作为HIVgp120抗原的模拟表位的抗独特型单克隆抗体制造技术

描述了新的抗独特型单克隆抗体，其能够与人类抗ｇｐ１２０抗体的独特型特异性地反应，能够抑制ｇｐ１２０抗原和人类抗ｇｐ１２０抗体之间的结合，并且能够在它们被施用于的动物宿主中引发中和抗ｇｐ１２０免疫反应。本发明专利技术的抗独特型单克隆抗体可以根据它们的轻链和重链的可变部分的氨基酸序列来确定。此外，公开了获得抗独特型单克隆抗体组的方法，在产生前述抗独特型单克隆抗体的重组ＤＮＡ过程中可用的表达载体和转化的宿主细胞，以及这些抗体的治疗性、预防性和诊断性用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为HIV gpl20抗原的模拟表位的抗独特型 单克隆抗体本专利技术 一般地涉及免疫学领域，具体地涉及抗独特型单克隆抗体 或其片段，其与人抗体特异性地反应，所述人抗体能够结合人类获得 性免疫缺陷病毒(HIV) gpl20蛋白，并且当施用给动物、包括人类 时能够诱导抗gpl20反应。
技术介绍
长久以来，HIV感染的冲击已经到达了全世界范围。在全世界， 估计有大约4千万感染人口 ，证实的新感染以每年5百万新病例持续 增长(UNAIDS—爿/DS5^WemZct/;^/a^— 2005 )。对感染实行控制枳^的图景:例如，i非洲撒哈拉以南的某些区i(世界上-;行影二最大的区域)，估计超过50%的工作年龄的受试者是血清阳性的，对这个地区无论如何已经毁坏的经济具有明显的影响。但是，在正在经历 着令人印象深刻的经济增长期的地区，例如，印度次大陆和东南亚， 类似的情况也在发生。在这些地区，血清阳性的数量接近i千万，新的病例每年指数性地增长(UNAIDS - ATO5^/7zWe脂'c t/j^/a/e - 2005 ).抗逆转录病毒治疗，当可以使用时，改善了被感染受试者的生存 期望。然而它与一系列的不利因素相联系，所述不利因素在数年内可 能降低它的积极效果。首先，当今可用的治疗不是治愈性的；换句话 说，被治疗的受试者不能完全消灭病毒，而仍然是受感染的，并因而 暴露于发展严重的临床形式感染(明显的AIDS),以及无论如何向 其他人传播感染的风险中。此外，可用的药物受到非常严重的副作用 的拖累。这导致了患者与治疗本身的低相容性。低相容性，与病毒的 高度分子适应性和其他因素一起，有助于完全药物抗性HIV分离4朱的 产生和传播。此外，治疗的高成本使得它在世界的贫困地区大规模地使用完全不可能，如前所述的，这些地区代表了全球水平感染的真正 的爆发性储备地。总体上，以上描述的因素使得在HIV感染控制领域找 可替代的，或至少补充性的治疗策略的必要性具有最高的重要性，有效的疫 苗方法的开发当然地具有优先作用。不幸的是，HIV感染当今仍然是公开的挑战，并且难以由科学共 同体来解决。实际上，基于不能感染、但能够刺激免疫系统的病毒颗 粒施用的传统的疫苗方法，已经被证明对于一种病毒是无效的，所述 病毒利用分子多态性，即，突变能力来逃避免疫反应作为其制胜武器 (McMichael J., ( 2006 ) J謹.Aev. /mm譜/. 24: 227-55 )。在以下的说明书中，在简要地说明HIV刺激的主要免疫学机制之 后，将综合地回顾现今为止各种主要的疫苗策略，特别地关注本专利技术 中的方法涉及的策略，其是本专利申请的主题，即，抗独特型模拟抗 体的获得和施用。4十对HIV的免疫反应HIV感染的天然历史可见感染后前几周内病毒的不受控制的复 制，病毒血水平常常在前21天内超过每毫升血浆107个病毒颗粒的值。 这个第 一 阶段之后是另 一 个特征为病毒血水平突然降低的阶段，是由 于细胞毒性CD8+ T细胞和中和抗体的产生所代表的、特异性反应机 制的活化。这个阶段展现了免疫系统一旦被刺激如何能够至少部分地 控制感染。然而，如前一节所提及的，主要的关注在于某些病毒蛋白 质的超变性，其允许病毒克服所刺激的防御，因而恢复不受控制式的 复制。在HIV感染的情况中，在病毒改变之后免疫系统由此被持续地 唤起运行；然而，感染的天然历史表明，免疫系统在这种追逐中持续 地失败。有效的预防性疫苗的主要目的是自首次接触起为病毒呈现免疫 反应，所述免疫反应能够阻断病毒并因而阻止病毒在机体中不受控制 的增殖。使得目标细胞感染成为可能的HIV表面蛋白(gpl20和gp41), 是免疫反应、特别是体液型免疫反应的主要目标。然而在天然感染的 过程中产生的抗体产生一种保护，其限于刺激这种反应的病毒。换句 话说，正是这些抗体将不能保护产生它们的患者免受将发展的新的病 毒变体，并且(从疫苗角度来看最重要的方面)更加不能保护被其他 HIV变体感染的其他患者。