本发明专利技术公开了一种蛹虫草固体菌种培育方法。本发明专利技术中，蛹虫草菌种接种到斜面固体培养基中后，在２３～２５℃下遮光培养３天，将温度降低至２０～２３℃，继续遮光暗激发培养４天，再在自然散光照射下培养２４小时。根据本发明专利技术方法培育的蛹虫草固体菌种，气生菌丝更发达，气生菌丝较普通方法培育的粗大１．５倍以上，且分枝更多，不易断裂；菌苔更结实、肥厚，颜色鲜黄；孢子个体更大，菌种的活性高，对杂菌的抵抗力更强。由经扩增成液体菌种，单位液体培养基中菌丝含量更高，活性高，长期静置不易分层，分布性好，使用方便。液体菌种接种到生产培养基后，菌落生长快，转色所用时间短，能缩短生产周期。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种。
技术介绍
虫草是一种珍稀的中药材，具有很高的药用和滋补功效。野生虫草资源有限，过量开采 会破坏环境。人工培育的虫草，有效成分与野生虫草相近，部分成分甚至超过野生虫草，现 在普遍采用人工培育蛹虫草的方法获取虫草。在蛹虫草的人工培育中，性能优良的菌种是蛹虫草高产和高质量的保证。因此，固体菌 种的培育是蛹虫草人工培育中一个至关重要的环节。现在普遍采用的固体菌种培育方法是 接种完成后，在20 25。C恒温条件下，交替自然光照培养至孢子成熟。这样培育的蛹虫草固 体菌种孢子较小，活性低，对杂菌的抵抗力差，由此蛹虫草固体菌种扩增的液体菌种，单位 液体培养基中菌丝含量，活性一般，长期静置容易发生分层，接种时难以保证接种量的一致 性，液体菌种接种到生产培养基后，菌落生长慢，转色所用时间长。
技术实现思路
为了克服上述问题，本专利技术提供一种具有高活性和抗性的。 本专利技术所采取的技术方案是，其培育过程包括以下步骤1) 制备普通斜面固体培养基；2) 接种蛹虫草菌种；3) 暗激发培养将接种好的菌种在23 25。C下遮光培养3天，将温度降低至20 23。C，继续遮光培养4天；4) 光激发将经过暗激发培养的菌种在自然散光下培养24小时，孢子成熟，完成蛹虫草固体菌种的培育。本专利技术的有益效果是与普通方法培育的蛹虫草固体菌种相比，经过暗激发培养的蛹虫 草固体菌种气生菌丝更发达，菌苔更结实、肥厚，颜色鲜黄；孢子个体更大；气生菌丝粗大 1.5倍以上，且分枝更多，不易断裂；菌种的活性高，对杂菌的抵抗力更强。使用经过暗激发培养的蛹虫草固体菌种扩增的液体菌种，单位液体培养基中菌丝含量更高，活性高，长期静置不易分层，静置120 140h没有出现分层现象，分布性好。使用该液体菌种接种量均匀，方便了液体菌种的使用。液体菌种接种到生产培养基后，菌落生长快，转色所用时间短， 能縮短生产周期。 附图说明图l是实施例l和对照例l的气生菌丝对比图。 具体实施例方式下面结合实例，进一步说明本专利技术。 实施例l选用的蛹虫草菌种为Cm001，购自中国农业大学生物学院食用菌研究室，培育过程包括以 下步骤1) 制备普通斜面固体培养基，培养基的配比为水7500g马铃薯1400g葡萄糖180g磷酸氢二钾15g硫酸镁5g蛋白胨20g 蚕蛹粉18g琼脂粉75g，将配制好的培养基分装好，在121'C，压力1.05kg/cm2条件下灭菌40分钟，冷却至常温，备用；2) 接种无菌条件下，在冷却至常温的培养基中接入Cm001菌种；3) 暗激发培养将接种好的菌种在23。C下遮光培养3天，将温度降低至2(TC，继续遮光培养4天；4) 光激发将经过暗激发培养的菌种在自然散光下培养24小时，孢子成熟，完成蛹虫草固体菌种的培育。经检验，该蛹虫草固体菌种气生菌丝的平均直径为12 13ym，孢子的平均大小为6. 5 7. 5y m。将培养完成的蛹虫草固体菌种接种到液体培养基中，每160ml液体培养基中加入约2. 5g 固体菌种(鲜重)，扩增成液体菌种。液体培养基的配比为水9000ml马铃薯1700g葡萄糖200g磷酸氢二钾20g硫酸镁7g蛋白胨32g，避 光条件下，23-25°C， 150转/min摇床培养48h，液体菌种培养完成。经检验，液体菌种培养完成后，每100ml液体菌种中的干物质量为12.8g，静置122h后出 现分层。将培养完成的液体菌种接种到生产培养基中，52h后出现直径3mm的菌落，给与光照12h 后，培养基转色。 对照例l斜面固体培养基的制备和接种的菌种同实施例l，接种后在25"C下，交替自然光照培养7天，完成蛹虫草固体菌种的培育。