本发明专利技术公开了减小由过氧化氢酶受叠氮化物的抑制引起的测定误差的方法，其是测定对象成分的定量方法，包含用过氧化氢酶分解来源于测定对象成分以外的成分的过氧化氢。由过氧化氢酶受叠氮化物的抑制引起的测定误差的减小方法，是用过氧化氢酶分解来源于测定对象成分以外的成分的过氧化氢，然后，通过将来源于测定对象成分的过氧化氢定量从而对上述测定对象成分进行定量，此时使用来源于具有７５ｋＤａ以上亚基的微生物的过氧化氢酶作为过氧化氢酶。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及。
技术介绍
在临床检查领域，广泛使用由测定对象成分生成过氧化氢，再通过对该过氧化氢 进行定量来测定对象成分的样品中浓度的方法。在这种方法中，由测定对象成分以外的物 质所生成的过氧化氢成为测定值误差的主要原因，因此一般采用的方法是通过以下方法来 消除由测定对象成分以外的物质所生成的过氧化氢，即、使过氧化氢酶作用而分解成水和 氧的方法、或使用过氧化物酶而与酚系或者苯胺系氢供体化合物反应转化成无色醌的方 法。例如，在中性脂肪测定用试剂中被用于内源性游离甘油的消除体系、在肌酸酐测定试剂 中被用于肌酸和肌氨酸(YA 二〉> )的消除体系、在HDL-胆甾醇或LDL-胆甾醇测定用 试剂中被用于目标成分以外的脂蛋白中胆甾醇的消除体系。应予说明，迄今为止，作为利用 过氧化氢酶的测定体系中所用的过氧化氢酶，一般使用来源于牛的过氧化氢酶。其中，虽常使用基于过氧化氢酶的消除体系，但有时会由于混入抑制过氧化氢酶 的成分而受妨碍。特别是叠氮化物的混入即使极微量也会强有力地抑制过氧化氢酶，因此 妨碍消除体系、无法充分消除产生自测定对象成分以外的过氧化氢，因而使测定值产生误 差。叠氮化钠之类的叠氮化物在临床检查领域被广泛用作防腐剂，混入测定体系的可 能性非常高。测定体系中叠氮化物的混入已知以下几种情形测定样品本身所含有的情形、 叠氮化物从存在于附近的含叠氮化物试剂中作为叠氮化氢气化而溶入测定试剂中的情形、 经由自动分析装置的取样探针从其它含叠氮化物试剂中将叠氮化物带入测定试剂中的情 形。专利文献1 日本特开平10-14596号公报专利文献2 日本特许第3164829号登载公报专利文献3 日本特许第3058602号登载公报
技术实现思路
专利技术要解决的问题因此，本专利技术的目的在于提供减小由过氧化氢酶受叠氮化物的抑制引起的测定误 差的方法，其是测定对象成分的定量方法，包含用过氧化氢酶分解来源于测定对象成分以 外的成分的过氧化氢。本专利技术人进行了深入研究，结果发现与以往使用的来源于牛的过氧化氢酶相比， 来源于具有75kDa以上亚基的微生物的过氧化氢酶极难受到叠氮化物的抑制，因而想到通 过使用来源于具有75kDa以上亚基的微生物的过氧化氢酶作为测定体系所用的过氧化氢 酶，可以减小由过氧化氢酶受叠氮化物的抑制引起的测定误差，从而完成了本专利技术。即，本专利技术提供，其 特征在于，用过氧化氢酶分解来源于测定对象成分以外的成分的过氧化氢，然后，通过将来 源于测定对象成分的过氧化氢定量从而对上述测定对象成分进行定量，此时使用来源于具 有75kDa以上亚基的微生物的过氧化氢酶作为上述过氧化氢酶。根据本专利技术，首次提供了减小由过氧化氢酶受叠氮化物的抑制引起的测定误差的 方法。根据本专利技术可以比以往更准确地对例如中性脂肪、LDL胆留醇、HDL胆留醇、肌酸酐等 测定对象成分进行定量。具体实施例方式如上所述，本专利技术人得到了以下惊人发现与以往所用的来源于牛的过氧化氢酶 相比，来源于具有75kDa以上亚基的微生物的过氧化氢酶极难受到叠氮化物的抑制。本发 明基于该新发现。含血红素的过氧化氢酶即单功能过氧化氢酶可以分类为具有小亚基(55 69kDa)的过氧化氢酶、和具有大亚基(75kDa以上)的过氧化氢酶。本专利技术的方法中所用的 过氧化氢酶为具有上述大亚基(75kDa以上)的过氧化氢酶。