包含用某种渗透保护剂稳定化的酶的组合物以及将这样的组合物用于个人护理的方法技术

组合物包括稳定化的酶，至少３０％的水，多元醇，其以多元醇与水的比率为１∶２至１∶１００的量存在；低于５％的碱土金属盐，和选自本发明专利技术所述的某组渗透保护剂的渗透保护剂。也包括提供皮肤护理有益效果的方法，所述皮肤护理有益效果包括例如皮肤感觉和／或皮肤外观，优选皮肤增湿、皮肤柔软性和／或皮肤光滑性，所述方法包括将本发明专利技术所述的安全有效量的本发明专利技术的组合物局部地涂敷于需要这种皮肤护理有益效果的皮肤。进一步地讲，包括提供给消费者包含酶的个人护理产品的方法，其中所述酶在货架上是稳定的，并且在货架上和皮肤上都是活性的，优选地，其中所述包含酶的个人护理产品包括本发明专利技术所述的一种新发明专利技术的组合物。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
包含用某种渗透保护剂稳定化的酶的组合物以及将这样的组合物用于个人护理的方法
技术介绍
本专利技术涉及包括用某种渗透保护剂稳定化的酶的个人护理组合物以及这样的组合物在个人护理中的使用，以提供改善的皮肤感觉和外观，尤其是皮肤增湿、皮肤柔软性和皮肤光滑性。哺乳动物，优选人类，但包括马、犬、猫和其它低等动物的皮肤由覆盖和保护角蛋白的几层细胞和形成皮肤结构的骨架的胶原纤维蛋白组成，这些层的最外层通常称之为角质层。通常，包含在这一层中的死细胞脱落，但许多环境因素和用清洁剂的洗涤可以影响这一过程，导致死细胞的堆积，从而产生干燥的皮肤。例如，阴离子表面活性剂和有机溶剂典型地渗透角质层，并通过脱脂(即从角质层中去除类脂)破坏其完整性。这一皮肤表面结构的毁坏可导致粗糙的感觉并最终允许表面活性剂、溶剂或它们携带的试剂与角蛋白相互作用，从而造成刺激。未能保持穿过角质层的适当的水梯度可导致干燥、发痒或薄而易剥落的皮肤。保持这一梯度所需的大部分水分来自身体内部。如果湿度太低，如在寒冷和/或干燥气候下，不足的水分保持在角质层的最外面的部分中以适当塑化组织，并且皮肤开始变干、剥落和/或变得发痒。在个人护理组合物中使用酶来提供皮肤护理有益效果本身是已知的。据信，酶，尤其是蛋白酶，的功能主要是为涂敷这样组合物的皮肤提供剥落作用。据信，酶可去除皮肤表面上受损的(即干燥或薄而易剥落的)皮肤细胞，由此减少与此相关的粗糙感觉，并允许皮肤护理活性物质到达更多的活的皮肤细胞，从而提高它们的活性。由于酶减少了以前对皮肤的损害的影响，因此它们可以赋予皮肤更新鲜、更年轻的外观和感觉。因此，通过将酶，优选蛋白酶，任选地与安全(对消费者而言)和稳定(在货架上)形式的其它皮肤活性剂一起局部地涂敷来改善皮肤状况是令人期望的。通过将它们与酶，优选蛋白酶，组合而得到改善的皮肤活性剂的性能也是令人期望的。然而，存在着与将酶包括在个人护理组合物中相关的问题。酶的总体稳定性包括它的热稳定性、pH稳定性、氧化稳定性和构象稳定性。在产品中稳定酶的一个问题是酶，尤其是蛋白酶，在水中是不稳定的，并迅速经历自动消化作用。对于这一问题已提出了几种解决方案。一种途径是通过加入酶抑制剂(如阻碍酶的活性位点的直接抑制剂或产生驱动自动消化反应的总平衡返回左边(远离自动消化作用)的反应产物的间接抑制剂)来降低自动消化反应发生的速率而抑制酶的活性。典型地，速率降低的越多，酶在货架上保持稳定的时间就越久。但为了获得个人护理产品的商业上可行的储藏期限，速率必须被减缓至接近停止，致使酶无活性。其它途径是在包括在个人护理产品中之前胶囊包封酶(参见GB 1,255,284和JP 10-251,122)；或将组合物缓冲，以使酶在使用之前保持无活性(参见WO 97/47,238)；或配制无水组合物；或通过加入高含量的多元醇来显著地降低组合物中的水活性(参见JP 1,283,213和JP 3,294,211和EP 755,673和EP 759,293)；或配制各种乳液(参见EP 779,071)；或分别包装包含稳定化的酶的第一隔室和包含活化剂的第二隔室，并在使用过程中混合(参见WO97/27,841)。然而，使这些提出的解决方案复杂化的情况是一旦涂敷于消费者的皮肤，所述酶必须完全活化以提供皮肤护理有益效果。