经检验，该蛹虫草固体菌种菌丝的平均直径为7. 5 8 y m，孢子的平均大小为5. 5 6 ym。将培养完成的蛹虫草固体菌种按实施例l中所述的条件扩增成液体菌种，经检验每 100ml培养液中和干物质量为8. 7g，静置84h后分层。将培养完成的液体菌种接种到生产培养基中，77h后出现直径2.5mm的菌落，给与光照 15h后，培养基转色。实施例2选用的蛹虫草菌种为北虫草C-2，购自山东省鱼台县食用菌研究所，培育过程包括以下步骤1) 制备普通斜面固体培养基，培养基的配比为水9000g马铃薯1700g葡萄糖200g磷酸氢二钾20g硫酸镁7g蛋白胨26g 蚕蛹粉20g琼脂粉90g;将配制好的培养基分装好，在121。C，压力1. 05kg/ci/条件下灭菌40分钟，冷却至常温，备用；2) 接种无菌条件下，在冷却至常温的培养基中接入北虫草C-2菌；3) 暗激发培养将接种好的菌种在24'C下遮光培养3天，将温度降低至2rC，继续遮光培养4天；4) 光激发将经过暗激发培养的菌种在自然散光下培养24小时，孢子成熟，完成蛹虫草固体菌种的培育。经检验，该蛹虫草固体菌种气生菌丝的平均直径为11.5 12um，孢子的平均大小为 6. 0 6. 5 y m。将培养完成的蛹虫草固体菌种接种到液体培养基中，每160ml液体培养基中加入约2. 5g 固体菌种(鲜重)，扩增成液体菌种。液体培养基的配比为水7500gml马铃薯1400g葡 萄糖180g磷酸氢二钾15g硫酸镁5g蛋白胨28g，避光条件下，23-25°C， 150转/min 摇床培养48h，液体菌种培养完成。经检验，液体菌种培养完成后，每100ml液体菌种中的干物质量为12.3g，静置126h后出 现分层。将培养完成的液体菌种接种到生产培养基中，58h后出现直径2.5mm的菌落，给与光照 llh后，培养基转色。 对照例2斜面固体培养基的制备和接种的菌种同实施例l，接种后在25"C下，交替自然光照培养7 天，完成蛹虫草固体菌种的培育。经检验，该蛹虫草固体菌种气生菌丝的平均直径为7 7.5ym，孢子的平均大小为4. 5 5 y m。将培养完成的蛹虫草固体菌种按实施例l中所述的条件扩增成液体菌种，经检验每 100ml培养液中和干物质量为8. 8g，静置92h后分层。将培养完成的液体菌种接种到生产培养基中，74h后出现直径2.5mm的菌落，给与光照 16h后，培养基转色。实施例3选用的菌种为C311，购自华南农业大学食品学院石木标教授，培育过程包括以下步骤1) 制备普通斜面固体培养基，培养基的配比为水8500g马铃薯1650g葡萄糖195g磷酸氢二钾19g硫酸镁6. 5g蛋白胨25g 蚕蛹粉21g琼脂粉87. 5g;2) 配制好的培养基分装好，在121。C，压力1.05kg/ci/条件下灭菌40分钟，冷却至常温 ，备用；3) 接种无菌条件下，以常规方法在冷却至常温的培养基中接入C311菌；4) 暗激发培养将接种好的菌种在25'C下遮光培养3天，将温度降低至23'C，继续遮光培养4天；5) 光激发将经过暗激发培养的菌种在自然散光下培养24小时，孢子成熟，完成蛹虫草固体菌种的培育。经检验，该蛹虫草固体菌种气生菌丝的平均直径为ll 11.5ym，孢子的平均大小为6 6. 5 y m。将培养完成的蛹虫草固体菌种接种到液体培养基中，每160ml液体培养基中加入约2. 5g 固体菌种(鲜重)，扩增成液体菌种。液体培养基的配比为水8500g马铃薯1650g葡萄 糖195g磷酸氢二钾19g硫酸镁6. 5g蛋白胨31g，避光本文档来自技高网...
【技术保护点】
蛹虫草固体菌种培育方法，其特征在于：其培育过程包括以下步骤： １）制备普通斜面固体培养基； ２）接种蛹虫草菌种； ３）暗激发培养：将接种好的菌种在２３～２５℃下遮光培养３天，将温度降低至２０～２３℃，继续遮光培养４天； ４）光激发：将经过暗激发培养的菌种在自然散光下培养２４小时，孢子成熟，完成蛹虫草固体菌种的培育。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吕尚廉，郑杰辉，项坤，
申请(专利权)人：郑杰辉，项坤，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。