【技术实现步骤摘要】
本专利技术提供一种利用实时荧光定量PCR检测基孔肯亚病毒核酸的方法。
技术介绍
基孔肯雅病毒(Chikungunya virus)是单股正链RNA病毒,属于披膜病毒科 (Togaviridae)甲病毒属(Alphavirus),引起基孔肯雅热(Chikungunyafever,CHIK)。该 病为一种急性传染病,通过伊蚊传播给人,在临床上以发热、关节疼痛、皮疹和轻度出血为 特征。1953年首次从坦桑尼亚的1例发热患者的血液中分离出基孔肯雅病毒。20世纪 60-90年代,在非洲中部和南部的许多国家该病均有流行,并分离到CHIK病毒,如苏丹、乌 干达、刚果民主共和国、中非共和国、马拉维、津巴布韦、肯尼亚和南非;西非的塞内加尔、贝 宁、几内亚共和国、科特迪瓦和尼日利亚等;在东南亚,1999年印度尼西亚首次暴发CHIK, 2001-2003年此地再次出现该病流行;在印度洋岛屿,近几年,印度洋岛屿出现大规模的 CHIK暴发流行。2005年,科摩罗岛发生大暴发流行并迅速传播到整个印度洋的其他岛屿; 在欧洲,2007年7月,意大利拉文纳省的2个村庄发生CHIK ;2004-2007年,亚洲和非洲等 地区的CHIK暴发流行不断发生,其中2006年全球共发生CHIK患者大约200万例。值得注 意的是我国的台湾地区在1967年和2006年曾发生过CHIK流行,2008年我国大陆首次发现 的CHIK输入性病例。但截至目前我国尚无CHIK本土流行的确切报道。纵观历史,CHIK已 经成为全球区日益严重的公共卫生问题。目前,针对外来传染病的实验室快速检测技术主要采用的是免疫学检测 ...
【技术保护点】
实时荧光定量PCR检测基孔肯亚病毒核酸的方法,其特征在于,该方法利用实时荧光定量PCR检测技术,通过设计一对引物和探针对病毒样本进行实时定量检测,所设计引物和探针序列如下: PrimerF(5’-3’): GGGGCTGAACCAGAGAATAGTG PrimerR(5’-3’): TTGGRGCGACCAGATCCGCGGGAAK Probe(5’-3’): CGGCAGAACGCAACGGAAYAYGAACACATGCC。
【技术特征摘要】
实时荧光定量PCR检测基孔肯亚病毒核酸的方法,其特征在于,该方法利用实时荧光定量PCR检测技术,通过设计一对引物和探针对病毒样本进行实时定量检测,所设计引物和探针序列如下2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该方法包括引物和探针的获得,对基孔肯 亚病毒核酸的检测;其中,引物和探针的获得步骤为(1)收集筛选基孔肯亚病毒全基因组 序列,利用生物信息学软件进行同源性比对,并在其保守区设计引物,(2)根据PCR扩增区 域内的核苷酸序列设计特异性探针,并登录 GENEBANK检测探针的特异性;对基孔肯亚病毒 核酸的检测步骤为首先提取病毒的核酸,然后利用所设计的引物和探针对待检...
【专利技术属性】
技术研发人员:姚李四,燕清丽,张晓龙,
申请(专利权)人:中国检验检疫科学研究院,
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]
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