一种适用于工业化生产的分离纯化纳豆激酶的方法技术

本发明专利技术公开了一种适用于工业化生产的分离纯化纳豆激酶的方法，涉及治疗血栓病的纳豆激酶的分离提取技术领域，解决了目前纳豆激酶纯化工艺复杂，不适合工业化生产的问题。采用乙醇沉淀粗提、阴阳离子交换树脂层析和ＨＰＤ－４００大孔吸附树脂精制来分离纯化得到纳豆激酶纯品，本发明专利技术采用适于工业化生产的柱层析填充材料，代替了常用的昂贵的凝胶等材料，收率可达５９％，纯度９５％以上，具有收率高、成本低、可以进行规模化生产的特点，基本解决了工业化生产中纳豆激酶分离纯化的瓶颈问题，为高效率分离得到高纯度、高酶活的纳豆激酶创造了条件，具有良好的经济效益和社会效益。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种适用于工业化生产的分离纯化纳豆激酶的方法，包括以下步骤：（１）发酵液的预处理：发酵所得约１０Ｌ发酵液放罐后立即进行板框过滤或离心去杂，滤液转移至沉淀罐。将研细的（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］按照２０％饱和度加入到沉淀罐中，４℃下保存过夜，弃去沉淀（沉淀为初步分离的杂蛋白），收集上清液备用。将上清液移至另一沉淀罐，加入乙醇至７５％饱和度，４℃下保存过夜，弃去上清液，收集沉淀，用１０ｍｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ９．０的磷酸缓冲液溶解残渣，定容到１Ｌ，测定各项指标。（２）阴离子交换树脂去杂：用Ｓｔｙｒｅｎｅ－ＤＶＢ大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂（南开大学化工厂）去除杂质和色素。其操作步骤为：装柱、...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹晓琴，张云峰，李军，陈晓炜，胡伶俐，
申请(专利权)人：湖北国力生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：83[]