这需要单独的再活化步骤，如用水稀释包含酶的产品，其中所述酶在储藏过程中已被抑制剂失活，以在皮肤上再活化酶或破坏乳液或胶囊，或在皮肤上将两种前体产品混合成一种等等。也已提议使用依克多因(ectoin)或其衍生物来抑制酶的活性(参见DE 198 34 816和WO 01/54,446)，然而，使用这样的渗透保护剂可能不提供在个人护理产品中的期望的充分改善的稳定性和活性有益效果。尽管已知使用一些渗透保护剂作为润湿剂、脱粘剂、渗透增强子、脱落增强子，使用某种渗透保护剂与多元醇组合来稳定含水个人护理产品中的酶以前并不为人所知。申请者已惊奇地发现，如本专利技术所述，某种渗透保护剂当与多元醇组合使用时可提供给包含酶的组合物，其中所述酶在货架上是稳定的，并且在货架上和皮肤上都是活性的。不受理论的约束，据信，自动消化是两步的过程，其中自然酶与开放的或伸展的构象处于平衡，所述构象然后经历自动消化。某种渗透保护剂可延缓初始的平衡，从而减少可获得的用于自动消化的底物，反过来使体系稳定。本专利技术的组合物将不需要进一步的再活化步骤，并且它们可以被储存的时期在商业上是可行的。这样的组合物可显著地改进酶的稳定性同时保持它们的功效。进一步讲，这样的组合物对改善皮肤状况和改善皮肤活性剂的性能可能是有用的。专利技术概述本专利技术涉及组合物，所述组合物包括(a)稳定化的酶，(b)至少30％的水，(c)多元醇，其以多元醇与水的比率是1∶2至1∶100的量存在；(d)少于5％的碱土金属盐，和(e)渗透保护剂，其选自本专利技术定义的某组渗透保护剂。本专利技术也涉及提供皮肤护理有益效果，如皮肤感觉和/或皮肤外观，优选皮肤增湿、皮肤柔软性和/或皮肤光滑性的方法，所述方法包括将安全有效量的本专利技术所述的本专利技术的组合物局部地涂敷于需要这种皮肤护理有益效果的皮肤上。本专利技术还涉及给消费者提供包含酶的个人护理产品的方法，其中所述酶在货架上是稳定的，并且在货架上和皮肤上都是活性的，优选地，其中包含酶的个人护理产品包括一种本专利技术所述的专利技术的组合物。专利技术详述当局部地涂敷于哺乳动物的皮肤时，所述组合物可改善皮肤感觉和外观，尤其是皮肤增湿、皮肤柔软性和皮肤光滑性。本专利技术的组合物可包括、由或基本上由本专利技术所述的专利技术的基本要素和限定条件，以及任何附加的或任选的成分、组分或本专利技术所述的限定条件组成。本专利技术的组合物的组分，包括可任选地加入的那些，以及制备的方法，和其使用方法，和几个示例性实施方案在下文详细描述。除非另外指明，量代表成分的实际量的大约重量百分比，并且不包括溶剂、填充剂或在可商购获得的产品中可与成分组合的其它物质，并且所述量包括预期使用形式的组合物。除非另外指明，所有包括份数、百分比和比例的量被理解为被词语“约”所修饰，并且量不打算指示重要数字。除非另外指明，冠词“一个”和“所述”是指“一个或多个”。本专利技术引用的所有出版物在此全文引入本文以供参考。如本专利技术使用的术语“安全有效量”是指以在合理的医学判断范围内的合理的效险比，活性成分的量足够高以改变欲处理的状况或递送期望的皮肤护理有益效果，但又足够低以避免严重的副作用。活性成分的安全有效量将根据具体的活性物质、活性物质穿透皮肤或毛发的能力、年龄、健康状况和使用者的皮肤或毛发的状况和其它类似因素而改变。本专利技术中使用的“可药用的”是指该术语描述的药物、药物治疗或惰性成分适用于人类和较低等动物并且没有不适当的毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等。本专利技术中使用的“化妆用可接受的”是指该术语描述的成分适用于与人类和较低等动物的皮肤或毛发接触而没有不适当的毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等。本专利技术中使用的术语“酶”是指本身或通过聚合物部分的结合而化学改性的野生型或变体的酶。本专利技术中使用的术语“蛋白酶”是指任何底物是蛋白质的酶。本专利技术中使用的术语“野生型”是指未突变的宿主产生的酶。本专利技术中使用的术语“变体”是指由于产生该酶的宿主的基因突变本文档来自技高网...

