本发明专利技术公开了脲酶抑制剂的提取方法。取风干的樟科植物叶粉末，放入干燥索式提取器，一个瓶中加入无水乙醇或二氯甲烷，在水浴上加热，控制无水乙醇或二氯甲烷回流次数，共蒸馏４ｈ，取下提取器，用无水乙醇或二氯甲烷冲洗３次。再把索式提取器水浴加热蒸干，最后溶于无水乙醇中，即可得到脲酶抑制剂樟科植物乙醇提取物或二氯甲烷提取物。本发明专利技术所用樟科植物的提取工艺操作简单，工业化生产所需设备投资少，所得的樟科植物提取物生产成本低。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于一种脲酶抑制剂的制备方法，属于药物提取领域。
技术介绍
近几年来，随着集约化养猪业的快速发展，猪排泄物引起的环境污染越来越受到人们的关注，不仅因为这些排泄物对地表水和土壤造成的污染.引起病原菌的传播，而且氨的挥发和臭气化合物的排放也带来严重的空气污染。猪粪所排放的氨气主要是由粪便中的微生物脲酶催化尿中尿素产生的。脲酶又名尿素酰胺水解酶(urea amidohydrolase)，其相对分子量为12000 13000，当pH值6. 0 8. 0时活性最高，失活温度为7(TC，广泛的存在于各种细菌、真菌和植物中。它在自然条件下的氮循环中发挥着重要的作用，动物含氮化合物在代谢过程能产生大量尿素，在自然条件下，尿素会缓慢的分解，产生氨气，但在脲酶存在的条件下，尿素的分解速度比一般情况下快1014倍。由于猪粪中超过50%的氮是尿素氮，阻止其中氮损失的一种方法就是尿酶抑制剂的使用。 脲酶抑制剂是指能够直接或间接抑制脲酶活性的一类物质。脲酶抑制剂的种类很多其中主要有无机化合物类，有机化合物类及植物提取物类三大类。 脲酶抑制剂的作用机制主要表现为第一，竞争性抑制，在反应过程中同尿素竞争结合到脲酶上去，降低了尿素与脲酶活性中心的结合几率，从而起到了降低尿素分解的作用；第二，使脲酶变性失活，失去分解尿素的能力，降低有效的脲酶浓度，从而抑制了尿素的分解；第三，调控脲酶分子的表达，通过一定的抑制剂来阻止细菌内合成脲酶分子，使表达脲酶的基因受阻，有效降低脲酶浓度等。目前，常用的脲酶抑制剂主要有磷酸二酰胺、磷酸三酰胺、乙酰氧肟酸、苯醌等，主要运用在人类医学和土壤上，较少用于动物养殖业。尿酶抑制剂普遍存在价格昂贵，作用时间较短、容易被猪粪中的微生物适应而钝化或被微生物分解产生的酶降解而失活等缺点。 而且许多脲酶抑制剂对人体或环境本身就有害，为减少养动物粪便中氨气所造成的环境污染，必须研究高效安全的新型脲酶抑制剂。 已有实验证明，一些植物的提取物能抑制脲酶的活性，减少粪尿中氨的挥发翻，如丝兰提取物，但丝兰属植物在我国并不多见，进口成本较高，因此，应用受到限制。樟科植物是我国亚热带地区的主要经济树种，资源十分丰富。经研究发现，用乙醇提取一种樟科植物后，得到的提取物可以抑制脲酶的活性。 本专利技术的主要目的在于提出一种新型脲酶抑制剂的制备方法，这种抑制剂能有效的抑制动物粪便中脲酶的活性，且工艺操作简单。所选用的樟科植物是一种常绿乔木，中国是主要生产国之一，产量占全世界的70%，生产成本低。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种脲酶抑制剂的制备方法。 本专利技术提供的脲酶抑制剂的制备方法如下 1、樟科植物乙醇提取物的制备 取30g风干的樟科植物叶粉末，放入干燥索式提取器，一个瓶中加入无水乙醇30mL，在9(TC水浴上加热，控制无水乙醇回流次数约6次/h，共蒸馏4h，取下提取器，用无水乙醇冲洗3次。再把索式提取器置于9(TC水浴上加热蒸干，最后溶于无水乙醇中至30mL，即可得到樟科植物乙醇提取物。 2、樟科植物二氯甲烷提取物的制备 取30g风干的樟科植物叶粉末，放入干燥索式提取器，一个瓶中加入二氯甲烷30mL，在45t:水浴上加热，控制二氯甲烷回流次数约6次/h，共蒸馏4h，取下提取器，用二氯甲烷冲洗3次。再把索式提取器置于45t:水浴上加热蒸干，最后溶于无水乙醇中至30mL，即可得到樟科植物二氯甲烷提取物。 本专利技术制备的樟科植物乙醇提取物和二氯甲烷提取物均可以显著的抑制粪样中的脲酶活性。本专利技术所用樟科植物的提取工艺操作简单，工业化生产所需设备投资少，所得的樟科植物提取物生产成本低。并且本专利技术制备的樟科植物提取物直接用于猪粪便有较好的抑制脲酶活性的效果，对环境污染做出一定的贡献。权利要求，其特征在于包括以下步骤取风干的樟科植物叶粉末，放入干燥索式提取器，一个瓶中加入提取剂，在水浴上加热，回流反应蒸馏后，取下提取器，用相应的提取剂溶液冲洗。再把索式提取器水浴加热蒸干，最后溶于特定溶剂中，即可得到脲酶抑制剂樟科植物提取物。2. 根据权利要求1所说的提取剂，其特征在于该提取剂为无水乙醇或二氯甲烷，且樟科植物叶粉末质量提取剂体积=ig : imL。3 . 根据权利要求1所说的水浴加热及水浴蒸干，其特征在于提取剂为乙醇时水浴温度 为9(TC，提取剂为二氯甲烷时水浴温度为45°C。4. 根据权利要求1所说的回流反应，其特征在于回流次数为6次/h，蒸馏时间为4h。5. 根据权利要求1所说的特定溶剂，其特征在于溶剂为无水乙醇，且提取剂体积特定溶剂体积=i:i。全文摘要本专利技术公开了脲酶抑制剂的提取方法。取风干的樟科植物叶粉末，放入干燥索式提取器，一个瓶中加入无水乙醇或二氯甲烷，在水浴上加热，控制无水乙醇或二氯甲烷回流次数，共蒸馏4h，取下提取器，用无水乙醇或二氯甲烷冲洗3次。再把索式提取器水浴加热蒸干，最后溶于无水乙醇中，即可得到脲酶抑制剂樟科植物乙醇提取物或二氯甲烷提取物。本专利技术所用樟科植物的提取工艺操作简单，工业化生产所需设备投资少，所得的樟科植物提取物生产成本低。文档编号C05G3/00GK101759482SQ20081012171公开日2010年6月30日 申请日期2008年10月23日 优先权日2008年10月23日专利技术者严海燕, 吴菁 申请人:湖州来色生物基因工程有限公司;吴菁本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种脲酶抑制剂的提取方法，其特征在于包括以下步骤： 取风干的樟科植物叶粉末，放入干燥索式提取器，一个瓶中加入提取剂，在水浴上加热，回流反应蒸馏后，取下提取器，用相应的提取剂溶液冲洗。再把索式提取器水浴加热蒸干，最后溶于特定溶剂中，即可得到脲酶抑制剂樟科植物提取物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：严海燕，吴菁，
申请(专利权)人：湖州来色生物基因工程有限公司，吴菁，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]
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