【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及基因修饰间充质干细胞在多种疾病中的制药用途和诊断用途。
技术介绍
1、细胞治疗技术是指将人自体或异体细胞经过体外处理，回输人体后治疗或预防疾病的技术，其中体外操作包括细胞在体外的传代、扩增、筛选以及给予药物或其他能改变细胞生物学行为的处理，经过处理的细胞发挥了主要治疗或预防疾病作用。细胞疗法主要包括：一类即以嵌合抗原受体t细胞（简称car-t）（zhao z, chen y, francisco nm, zhangy, wu m. the application of car-t cell therapy in hematological malignancies:advantages and challenges. acta pharm sin b. 2018;8(4):539-551.）、t细胞受体t细胞（简称tcr-t）、嵌合抗原受体自然杀伤细胞（简称car-nk）等为代表的在体外通过基因工程手段改造过的免疫细胞回输疗法，这种疗法也被fda定义为基于细胞的基因疗法；一类则是直接获取后在体外扩增至一定数目便可进行回输的细胞疗法，如使用调节性t细胞（treg）、肿瘤浸润淋巴细胞（til）等治疗方案（guidance for human somatic celltherapy and gene therapy[j]. human gene therapy, 2001, 12(3):303.）；一类则是直接获取后在体外扩增至一定数目便可进行回输的细胞疗法，如使用调节性t细胞（treg）、肿瘤浸润淋巴
2、目前的细胞疗法大多存在特异性不强、长效性较强，存在一定的脱靶效应等缺陷。以较为热门的car-t疗法为例，其在血液系统恶性肿瘤取得了一定疗效，但在实体瘤中疗效甚微。
3、干细胞技术与免疫治疗方法的结合产生了一种联合免疫疗法。近年来，科学家们开发了许多治疗性分子，例如双功能多靶点抗体、融合蛋白和溶瘤病毒，并且正在对不同类型的干细胞进行修饰以促进其有效递送。其中将抗体修饰的干细胞用于治疗肿瘤已经取得了一定成效（hu, q. et al. conjugation of haematopoietic stem cells andplatelets decorated with anti-pd-1 antibodies augments anti-leukaemiaefficacy. nat biomed eng2, 831-840 (2018).；cordero a, ramsey md, kanojia d, etal. combination of tucatinib and neural stem cells secreting anti-her2antibody prolongs survival of mice with metastatic brain cancer. proc natl acad sci u s a. 2022;119 (1): e2112491119.）。
4、国际专利申请wous22078320公开了一种修饰的cd117多肽，其包含抑制或减少与抗cd117抗体结合的一个或多个氨基酸修饰。还提供了编码修饰的cd117多肽的核酸，以及其中引入cd117核酸或多肽的细胞，例如造血干细胞，所述造血干细胞可用于例如造血细胞移植。
5、中国专利申请201980070933.9公开了一种或多种修饰的谱系特异性细胞表面抗原的遗传工程化造血细胞，例如造血干细胞（hsc）。在一些实施方案中，对一种或多种修饰的谱系特异性细胞表面蛋白进行修饰，使得谱系特异性细胞表面蛋白的一种或多种在hsc或表达其的后代细胞中至少部分保留其谱系特异性细胞表面抗原的生物学活性，但可逃避对相应野生型谱系特异性细胞表面抗原特异的细胞毒性剂的靶向作用。
6、目前本领域需要更多的修饰干细胞以用于免疫治疗。
技术实现思路
1、il-17家族共有7个成员，分别被命名为il-17a到il-17f，il-17家族氨基酸序列在c端高度相似，主要由5个在空间上保守的半胱氨酸组。表达il-17最丰富的细胞主要是胸腺依赖的淋巴细胞，包括适应性免疫中的αβt细胞，固有免疫中的γδt细胞， 恒定型自然杀伤t细胞和淋巴组织诱导样细胞（lti-like cells）。il-17家族在宿主抗微生物反应和炎症性疾病的发展过程中扮演着重要角色。il-17促进了调节其各种功能的多种细胞因子的合成和分泌。这些细胞因子包括：趋化因子（如cxcl1、cxcl8和ccl2）；促炎症因子（如il-6、tnf-α和il-1β）；促炎症因子调节因子（如nos和cox）；gm-csf和g-csf生长因子和组织重塑因子（如mmp1，mmp3和rankl）。
