过氧化氢酶活性测定仪及其使用方法技术

一种过氧化氢酶活性测定仪，呈有盖（11）的反应筒（4），盖中心有按转轴（14）、轴上和轴旁有凸栓（15）和卡口座（12），轴上套有弹簧（13），盖上还有气液进口（17），反应筒侧壁上有带启闭阀的测氧气孔（6）、通液气孔（5）和放液孔（1），且均有密封圈（18）。反应筒内有存液皿（10）、胶片（9）、小孔分流托片（8）和搅拌筛（2），圆面上均开有分流孔或筛孔（16、19、3），反应筒内侧壁上部有搁台（7）。使用步骤：一是使用前的预处理和检查，二是加料和关闭阀门，三是测原始氧气量，四是混合、反应和再测量，五是比较和计算，六是放废水和换气。本发明专利技术能测得反应全过程的数据，精度高，用产氧量反映酶活性，是一套全新的技术方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种化学实验仪器，具体是用于酶促反应气体产生量的增减变化、间接显示酶活性的测定仪及其使用方法。
技术介绍
过氧化氢酶活性的测定，一直以来是按过氧化氢与过氧化氢酶在酶促反应中过氧化氢量的减少，用紫外分光光度计240nm波长的紫外光照射，吸光度逐渐降低，测出吸光度的变化速度，测出过氧化氢酶的活性。具体做法是将过氧化氢酶与过氧化氢置于比色皿中，立即将分光光度计也置于比色皿内，开启光度计、盖上比色皿的盖，进行比色测定。这种比色仪进行测定时，投放过氧化氢酶与投放过氧化氢几乎是同时进行，因酶促反应中的酶具有高效性，两者一旦混合，反应就开始，过氧化氢的反应损耗也已经产生，即使立即投放分光光度计、开始实测，还是无法反映出这时间差中过氧化氢的损耗量，所测数据不甚准确，误差较大。本专利技术是将过氧化氢酶与过氧化氢反应中氧气产生量的增减来反映过氧化氢酶的活性，反应与实测同步进行，既没有时间差，又能显示出整个反应的全貌，为此，设计出一种专用的测定仪和提供一套配套的新的使用方法，经检索和市场调查，未见有相关资料报道和实物面市。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种在酶促反应中将过氧化氢的减量改为氧气的增量来反映过氧化氢酶的活性，能使反应与实测同步进行且误差小的一种过氧化氢酶活性测定仪及其使用方法。解决上述技术问题采用如下技术方案：本过氧化氢酶活性测定仪，包括反应和测定部件，呈圆筒体的反应筒上部有内衬密封圈的盖，盖上有带启闭阀的气液进口，该盖中心有轴孔并安装有上部带凸栓和套有复位弹簧的按转轴，盖上的轴孔两侧安装有卡口座，座上有卡口，按转轴的中上段和下端段有定位销孔；反应筒的侧壁上安装有测氧气孔、通液气孔和放液孔，这三孔均带有启闭阀，反应筒的上部内壁上有圆环形搁台，反应筒内由上至下有存液皿、胶片、小孔分流托片和搅拌筛，存液皿上和胶片上有轴孔和孔径相同、位置对应的大分流孔，小孔分流托片上有轴孔和小分流孔，搅拌筛上有轴孔和筛孔，存液皿和胶片搁放在搁台上，小孔分流托片和搅拌筛均有与按转轴的定位销孔位置对应的定位销，反应筒盖及侧壁上与外界的通孔周围均安装有密封圈。所述的存液皿轴孔的孔径比按转轴直径大1-2mm，胶片轴孔的孔径比按转轴直径大0.1-0.2mm，小孔分流托片轴孔的孔径比按转轴直径大0.1-0.2mm。所述的存液皿、胶片、小孔分流托片和搅拌筛上的大分流孔或小分流孔由外及内均呈同心圆排列，顺着放射线方向分布。所述的反应筒的内径比存放皿的外径和胶片的直径大1-2mm；所述的小孔分流托片的直径大于存液皿或胶片最外周作同心圆排列的各大分流孔外侧弧线的切线连接圆的直径，且小于圆环形搁台的内径。