、前药激活酶、抗体、细胞因子或放射性核素。可以以5mg/m2～约300mg/m2的单次剂量可选地以每小时、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于减少有需要的受试对象的肿瘤细胞中基质细胞粘着至表达ＣＤ１３８的肿瘤细胞的方法，所述方法包括：　　以对于减少基质细胞粘着至表达ＣＤ１３８的肿瘤细胞有效的量对所述肿瘤细胞施用靶向所述表达ＣＤ１３８的肿瘤细胞的免疫缀合物，和可选地以抑制、延缓和／或预防肿瘤细胞生长的量对所述肿瘤细胞施用其它细胞毒性剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-12-26 61/016,614;US 2008-8-8 61/087,590;US1.靶向表达CD138的肿瘤细胞的免疫缀合物在制备用于减少有需要的受试对象中基质细胞粘着至表达CD138的肿瘤细胞的药物中的应用，其中所述免疫缀合物用于以对于减少基质细胞粘着至表达CD138的肿瘤细胞有效的量对所述肿瘤细胞施用，其中所述免疫缀合物包含效应分子和靶向剂，其中所述靶向剂是基因工程靶向抗体，其中该基因工程靶向抗体包含由SEQIDNO:1组成的重链和由SEQIDNO:2组成的轻链，且其中所述效应分子是至少一种类美登素，其中所述效应分子和所述靶向剂经由可切割连接子而相互连接，所述可切割连接子为SPP或SPDB；且其中所述免疫缀合物与其它细胞毒性剂一起施用，其中依次地施用所述免疫缀合物和所述其它细胞毒性剂，和其中在施用免疫缀合物之后施用所述其它细胞毒性剂。2.如权利要求1所述的应用，其中所述粘着减少导致粘着介导的药物抗性的缓解。3.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：本杰明德尔肯，克里斯托夫尤尔克，肯尼思安德森，秀岛辉，克里斯托夫布鲁切尔，
申请(专利权)人：生物测试股份公司，伊缪诺金公司，丹纳法伯癌症研究所，
类型：发明
国别省市：DE[德国]