2、不论是由固有免疫细胞还是适应性免疫细胞分泌的il-17a和il-17f，其最显著的功能是诱导中性粒细胞向感染部位迁移，il-17a和il-17f的这种功能对微生物的清除至关重要。一些研究表明，上皮和黏膜屏障受到细菌感染过程中诱导产生的il-17a和il-17f在宿主防御中起重要作用。第一个证明il-17介导的宿主防御作用的研究是il-17r缺陷型小鼠的克雷伯氏肺炎肺部感染模型（ye p, et al. requirement of interleukin 17receptor signaling for lung cxc chemokine and granulocyte colony-stimulatingfactor expression, neutrophil recruitment, and host defense. j exp med.2001;194(4):519-527.）。研究使用il-17ra和il-17缺陷型小鼠模型或是使用il-17受体或配体的中和抗体来阻断il-17信号通路，会导致小鼠对各种细胞外或者细胞内细菌感染更加敏感，这些细菌包括沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、链球菌肺炎、结核分枝杆菌、单核细胞增多性李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和幽门螺杆菌（pappu r, et al. the interleukin-17cytokine family: critical players in host defence and inflammatorydiseases. immunology. 2011; 134 (1): 8-16.;iwakura y, et al. functionalspecialization of interleukin-17 family members. immunity. 2011; 34 (2): 149-162.;mcgeachy mj, et al. the il-17本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种经修饰的干细胞在以下的用途：
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述干细胞包含、表达和/或分泌：
3. 根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的第一蛋白的序列包含如SEQ IDNO: 16所示的氨基酸序列；和/或
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述干细胞包含、表达和/或分泌融合蛋白：
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述富含Gly和Ser的组合的肽为由重复的GGGGS氨基酸序列组成的序列。
6. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述融合蛋白包含如SEQ ID NO: 18所示的氨基酸序列。
7. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含：
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含：
9. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含：编码SEQ ID NO: 18的核苷酸序列。
10. 根据权利要求1-9中任一所述的用途，其特征在于，所述HCDR1具有如SEQ ID NO:1所示的氨基
11.根据权利要求1-9中任一所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含、表达和/或分泌能够延长抗体在体内半衰期的生物活性蛋白或其功能片段。
12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述生物活性蛋白或其功能片段选自免疫球蛋白Fc结构域、血清白蛋白、白蛋白结合多肽、前白蛋白、羧基末端肽、弹性蛋白样多肽、His标签、GST标签、MBP标签、FLAG标签和SUMO标签中的至少一种。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，所述免疫球蛋白Fc结构域为人免疫球蛋白Fc结构域。
14.根据权利要求13所述用途，其特征在于，所述人免疫球蛋白Fc结构域为人IgG1的Fc结构域。
15.根据权利要求12-14中任一所述的用途，其特征在于，所述干细胞选自胚胎干细胞、成体干细胞、间充质干细胞、脐带血干细胞、造血干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞、皮肤干细胞或肌肉干细胞。
16.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述干细胞为间充质干细胞。
17.根据权利要求16所述的用途，其特征在于，所述干细胞分离自脐带血、脐带、胎盘、脂肪组织、皮肤、神经组织、骨髓或胚胎。
18.根据权利要求17所述的用途，其特征在于，所述药物包括有效治疗量的所述干细胞、所述干细胞的培养物、或所述干细胞的提取物，以及至少一种药学上可接受的载剂。
19.根据权利要求18所述的用途，其特征在于，所述药学上接受的载剂选自溶剂、稀释剂、崩解剂、沉淀抑制剂、表面活性剂、助流剂、粘合剂、润滑剂、分散剂、助悬剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂和抗氧化剂中的至少一种。
20.根据权利要求16-19中任一所述的用途，其特征在于，所述药物的剂型包括水针注射剂、冻干粉针剂、注射液、口服溶液、粉针剂、颗粒剂或散剂。