本过氧化氢酶活性测定仪的使用方法按如下步骤进行：（1）使用前的预处理和检查：①：选购好合适浓度的过氧化氢溶液和配制好待测的过氧化氢酶溶液；②：清洗与安装好反应筒及其内外各部件，盖上盖体并至密封，将上下重合的存液皿与胶片一起架搁在圆环形搁台上，将测氧气孔与测氧仪连接好；③检查各阀门的开与闭，关闭放液孔上的阀门，开启气液进口、测氧气孔和通液气孔上的阀门；④将按转轴向上提并作小角度的反时针转动，使搅拌筛和小孔分流托片上行，后者紧贴胶片，在大分流孔与小分流孔不贯通时，凸栓搁在卡口座上定位；（2）加料和关闭阀门：从通液气孔向反应筒内加入经称量的过氧化氢溶液，从气液进口向存液皿加入经称量的过氧化氢酶溶液，再关闭上述两孔或口上的阀门；（3）测量、读取并记录反应筒内原始的氧气含量；（4）放料、使两溶液混合、反应和测量：顺时针拧动按转轴，使凸栓脱离卡口座，进一步按下按转轴，使小孔分流托片与胶片脱离，存液皿内的过氧化氢酶液快速从大分流孔直接下流，与过氧化氢溶液混合并快速反应，上下多次按动按转轴，使混合液在该筛的上下搅动中更快速、充分反应；按每隔30秒测一次含氧量，并读取和记录相关数据；（5）根据实测的单位时间的增氧量、按公式计算和比较过氧化氢酶的活性；（6）放水、换气，准备再测：一次测定结束，从放液孔放掉反应生成的废液，打开通液气孔和气液进口的阀门，将反应筒内反应生成的气体换成大气，再重复上述步骤，进行下一次测定。本专利技术的有益效果是：本测定仪及其使用方法，能使反应与实测同步进行，所测数据，能反映出整个反应的全貌，精度高、误差小，且提供了一种酶活性测定的新仪器、新思路和新的使用方法。附图说明图1为本测定仪结构示意图。图2为本测定仪存液皿和托片上的大分流孔布局状态示意（俯视）图。图3为本测定仪小孔分流托片上的小分流孔布局状态示意（俯视）图。具体实施方式本专利技术下面结合实施例并参照附图予以详述：参见图1-3，本过氧化氢酶活性测定仪，包括反应和测定部件，呈圆筒体的反应筒4上部有内衬密封圈的盖11，盖上有带启闭阀的气液进口17，该盖中心有轴孔a并安装有上部带凸栓15和套有复位弹簧13的按转轴14，盖上的轴孔两侧安装有卡口座12，座上有卡口，按转轴的中上段和下端段有定位销孔；反应筒的侧壁上安装有测氧气孔6、通液气孔5和放液孔1，这三孔均带有启闭阀，反应筒的上部内壁上有圆环形搁台7，反应筒内由上至下有存液皿10、胶片9、小孔分流托片8和搅拌筛2，存液皿上和胶片上有轴孔和孔径相同、位置对应的大分流孔16，小孔分流托片上有轴孔和小分流孔19，搅拌筛上有轴孔和筛孔，存液皿和胶片搁放在搁台上，小孔分流托片和搅拌筛均有与按转轴的定位销孔位置对应的定位销20，反应筒盖及侧壁上与外界的通孔周围均安装有密封圈18。所述的存液皿轴孔a的孔径比按转轴直径大1-2mm，胶片轴孔的孔径比按转轴直径大0.1-0.2mm，小孔分流托片轴孔的孔径比按转轴直径大0.1-0.2mm。所述的存液皿、胶片、小孔分流托片和搅拌筛上的大分流孔16或小分流孔19由外及内均呈同心圆排列，顺着放射线方向分布。所述的反应筒4的内径比存放皿10的外径和胶片9的直径大1-2mm；所述的小孔分流托片8的直径大于存液皿或胶片最外周作同心圆排列的各大分流孔16外侧弧线的切线连接圆b的直径，且小于圆环形搁台7的内径。