【技术保护点】
组合物，所述组合物包括（ａ）稳定化的酶，（ｂ）按所述组合物的重量计，至少３０％的水，其特征在于，其包括：（ｃ）多元醇，其以多元醇与水的比率为１∶２至１∶１００的量存在；（ｄ）按所述组合物的重量计，低于５％的碱土金属盐，和（ｅ）选自下列的渗透保护剂：（ｉ）符合式（Ⅰ）的渗透保护剂：Ｒ↓［２］－＊－［ＣＨ↓［２］］↓［ｎ］－ＣＯＯ↑［－］其中Ｒ↓［１］、Ｒ↓［２］和Ｒ↓［３］独立地选自－Ｈ、－ＣＨ↓［３］、－ＣＨ↓［２］ＣＨ↓［３］，和［－ＣＨ↓［ ２］ＣＨ（ＯＨ）Ｒ↓［４］，其中Ｒ↓［４］选自－Ｈ，和Ｃ１至Ｃ４烷烃］；并且其中ｎ＝１至３的整数，优选１；（ｉｉ）符合式（Ⅰ）的渗透保护剂，其中Ｒ↓［１］、Ｒ↓［２］和Ｒ↓［３］中任何两个独立地选自－Ｈ和－ＣＨ↓［３］，和Ｒ↓［１］ 、Ｒ↓［２］和Ｒ↓［３］中的第三个结构部分选自－Ｈ和－（ＣＨ↓［２］）ｍＣＨ↓［３］其中ｍ为４或５；并且其中ｎ＝１至３的整数，优选１；（ｉｉｉ）符合式（Ⅱ）的渗透保护剂：Ｒ↓［２］－＊－［ＣＨ↓［２］］↓［ｎ］－ＣＨ↓［２］ ＯＲ↓［５］其中Ｒ↓［１］、Ｒ↓［２］、Ｒ↓［３］、Ｒ↓［４］和ｎ如上述部分（ｉ）中所定义；和其中Ｒ↓［５］选自ＰＯ↓［３］和ＳＯ↓［３］；（ｉｖ）渗透保护剂，其选自丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、脯氨酸、肉毒碱、牛磺酸和三甲胺氧化 物；（ｖ）渗透保护剂，其选自麦黄酮、二甲基脯氨酸、γ－丁内铵盐、β－丙氨酸甜菜碱、缬氨酸甜菜碱、赖氨酸甜菜碱、鸟氨酸甜菜碱、丙氨酸甜菜碱、谷氨酸甜菜碱和苯丙氨酸甜菜碱；和（ｉｖ）它们的混合物。...