21.根据权利要求20所述的用途，其特征在于，所述自身免疫性疾病包括白塞氏病、系统性红斑狼疮、慢性盘状红斑狼疮、多发性硬化症、系统性硬皮病、进行性系统性硬化症、硬皮病、多发性肌炎、皮肌炎、结节性动脉周围炎、主动脉炎综合征、风湿性关节炎、类风湿关节炎、幼年特发性关节炎、脊椎关节炎、混合性结缔组织病、卡斯尔曼病、干燥综合征、成人斯蒂尔病、血管炎、过敏性肉芽肿性血管炎、过敏性血管炎、类风湿性血管炎、大血管血管炎、ANCA相关性血管炎、Cogan综合征、RS3PE综合征、颞动脉炎、风湿性多肌痛、纤维肌痛、抗磷脂抗体综合征、嗜酸性筋膜炎、IgG4相关疾病、格林巴利综合征、重症肌无力、慢性萎缩性胃炎、自身免疫性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、Good-pasture综合征、急进性肾小球肾炎、狼疮性肾炎、巨幼红细胞性贫血、自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、自身免疫性中性粒细胞减少症、特发性血小板减少性紫癜、巴塞杜病、桥本病、自身免疫性肾上腺皮质功能减退症、原发性甲状腺功能减退症、艾迪生病、特发性艾迪生病、I型糖尿病、缓慢进展型I型糖尿病、局灶性硬皮病、银屑病...
【技术特征摘要】
1.一种经修饰的干细胞在以下的用途：
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述干细胞包含、表达和/或分泌：
3. 根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的第一蛋白的序列包含如seq idno: 16所示的氨基酸序列；和/或
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述干细胞包含、表达和/或分泌融合蛋白：
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述富含gly和ser的组合的肽为由重复的ggggs氨基酸序列组成的序列。
6. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述融合蛋白包含如seq id no: 18所示的氨基酸序列。
7. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含：
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含：
9. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含：编码seq id no: 18的核苷酸序列。
10. 根据权利要求1-9中任一所述的用途，其特征在于，所述hcdr1具有如seq id no:1所示的氨基酸序列，所述hcdr2具有如seq id no: 2所示的氨基酸序列，所述hcdr3具有如seq id no: 3所示的氨基酸序列，所述hcdr4具有如seq id no: 4所示的氨基酸序列，所述hcdr5具有如seq id no: 5所示的氨基酸序列，所述hcdr6具有如seq id no: 6所示的氨基酸序列。
11.根据权利要求1-9中任一所述的用途，其特征在于，所述的干细胞包含、表达和/或分泌能够延长抗体在体内半衰期的生物活性蛋白或其功能片段。
12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述生物活性蛋白或其功能片段选自免疫球蛋白fc结构域、血清白蛋白、白蛋白结合多肽、前白蛋白、羧基末端肽、弹性蛋白样多肽、his标签、gst标签、mbp标签、flag标签和sumo标签中的至少一种。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，所述免疫球蛋白fc结构域为人免疫球蛋白fc结构域。
14.根据权利要求13所述用途，其特征在于，所述人免疫球蛋白fc结构域为人igg1的fc结构域。
15.根据权利要求12-14中任一所述的用途，其特征在于，所述干细胞选自胚胎干细胞、成体干细胞、间充质干细胞、脐带血干细胞、造血干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞、皮肤干细胞或肌肉干细胞。
16.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述干细胞为间充质干细胞。
17.根据权利要求16所述的用途，其特征在于，所述干细胞分离自脐带血、脐带、胎盘、脂肪组织、皮肤、神经组织、骨髓或胚胎。
18.根据权利要求17所述的用途，其特征在于，所述药物包括有效治疗量的所述干细胞、所述干细胞的培养物、或所述干细胞的提取物，以及至少一...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘拥军，刘广洋，李欣，张晨亮，徐晓丹，周敬文，
申请(专利权)人：北京贝来药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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