本发明专利技术公开了一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，它是一种向发酵培养基中添加高山被孢霉菌渣，提高维吉尼亚霉素产量的方法。将维吉尼亚链霉菌（streptomyces virginiae）于孢子培养基中培养后，刮取一定量接入种子培养基培养一定时间后，再按一定接种量接入发酵培养基中进行发酵培养。在发酵培养中添加高山被孢霉，经实验证明，此方法可明显提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量，操作简单。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的是一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，特别是一种添加高山被孢霉提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素的方法。
技术介绍
维吉尼亚霉素（virginiamycin，简称VGM）是维吉尼亚链霉菌发酵产生的一类链阳性抗生素，由两个完全无关的分子M因子（约占70%）和S因子（约占30%）组成。M因子是一种巨环内酯，分子式为C28H35N3O7，对金黄色球菌特别有效，S因子是一种环状多肽，分子式为C43H49N7O10，对藤黄八叠球菌特别有效。两者均能在核糖体水平上抑制蛋白质的合成，且二者相互协同，对大部分革兰氏阳性菌有效；同时可以减少耐药菌的产生。经研究，维吉尼亚霉素在动物肠道内不易被吸收，体内组织残留量小，毒性小，有较好的生物降解性。用于预防猪下痢和鸡坏死性肠炎，选择性杀灭有害及多余的肠道细菌，减少乳酸、氨气、挥发性脂肪酸及有害物质的产生，减缓肠道蠕动从而增加饲料在肠道内的停留时间，进而增加养分的吸收。另外，维吉尼亚霉素还可使动物肠壁变薄，增加肠壁渗透性，促进氨基酸及磷的吸收，提高饲料利用率，是业内公认的具有良好应用前景的安全无毒畜禽专用抗生素。目前，国内外提高维吉尼亚霉素产量的方法不一，主要是通过优化培养基来提高产量。例如“用于生物合成维吉尼亚霉素 M 的培养基”（CN 101538539 B）通过对碳氮源等培养基成分进行优化，提高维吉尼亚霉素产量。然而采用添加另外一种真菌来提高维吉霉素产量的报道并未发现；尤其未发现使用高山被孢霉来提高维吉尼亚霉素产量的报道，此方法可明显提高维吉尼亚霉素产量，且操作简单。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法。本专利技术采用的技术方案如下：一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，其特征在于：在维吉尼亚链霉菌发酵培养一定时间后，向发酵液中添加适量的高山被孢霉，然后发酵至结束。所述的一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）高山被孢霉培养后，将含有高山被孢霉的发酵液，抽滤，干燥至恒重，研磨成粉末，筛子过筛，得到高山被孢霉菌粉；（2）维吉尼亚链霉菌摇瓶种子培养无菌条件下，取适量维吉尼亚链霉菌孢子涂布于斜面培养基上，温度25~30℃，湿度30%~70%，静置培养4~10天，然后刮取适量新鲜且成熟的孢子接入摇瓶种子培养基中，温度25~30℃，湿度30%~70%，摇床转速为180~250 rpm，培养0.5~2天；（3）维吉尼亚链霉菌摇瓶发酵培养将维吉尼亚链霉菌种子液按1.5%~15%（v/v）的接种量接入摇瓶发酵培养基中，温度25~30℃，湿度30%~70%，摇床转速为180~250 rpm，培养3~7天；在发酵0~7天内一次性添加0~2%高山被孢霉菌粉，发酵结束后，利用高效液相色谱仪检测维吉尼亚霉素产量。所述的一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，其特征在于，所述的高山被孢霉培养过程为：将高山被孢霉孢子或菌丝涂布于PDA培养基中，于26~30℃静置培养5~8d，刮取适量孢子接入摇瓶种子培养基中，置于26~30℃，湿度30%~60%，摇床转速为180~250 rpm的条件下培养1~2天，将高山被孢霉种子液按5~15%（v/v）的接种量接入摇瓶发酵培养基中，置于26~30℃，湿度30%~60%，摇床转速为180~250 rpm的条件下培养6~15天，将所得高山被孢霉菌球及培养液经80目筛子筛滤，并用蒸馏水清洗三次，用真空泵抽滤，得湿的高山被孢霉菌体，置于恒温干燥箱中干燥至恒重后，研磨成粉末状，再利用筛子过筛，得高山被孢霉菌粉；所述PDA培养基为葡萄糖10~25g/L，马铃薯100-200g/L， K2HPO4 0.2-0.8 g/L，MgSO40.1~1 g/L，琼脂粉 10-20g/L，pH 6.8~7.5；所述种子培养基为葡萄糖20-100g/L，酵母粉10-30g/L，pH 6.8~7.5；所述发酵培养基为葡萄糖20-100g/L，酵母粉10-30g/L，pH 6.8~7.5。