然而，HIV诱导的抗体反应的研究已经证明了 一些抗体克隆的可能的作用，所述抗体克隆具有对许多病毒分离林的广泛中和活性(Pantophlet R. and Burton D.R., ( 2006)Aev. /附附wwo/. 24: 739-769 )。并且，仅仅少数患者能够产生具有类似特征的抗体，这将 容许它们控制感染长得多的时间，减慢朝向明显AIDS的发展(BraibantM.等，(2006 ) j鄉.20: 1923-30 )。这些患者被科学共 同体定义为长期不进展者(LTNP)，并且当然地代表了为了有效疫 苗的开发而被研究的抗HIV免疫反应的实例。根据采集的数据，科学共同体在此几乎普遍地认识到，有效的预 防性或治疗性疫苗将能够刺激足够的抗体反应，类似于在LTNP患者 中描述的。潜在有效的体液反应的主要靶点是，如前所述的，两种表 面糖蛋白(gpl20和gp41),其以三聚体的形式构成了刺突，刺突允 许病毒结合目标细胞并穿透到目标细胞内。然而，特别地，保守的关 键表位，因而对于不同的病毒分离林是共同的，可能在这些蛋白质中 被检测到。实验室和临床实验数据实际证明了，广泛的中和活性反应 实际上是针对这些表位的(BraibantM.等，(2006 X4薦.20: 1923-30 )。 科学共同体一致地认识到，存在具有与病毒第一次接触时类似特征的抗体，将最有可能能够中和感染，来获得甚至是最有效的治疗方案也 未能成功获得的，即，完全的病毒清除(Pantophlet R. and Burton D.R., (2006 )」謹.Aev. /mm画/. 24: 739-769 )。病毒逃避机制在文献中已经深度研究了细胞和体液免疫反应针对HIV病毒发挥的选择压力，然而它对免疫学缺陷的发展以及在临床上的影响还不清楚。自早期感染阶段开始，中和抗体产生的选择压力实际上很容易 在体外和体内观察到。实际上，病毒通过一系列突变来逃避，所述突变使得通常产生的非广泛性中和抗体无效。有时涉及单个氨基酸残基 的这种突变一般涉及表面糖蛋白，特别是所谓的gpl20蛋白V(可变) 区域。因而，容易理解的是，这种关键抗原的序列可变性是自然感染 过程中产生的抗体不能完全阻断病毒的主要原因之一。通过用完整病 毒颗粒或重组gpl20免疫受试者获得保护性反应的所有"经典"尝试失 败的分子原因同样是可以容易理解的(Pantophlet R. and Burton D.R., (2006 ) J國.T ev. /國w"o/. 24: 739-769 )。然而，HIV防卫机制不限于本身已经很有效的超变性的策略。病毒的结构研究实际上已经揭示了 HIV如何利用它自己的超变区i或来 向免疫系统隐藏关键表位，例如CD4结合位点和所谓的gpl20共同受 体结合位点，即，在感染时物理地结合目标细胞受体和共同受体的蛋 白质部分。换句话说，病毒将仅在与目标细胞直接相互作用时暴露这 些关键区域，因而限制了它们对免疫系统的暴露。并且，HIV已经发展了隐藏gpl20最重要的表位的另一种策略 分子的50%实际上被碳水化合物覆盖，这使得蛋白质表面对于免疫系 统实际上"不可见"。在体内，病毒还可以修饰这种糖类包本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗独特型单克隆抗体，其具有以下免疫学性质：　－它能够与人类抗ｇｐ１２０抗体的独特型特异性地反应，　－它能够抑制ｇｐ１２０抗原和人类抗ｇｐ１２０抗体之间的结合，以及　－它能够在它被施用于的动物，包括人类中引发中和抗ｇｐ１２０免疫反应 ，　至少包含轻链的可变部分和重链的可变部分，　特征在于所述轻链的可变部分具有ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所确定的氨基酸序列并且所述重链的可变部分具有ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所确定的氨基酸序列，或者特征在于所述轻链的可变部分具有ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ ：４所确定的氨基酸序列并且所述重链的可变部分具有ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３所确定的氨基酸序列，　或者具有以上定义的免疫学性质的、所述抗独特型单克隆抗体的片段或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：R巴里奥尼，M克莱门蒂，
申请(专利权)人：波莫纳生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：US[]