海绵动物抗肿瘤化合物制造技术

分离自海绵动物的新抗肿瘤化合物，如式（１）、（２）、（３）和（４）所示。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及从海绵动物中得到的抗肿瘤化合物。我们对从伊良部岛以西150km的Iriomote岛一带的珊瑚礁收集到的海绵动物即后来被命名为Stylotella aurantium的海绵动物(在澳大利亚产生二氯碳化亚胺的相同物类6)的细胞毒素组成进行了检验。我们的样品也得到了倍半萜二氯碳化亚胺，包括五种新的同族元素(1-5)，它们是引起该海绵动物的亲脂性萃取液细胞毒性的原因。由此，我们提供由海绵动物Stylotella aurantium获取的五种已被分离的具有二氯碳化亚胺或者醛官能的新倍半萜(1-5)，它们与七种已知的相关化合物(6-12)一起存在。新化合物的结构已由光谱数据说明。确定了先前报道的reticulidin A(10)的绝对立体化学。所述新化合物中的四种显示出相对于几种癌细胞系IC50值为0.1-1μg/mL的细胞毒性。 昆士兰博物馆的Dr.J.N.A.Hooper确认了该海绵动物(OP-98-30)为Stylotella aurantium Kelly-Borges & bergquist，1988(Porifera，Demospongiae，Halichondrida，Axinellidae)。凭据样品(QM G317008)保存在澳大利亚南布里斯班昆士兰博物馆。抗肿瘤活性 优选实施方案考虑到体外活性，预期本专利技术的化合物，化合物(1)-(4)可用于治疗癌症。因此，本专利技术提供一种对患癌症的任何哺乳动物(特别是人类)进行治疗的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的本专利技术化合物或其药用组合物。本专利技术还涉及药用组合物及其制备方法，该药用组合物包含作为活性成分的本专利技术化合物。药用组合物的例子包括具有适当组成的任何固体(片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂等)或液体(溶液剂、混悬剂或乳剂)或者口服、局部给药或肠胃外给药，它们可以包含所述纯化合物或者与任何载体或其它药理学活性化合物相结合。当进行肠胃外给药时，需要对这些组合物进行灭菌。本专利技术化合物或组合物的给药可以通过任何适当的方法进行，如静脉输注、口服制剂、腹膜内和静脉内给药。我们优选输注时间最多为24小时，更优选2-12小时，最优选2-6小时。特别理想的是短时间输注，短时间输注可以无需在医院过夜治疗。但是，如果需要，则输注时间可以是12-24小时或甚至更长。输注可以以适当的时间间隔如2-4周进行。包含本专利技术化合物的药用组合物可以通过以缓释配方中的脂质体或毫微球包囊方式或通过其它标准传递方式进行给药。所述化合物的正确剂量将根据具体剂型、应用模式和具体部位、患者及所要治疗的肿瘤而变化。还需考虑其它因素如年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄速率、患者症状、药物结合、反应敏感性和疾病严重程度。可以在最大允许剂量范围内连续给药或者定期给药。本专利技术的化合物和组合物可以与其它药物一起使用以提供联合治疗。所述其它药物可形成该同一组合物的一部分，或者作为单独组合物在相同时间或不同时间进行给药。对其它药物的特性没有特别限制，适当的可使用药物包括a)具有抗有丝分裂作用的药物，尤其是那些以细胞骨架成分为靶向的药物，包括微管调节剂如紫杉烷药物(如紫杉酚、紫杉醇、taxotere、docetaxel)、鬼臼素或长春花碱类(长春新碱、长春碱)；b)抗代谢药物如5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他滨、嘌呤类似物(如喷司他丁、甲氨蝶呤)；c)烷化剂如氮芥(如环磷酰胺或异环磷酰胺)；d)以DNA为靶向的药物如antracycline药物阿霉素、多柔