【技术特征摘要】
US 2001-11-13 60/338,0421.组合物，所述组合物包括(a)稳定化的酶，(b)按所述组合物的重量计，至少30％的水，其特征在于，其包括(c)多元醇，其以多元醇与水的比率为1∶2至1∶100的量存在；(d)按所述组合物的重量计，低于5％的碱土金属盐，和(e)选自下列的渗透保护剂(i)符合式(I)的渗透保护剂 其中R1、R2和R3独立地选自-H、-CH3、-CH2CH3，和[-CH2CH(OH)R4，其中R4选自-H，和C1至C4烷烃]；并且其中n＝1至3的整数，优选1；(ii)符合式(I)的渗透保护剂，其中R1、R2和R3中任何两个独立地选自-H和-CH3，和R1、R2和R3中的第三个结构部分选自-H和-(CH2)mCH3其中m为4或5；并且其中n＝1至3的整数，优选1；(iii)符合式(II)的渗透保护剂 其中R1、R2、R3、R4和n如上述部分(i)中所定义；和其中R5选自PO3和SO3；(iv)渗透保护剂，其选自丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、脯氨酸、肉毒碱、牛磺酸和三甲胺氧化物；(v)渗透保护剂，其选自麦黄酮、二甲基脯氨酸、γ-丁内铵盐、β-丙氨酸甜菜碱、缬氨酸甜菜碱、赖氨酸甜菜碱、鸟氨酸甜菜碱、丙氨酸甜菜碱、谷氨酸甜菜碱和苯丙氨酸甜菜碱；和(iv)它们的混合物。2.如权利要求1所述的组合物，其中(i)(i)中所述渗透保护剂选自符合式(I)的那些渗透保护剂，其中(R1、R2和R3都为-CH3，并且n为1)或(R1、R2和R3都为-CH3，并且n为3)或(R1和R2为-CH3，R3为-H，并且n为1)或(R1为-CH3，R2和R3为-H，并且n为1)；或(R1和R2为-CH2(OH)R4，R4为-H，R3为-H，并且n为1)；(ii)(ii)中所述渗透保护剂选自符合式(I)的那些渗透保护剂，其中(R1和R2为-CH3，R3为-(CH2)mCH3其中m为5，并且n为1)；(iii)(iii)中所述渗透保护剂为符合式(II)的渗透保护剂，其中(R1、R2和R3为-CH3；n为1；和R5为PO3)；(iv)(iv)中所述渗透保护剂选自丝氨酸、脯氨酸和肉毒碱；(v)(v)中所述渗透保护剂选自麦黄酮和γ-丁内铵盐。3.如前述任一项权利要求所述的组合物，其包括(a)按所述组合物的重量计，0.0001％至1％，优选0.0005％至0.5％，更优选0.001％至0.1％的所述酶；(b)按所述组合物的重量计，至少40％，优选至少50％的水；(c)按所述组合物的重量计，0.1％至50％，优选0.5％至40％，更优选1％至30％，更优选1％至15％的所述多元醇；(d)按所述组合物的重量计，低于0.1％，优选低于0.05％，更优选低于0.02％，更优选低于0.015％的所述碱土金属盐；和(e)按所述组合物的重量计1％至50％，优选3％至25％，更优选5％至15％，更优选7％至12％，更优选7％至10％的所述渗透保护剂。4.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中多元醇与水的比率为1∶3至1∶50，优选1∶5至1∶25，更优选1∶6至1∶10。5.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述酶为蛋白酶，优选地选自枯草杆菌蛋白酶、与枯草杆菌蛋白酶具有至少70％氨基酸序列同源性的酶，及这两种的变体；更优选枯草杆菌蛋白酶或其变体，其选自枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草菌溶素、枯草杆菌蛋白酶DY、枯草杆菌蛋白酶147、枯草杆菌蛋白酶168、枯草杆菌蛋白酶309、和淀粉糖酵母枯草杆菌蛋白酶；更优选枯草杆菌蛋白酶BPN’及其变体。6.如权利要求5所述的组合物，其中所述酶为在一个或多个下列位置具有氨基酸取代的变体9、31、76、77、79、122、156、169、188、206、212、217、218、222、254和271。7.如权利要求5或6所述的组合物，其中所述酶为具有一个或多个下列氨基酸取代的枯草杆菌蛋白酶变体S9A、I31L、N76D、N77D、I79A、I79E、I122A、E156S、G169A、S188P、Q206D、Q206L、Q206V、Q206C、N212G、Y217K、Y217L、N218S、M222A、M222Q、T254A和Y271K；优选具有选自下列的取代组合(a)N76D-I122A-Y217L，(b)I79A-I122A-Y217L，(c)N76D-I79A-I122A-Y217L。8.如权利要求7所述的组合物，其中所述酶为具有氨基酸取代组合N76D-I122A-Y217L的枯草杆菌蛋白酶变体。9.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述多元醇具有低于35,000，优选低于2,000的数均分子量。10.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述多元醇选自甘油、聚乙二醇(优选具有平均分子量为200至400的那些)、己三醇、1，4-丁二醇、丁氧基三醇、赤藓醇、木糖醇、以及它们的混合物；优选地选自木糖醇、甘油和具有平均分子量为200至400的聚乙二醇。11.如前述任一项权利要求所述的组合物，所述组合物还包括易溶的稳定剂，优选的量按所述组合物的重量计为0.1％至5％，更优选为0.2％至2％...

【专利技术属性】
技术研发人员：RP艾略特，BGR麦克凯，
申请(专利权)人：宝洁公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]