本专利技术的优点是：1、本专利技术方法生产所得的维吉尼亚霉素产量相对没有添加高山被孢霉的维吉尼亚霉素产量有明显提高，最多提高了50%。2、本专利技术的工艺操作简单，容易实现。附图说明图1为在发酵培养基A中高山被孢霉的添加量对维吉霉素产量的影响；图2为在发酵培养基B中高山被孢霉的添加量对维吉霉素产量的影响；图3为在发酵培养基B中，发酵不同时间添加1%高山被孢霉对维吉尼亚霉素产量的影响。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术做详细说明。实施例11）高山被孢霉菌粉制备将高山被孢霉孢子或菌丝涂布于PDA培养基中，于26~30℃静置培养5~8d，刮取适量孢子接入摇瓶种子培养基中，置于26~30℃，湿度30%~60%，摇床转速为180~250 rpm的条件下培养1~2天。将高山被孢霉种子液按5~15%的接种量接入摇瓶发酵培养基中，置于26~30℃，湿度30%~60%，摇床转速为180~250 rpm的条件下培养6~15天，将所得高山被孢霉菌球及培养液经80目筛子筛滤，并用蒸馏水清洗三次，用真空泵抽滤，得湿的高山被孢霉菌体，置于恒温干燥箱中干燥至恒重后，研磨成粉末状，再利用筛子过筛，得高山被孢霉菌粉；其中，PDA培养基为葡萄糖10~25g/L，马铃薯100-200g/L，K2HPO4 0.2-0.8 g/L，MgSO40.1~1 g/L，琼脂粉 10-20g/L，pH 6.8~7.5，种子培养基为葡萄糖20-100g/L，酵母粉10-30g/L，pH 6.8~7.5，发酵培养基为葡萄糖20-100g/L，酵母粉10-30g/L，pH 6.8~7.5；2）维吉尼亚链霉菌摇瓶种子培养：无菌条件下，取适量维吉尼亚链霉菌（Streptomyces virginiae CGMCC0038）孢子涂布于斜面培养基上，温度25~30℃，湿度30%~70%，静置培养4~10天，然后刮取适量新鲜且成熟的孢子接入摇瓶种子培养基中，置于25~30℃，湿度30%~70%，摇床转速为180~250 rpm，培养0.5~2天，其中，斜面培养基为：葡萄糖2~10g/L，酵母膏2~10g/L，麦芽汁5~10g/L，琼脂10~20 g/L，pH6.8~7.5，摇瓶种子培养基为：葡萄糖2~10 g/L，酵母膏2~10 g/L，麦芽汁5~20 g/L，pH6.8~7.5；3）维吉尼亚链霉菌摇瓶发酵培养：无菌条件下，将维吉尼亚链霉菌种子液按1.5%~15%（v/v）的接种量分别接入含有发酵培养基的摇瓶中，在温度25~30℃，湿度30%~70%，摇床转速为180~250 rpm，培养3~7天，发酵1天时，分别向装有发酵培养基的摇瓶中分别添加0%、0.05%、0.1%、0.5%、1%的高山被孢霉菌粉，继续发酵至结束。（所有实验均重复3次，实验结果为3次平均值）。其中，发酵培养基为：葡萄糖2~10 g/L、蔗糖10~30 g/L、乳糖10~30 g/L、麦芽糖10~30 g/L、蛋白胨2~5 g/L、酵母膏2~10 g/L、NaNO32~5 g/L、K2H本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，其特征在于：在维吉尼亚链霉菌发酵培养一定时间后，向发酵液中添加适量的高山被孢霉，然后发酵至结束。
【技术特征摘要】
1.一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，其特征在于：在维吉尼亚链霉菌发酵培养一定时间后，向发酵液中添加适量的高山被孢霉，然后发酵至结束。2.根据权利要求1所述的一种提高维吉尼亚链霉菌发酵生产维吉尼亚霉素产量的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）高山被孢霉培养后，将含有高山被孢霉的发酵液，抽滤，干燥至恒重，研磨成粉末，筛子过筛，得到高山被孢霉菌粉；（2）维吉尼亚链霉菌摇瓶种子培养无菌条件下，取适量维吉尼亚链霉菌孢子涂布于斜面培养基上，温度25~30℃，湿度30%~70%，静置培养4~10天，然后刮取适量新鲜且成熟的孢子接入摇瓶种子培养基中，温度25~30℃，湿度30%~70%，摇床转速为180~250 rpm，培养0.5~2天；（3）维吉尼亚链霉菌摇瓶发酵培养将维吉尼亚链霉菌种子液按1.5%~15%（v/v）的接种量接入摇瓶发酵培养基中，温度25~30℃，湿度30%~70%，摇床转速为180~250 rpm，培养3~7天；在发酵0~7天内一次性添加0~2%高山被孢霉菌粉，发酵结束后，利用高效液相色谱仪检测维吉尼亚霉素产量。3.根据权利要求2所述的一种提高维吉尼亚链霉菌发酵...
【专利技术属性】
技术研发人员：仝倩倩，袁丽霞，陈祥松，孙立洁，姚建铭，朱薇薇，吴金勇，
申请(专利权)人：中国科学院等离子体物理研究所，武汉中科光谷绿色生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34
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