脐带间充质干细胞的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种人脐带间充质干细胞的制备方法，本发明专利技术的步骤包括：（１）取人脐带用酒精消毒，生理盐水洗涤后剔除血管；（２）加入胶原酶、透明质酸酶、蛋白中性酶消化；（３）收集细胞悬液，离心，弃去上清液，培养，即可获得间充质干细胞。本发明专利技术为新生儿储存脐带间充质干细胞以及今后大规模临床应用间充质干细胞提供了一种较为简单、高效的分离方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及脐带间充质干细胞的获取方法，更具体地涉及一种酶消化法来制备脐 带间充质干细胞的制备方法。
技术介绍
间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)最早是从骨髓分离出的成体干细 胞。MSC具有较强的粘附性，低密度培养时能够迅速贴壁，且具有快速增殖的能力。MSC体外 培养能保持核型的稳定及端粒酶的活性。目前主要是根据其形态、抗原表型及分化潜能来 鉴定MSC。传代后骨髓MSC的形态呈单一类成纤维细胞的长梭形。迄今尚未发现MSC的特异 性表面标志，MSC均勻稳定的抗原标记包括:SH2 (+)、SH3 (+)、CD29 (+)、CD44 (+)、CD71 (+)、 CD90 (+)、CD106(+)、CD120a(+)、CD124(+)，不表达造血细胞表面标志 CD34、CD45、CD14、 CDl 17和与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志HLA-DR、B7-1 (CD80)、B7_2 (CD86)、CD40 等。MSC在体外不同的微环境诱导下可向不同的组织分化，用地塞米松，β-磷酸甘油和抗 坏血酸等联合诱导，MSC可以分化为成骨细胞；在3-异丁基-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
脐带间充质干细胞分离方法，包括：　　（１）脐带剔除血管的处理；　　（２）酶消化步骤，　　（３）收集消化后的细胞；　　（４）对收集获得的细胞进行培养；　　其特点是所用的酶为２Ｕ／ｍｌ中性蛋白酶＋２ｍｇ／ｍｌ胶原酶Ⅰ＋２Ｕ／ｍｌ透明质酸酶。

【技术特征摘要】
脐带间充质干细胞分离方法，包括(1)脐带剔除血管的处理；(2)酶消化步骤，(3)收集消化后的细胞；(4)对收集获得的细胞进行培养；其特点是所用的...

【专利技术属性】
技术研发人员：程腊梅，卢光琇，肖娜，
申请(专利权)人：湖南光琇高新生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]