【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种提高茎瘤芥小孢子胚胎发生及植株再生效率的方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)材料的选择:将茎瘤芥花蕾拨开,花药浸泡于1%醋酸洋红后捣碎染色,显微镜下进行观察;从中选择初始花朵出现为始花期第一天的开花一周内的2?3mm花蕾,所述花蕾单核靠边期和双核初期比例达到80%?90%;(2)灭菌:采用0.1%的升汞灭菌12min,无菌水洗三次,每次3min;(3)抽提花粉:把消毒后花蕾放置离心管中加B5?13液体培养基进行研磨并用400目网纱过滤,收集游离小孢子进行两次离心;(4)热激处理:将沉淀的花粉转移至含有不同浓度秋水仙素溶液的NLN?16液体培养基中,32℃条件下暗培养48?52h;(5)诱导成胚:将热激处理后小孢子进行离心,加NLN?13液体培养基按照1.5个花蕾/皿进行分装到培养皿中,封口,于25℃暗置培养,直至出胚;(6)诱导成苗:胚状体形成后,将其移至B5?3固体培养基中,于16h光照/8h黑暗条件温室下生长,间隔15?20天转接一次直至愈伤上形成植株,将所述植株切下转移至B5固体培养基中进行培养。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:杨明贵,王毓洪,任锡亮,孟秋峰,
申请(专利权)人:宁波市农业科学研究院,
类型:发明
国别省市:
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