作为本专利技术的方法中所用的上述过氧化氢酶的来源微生物，是来源于真 菌、细菌和一部分古细菌的微生物，更具体而言，可以列举鹅柄孢壳菌(Podospora anserina)、粗糖脉抱菌(Neurospora crossa)、暗黄枝抱(Cladosporium fulvum)、构 巢裸胞壳(Emericella nidulans)、糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)、耐辐射异常球 菌(Deinococcus radiodurans)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、鼠伤寒沙门氏 菌(Salmonellatyphimurium)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、恶臭假单胞菌 (Psuedomonas putida)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillis)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)、 富氏葡萄孢盘菌(Botryotinia fuckeliana)、紫瘢麦角菌(Clavic^ps purpurea)、烟曲 菌(Aspergillus fumigatus)、荚膜组织胞菜菌(Ajellomyces capsulatus)、构巢曲霉 (Aspergillus nidulans)、黑色曲霉(Aspergillus niger)、根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)、苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)、百脉根中间根瘤菌 (Mesorhizobium Ioti)、幢虫微孢子虫(Nosema locustae)、水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae)、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)等。已知细菌等生产多种过氧化氢 酶，而具有大亚基(75kDa以上)的过氧化氢酶是本专利技术的方法中所用的过氧化氢酶。但 是，上述具有大亚基的过氧化氢酶中即使混入了上述具有小亚基的过氧化氢酶也不会影响 本专利技术的实施。上述微生物生产的过氧化氢酶中，作为具有大亚基(75kDa以上)的过氧化氢酶 中公知的过氧化氢酶，可以列举鹅柄孢壳菌CatA(Podospora anserina CatA)、烟曲菌 CatA (Aspergillus fumigatusCatA)、构巢裸胞壳 CatA (Emericella nidulans CatA)、荚膜 ^ΜΜΜ CatA(Ajellomyces capsulatus CatA)、；胃 KatE (EscherichiaColi KatE)、大肠埃希氏菌 K12 (Escherichia coli K12)、恶臭假单胞菌 CatC(Pseudomonas putida CatC)、枯草芽孢杆菌过氧化氢酶2 (Bacillussubtilis catalase 2)、枯草芽孢杆 菌KatE(Bacillus subtillis KatE)、坚强芽孢杆菌KatA(Bacillus firmus KatA)、鸟分枝杆菌KatE(Mycobacteriumavium KatE)、烟曲菌CatB(Aspergillus fumigatus CatB)、荚膜 CatB (Ajellomyces capsulatus CatB)、丰勾CatA (Aspergi 1 lusnidulans CatA)、！Ife ffi CatR(AspergiIlus niger CatR) > IH±ff ^ CatC(Agrobacterium tumefaciens CatC)、苜蓿中华根瘤菌 CatC(Sinorhizobium meliloti CatC)、幢虫微孢子 虫(Nosema locustae)、7本文档来自技高网...
【技术保护点】
由过氧化氢酶受叠氮化物的抑制引起的测定误差的减小方法，其特征在于：用过氧化氢酶分解来源于测定对象成分以外的成分的过氧化氢，然后，通过将来源于测定对象成分的过氧化氢定量从而对所述测定对象成分进行定量，此时使用来源于具有７５ｋＤａ以上亚基的微生物的过氧化氢酶作为所述过氧化氢酶。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：平尾裕子，
申请(专利权)人：电化生研株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]
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