孢子纲物种体外培养的方法及其用途技术

本发明专利技术涉及通过导致产生裂殖子连续培养的体外组织培养而使原生动物的卵囊脱囊和生长的方法。本发明专利技术也提供一种经济又可靠的，用于疫苗生产、测定和研究的培养的艾美球虫属物种。还提供已用所给出的艾美球虫属物种接种的驯养的鸟类。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及孢子纲(Sporozoea)及其种属的成孢子囊原生动物连续培养的培养体系和方法。本专利技术还涉及用本专利技术的培养体系和方法制成的裂殖子和卵囊及相关孢子纲生命阶段细胞，供疫苗、检定和其他用途之用。
技术介绍
孢子纲原生动物包括成孢子囊原生动物，其中许多是导致全世界人和动物疾病的病源。其中有着特殊的商业联系的是由孢子纲的球虫亚纲(Coccidia)、真球虫目(Eucoccidiida)和艾美球虫亚目(Eimeriina)引起的疾病，以及由成孢子囊原生动物的囊等孢虫属(Cystoisospora)、艾美球虫属物种(Eimeria)、等孢子球虫属(Isospora)、新孢子虫属(Neospora)、肉孢子虫属(Sarcocystis)、弓浆虫属(Toxoplasma)、泰泽属(Tyzzeria)和温扬球虫属(Wenyonella)引起的疾病。特别是，球虫病是由球虫亚纲、艾美球虫属物种原生动物寄生虫引起包括家畜如家禽在内的动物所患的一种伤寒疾病。这些专性细胞内原生动物寄生虫主要在肠上皮复制。此类寄生虫具有单宿主的生活周期并展现出高度的宿主性和组织特异性。总的说来，由于球虫病和预防药物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在无性发育阶段连续培养专性细胞内孢子纲原生动物的方法，包括：（ａ）提供包含适合孢子纲物种生长的无限增殖比哺乳动物宿主细胞的细胞培养体系；其中专性细胞内原生动物可以感染鸟类；和（ｂ）在有效感染宿主细胞的条件下将宿主细胞与感染阶段的孢子纲物种接触，从而导致宿主细胞内裂殖子的生长。

【技术特征摘要】
US 2002-5-21 60/382,4281.一种在无性发育阶段连续培养专性细胞内孢子纲原生动物的方法，包括(a)提供包含适合孢子纲物种生长的无限增殖比哺乳动物宿主细胞的细胞培养体系；其中专性细胞内原生动物可以感染鸟类；和(b)在有效感染宿主细胞的条件下将宿主细胞与感染阶段的孢子纲物种接触，从而导致宿主细胞内裂殖子的生长。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于细胞培养体系包括适于维持宿主细胞和孢子纲物种生物体的生长培养基。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于生长培养基包括还原剂。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于该还原剂以有效维持无限培养物中的孢子纲物种生物体处于无性生殖生命周期阶段的浓度存在。5.如权利要求3所述的方法，其特征在于该还原剂选自β-巯基乙醇、巯基乙胺、2，3-二巯基琥珀酸、青霉胺、β-内酰胺、N-乙酰半胱氨酸、抗坏血酸、谷光甘肽及其组合。6.权利要求5所述的方法，其特征在于该还原剂是浓度范围在约0.01～约0.5mM的β-巯基乙醇。7.权利要求1所述的方法，其特征在于该宿主细胞是源自哺乳动物网状内皮细胞的保持吞噬细胞活性的无限增殖比细胞。8.权利要求7所述的方法，其特征在于该网状内皮细胞是单核细胞。9.权利要求1所述的方法，其特征在于该孢子纲原生动物是属于选自艾美球虫属、等孢子球虫属、囊等孢虫属、隐孢子虫属及其组合的属的物种。10.权利要求9所述的方法，其特征在于该原生动物是艾美球虫属物种。11.权利要求10所述的方法，其特征在于该原生动物选自柔嫩艾美球虫、堆型艾美球虫、巨型艾美球虫、毒害艾美球虫、缓艾美球虫、早熟艾美球虫、和布氏艾美球虫、火鸡和缓艾美球虫、腺艾美球虫、火鸡孔雀艾美球虫、分散艾美球虫、火鸡艾美球虫、无害艾美球虫、近圆艾美球虫及其组合。12.权利要求11所述的方法，其特征在于该原生动物是堆型艾美球虫或柔嫩艾美球虫。13.通过权利要求1所述方法生产的活的孢子纲原生动物。14.权利要求13所述的原生动物，其中所述原生动物是属于选自艾美球虫属、肉孢子虫属、弓形体属、隐孢子虫属、等孢子球虫属、哈蒙德虫属、弗伦克虫属和贝诺孢子虫属的属的物种。15.一种包括权利要求13所述的原生动物的抗原生动物疫苗组合物。16.一种引起抗原生动物保护性免疫的鸟类接种方法，包括把由权利要求1所述方法生产的活生物体给药到需要它的鸟类，其中活生物体的数量能有效引起鸟类的保护性免疫。17.权利要求16所述的方法，其特征在于所述鸟类是驯养的鸟类，且该原生动物是球虫属。18.权利要求16所述的方法，其特征在于该鸟类选自...

【专利技术属性】
技术研发人员：SP埃利森，
申请(专利权)人：先灵普劳有限公司，病原体研究公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]