比星、表阿霉素或表柔比星；e)以拓朴异构酶为靶向的药物如依托泊苷；f)激素或者激素激动剂或拮抗剂如雌激素、抗雌激素(他莫昔芬和相关化合物)和雄激素、氟他胺、亮丙瑞林、戈舍瑞林、cyprotrone或奥曲肽；g)以癌细胞中信号转导为靶向的药物，包括抗体衍生物如herceptin；h)烷基化药物如铂药物(顺铂、卡铂、奥沙利铂、碳铂)或者亚硝脲；i)有可能影响癌转移的药物如基质金属蛋白酶抑制剂；j)基因治疗和反义试剂；k)抗体治疗剂；l)来自海中的其它生物活性化合物，尤其是海鞘素如Et-743或者代代宁如aplidine。本专利技术还延及用于治疗方法中的本专利技术化合物，以及所述化合物在制备用于治疗癌症的组合物中的应用。本专利技术的实施例用丙酮萃取S.Aurantium Kelly-Borges and bergquist(familyAxinellidae)的样品(90g，湿重)，并将该浓缩的萃取液在乙酸乙酯和水之间分配。将EtOAc萃取液(0.65g)经硅胶并随后通过制备TLC和/或HPLC进行分离，得到倍半萜1-12，产量为1.5-12.0mg。通用试验步骤。在JASCO FT/IR 300上测定IR光谱，在UVIDEC610分光光度计上测定UV光谱。在JEOL A500仪器上在500 Mhz(1H)和125Mhz(13C)下，记录NMR谱。用日立M-2500质谱仪获得LREIMS和HREIMS。在JASCO DIP-1000旋光计上获取旋光度。动物材料。1998年5月在冲绳Iriomote岛，使用自携式水中呼吸器在-15m处，用手收集题述海绵动物的样品(90g，湿重)。凭据样品(QM G317008)保存在澳大利亚布里斯班昆士兰博物馆，并且该样品由澳大利亚昆士兰南布里斯班昆士兰博物馆，Natural EnvironmentProgram经Dr.John N.A.Hooper确认。萃取和分离。将海绵样品保持冷冻直至萃取。整体动物用Me2CO(500mL)萃取三次。将合并的萃取液真空浓缩，将残余物在EtAOc和H2O之间分配以得到亲脂性萃取液(0.70g)。通过在硅胶柱上用庚烷、庚烷-CH2Cl2、CH2Cl2、CH2Cl2-EtOAc、EtOAc、EtOAc-MeOH和MeOH逐步洗脱，分离大部分萃取液(0.65g)，得到九个流分。将第一流分(12.7mg)通过制备TLC(SiO2、庚烷-CH2Cl2，10∶1)并随后通过HPLC(RP13，MeOH-H2O，15∶1)进行分离，得到化合物5(2.0mg)和6(1.9mg)。将第二流分(39.8mg)通过HPLC(SiO2、庚烷-CH2Cl2，9∶1)进行分离，得到化合物1(6.1mg)、4(1.6mg)和6(8.0mg)。将第四流分(64.0mg)通过HPLC(SiO2、庚烷-CH2Cl2，3∶1)进行分离，得到11(1.5mg)和12(1.7mg)。将第五流分(88.7mg)通过制备TLC(SiO2、第一次庚烷-EtOAc，9∶1；第二次庚烷-CH2Cl2，3∶2；第三次CH2Cl2)反复进行分离，得到2(1.6mg)、3(1.6mg)、8(9.1mg)和9(5.8mg)。将第六流分(184.5mg)经硅胶柱(庚烷-CH2Cl2-EtOAc)并随后通过制备TLC(庚烷-CH2Cl2，3∶2)进行分离，得到7(12.0mg)和10(4.6mg)。化合物1无色油；25D+4.5°(c0.20，CHCl3)；UV(MeOH)λmax(logε)205(3.6nm；IR(纯的)νmax1655，877cm-1；1H NMR(CDCl3)δ0.84(3H，s，H3-13)，1.16(3H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种选自下式化合物（１）－（４）的化合物：＊＊＊。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：田中淳一，比嘉辰雄，
申请(专利权)人：法马马有限公司，
类型：发明
国别省市：ES[西班牙]