使用权利要求1的过氧化氢酶活性测定仪的方法按如下步骤进行：（1）使用前的预处理和检查：①：选购好合适浓度的过氧化氢溶液和配制好待测的过氧化氢酶溶液；②：清洗与安装好反应筒及其内外各部件，盖上盖体并至密封，将上下重合的存液皿与胶片一起架搁在圆环形搁台上，将测氧气孔与测氧仪连接好；③检查各阀门的开与闭，关闭放液孔上的阀门，开启气液进口、测氧气孔和通液气孔上的阀门；④将按转轴向上提并作小角度的反时针转动，使搅拌筛和小孔分流托片上行，后者紧贴胶片，在大分流孔与小分流孔不贯通时，凸栓搁在卡口座上定位；（2）加料和关闭阀门：从通液气孔向反应筒内加入经称量的过氧化氢溶液，从气液进口向存液皿加入经称量的过氧化氢酶溶液，再关闭上述两孔或口上的阀门；（3）测量、读取并记录反应筒内原始的氧气含量；（4）放料、使两溶液混合、反应和测量：顺时针拧动按转轴，使凸栓脱离卡口座，进一步按下按转轴，使小孔分流托片与胶片脱离，存液皿内的过氧化氢酶液快速从大分流孔直接下流，与过氧化氢溶液混合并快速反应，上下多次按动按转轴，使混合液在该筛的上下搅动中更快速、充分反应；按每隔30秒测一次含氧量，并读取和记录相关数据；（5）根据实测的单位时间的增氧量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种过氧化氢酶活性测定仪，包括反应和测定部件，其特征是呈圆筒体的反应筒（4）上部有内衬密封圈的盖（11），盖上有带启闭阀的气液进口（17），该盖中心有轴孔（a）并安装有上部带凸栓（15）和套有复位弹簧（13）的按转轴（14），盖上的轴孔两侧安装有卡口座（12），座上有卡口，按转轴的中上段和下端段有定位销孔；反应筒的侧壁上安装有测氧气孔（6）、通液气孔（5）和放液孔（1），这三孔均带有启闭阀，反应筒的上部内壁上有圆环形搁台（7），反应筒内由上至下有存液皿（10）、胶片（9）、小孔分流托片（8）和搅拌筛（2），存液皿上和胶片上有轴孔和孔径相同、位置对应的大分流孔（16），小孔分流托片上有轴孔和小分流孔（19），搅拌筛上有轴孔和筛孔，存液皿和胶片搁放在搁台上，小孔分流托片和搅拌筛均有与按转轴的定位销孔位置对应的定位销（20），反应筒盖及侧壁上与外界的通孔周围均安装有密封圈（18）。

【技术特征摘要】
1.一种过氧化氢酶活性测定仪，包括反应和测定部件，其特征是呈圆筒体的反应筒（4）上部有内衬密封圈的盖（11），盖上有带启闭阀的气液进口（17），该盖中心有轴孔（a）并安装有上部带凸栓（15）和套有复位弹簧（13）的按转轴（14），盖上的轴孔两侧安装有卡口座（12），座上有卡口，按转轴的中上段和下端段有定位销孔；反应筒的侧壁上安装有测氧气孔（6）、通液气孔（5）和放液孔（1），这三孔均带有启闭阀，反应筒的上部内壁上有圆环形搁台（7），反应筒内由上至下有存液皿（10）、胶片（9）、小孔分流托片（8）和搅拌筛（2），存液皿上和胶片上有轴孔和孔径相同、位置对应的大分流孔（16），小孔分流托片上有轴孔和小分流孔（19），搅拌筛上有轴孔和筛孔，存液皿和胶片搁放在搁台上，小孔分流托片和搅拌筛均有与按转轴的定位销孔位置对应的定位销（20），反应筒盖及侧壁上与外界的通孔周围均安装有密封圈（18）。2.如权利要求1所述的过氧化氢酶活性测定仪，其特征是所述的存液皿轴孔（a）的孔径比按转轴直径大1-2mm，胶片轴孔的孔径比按转轴直径大0.1-0.2mm，小孔分流托片轴孔的孔径比按转轴直径大0.1-0.2mm。3.如权利要求1所述的过氧化氢酶活性测定仪，其特征是所述的存液皿、胶片、小孔分流托片和搅拌筛上的大分流孔（16）或小分流孔（19）由外及内均呈同心圆排列，顺着放射线方向分布。4.如权利要求1所述的过氧化氢酶活性测定仪，其特征是所述的反应筒（4）的内径比存放皿（10）的外径和胶片（9）的直径大1-2mm；所述的小孔分流托片（8）的直径大于存液皿或...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞率成，
申请(专利权)人：俞率成，
类型：发明
国别省市：浙江;33