增强针对疫苗的免疫应答的方法技术

本发明专利技术提供一种用于增强针对抗原或疫苗的免疫应答的方法，所述方法包括基本上与施用有效量的抗原或疫苗同时进行口腔粘膜施用有效量的Ｔｈ１刺激性细胞因子，优选地是干扰素。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
专利
本专利技术涉及用于增强对接种的免疫应答的方法。更具体地，涉及干扰素、和/或其它Th1刺激性细胞因子的应用，如在用于增强在疫苗施用后的免疫应答的免疫佐剂中的应用。相关技术的描述疫苗是本领域内已知的。一般地，它们包括杀死的或减毒的病原体和亚单位疫苗，或包括另一种抗原的疫苗，其中针对所述另一种抗原的免疫应答是需要的，施用所述疫苗，目的是预防、改善或治疗传染性疾病。特别地，亚单位疫苗是基于衍生于病原体的成分的抗原的疫苗，所述抗原被认为是由宿主免疫系统介导的保护的重要靶点。尽管已证明是高度安全的，但是，由于它们所基于的抗原有极低的免疫原性或是非免疫原性的，所以亚单位疫苗经常诱导不充分的免疫应答。因此，为了提高免疫原性，亚单位疫苗通常需要包括或与佐剂一起施用。免疫学将佐剂定义为“用于增强抗原性的载体”(Stedman′s MedicalDictionary，2003)。因此，当与抗原一起施用时，与单独的抗原相比较，佐剂是增强其抗原性的物质。尽管许多类型的佐剂已经用于动物模型，并且经典的实验包括油包水的乳剂，其中抗原溶液在矿物油(弗氏不完全佐剂)中乳化，有时包括杀死的分枝杆菌(弗氏完全佐剂)，吸附抗原的矿物质(明矾、氢氧化铝或磷酸铝)的混悬液，皂角苷和衍生于LPS的产物，目前，基于铝的矿物盐是人疫苗制剂常规所包含的唯一的佐剂。尽管是安全的，这样的盐是抗体诱导的微弱佐剂，并且不能刺激经典的细胞介导的免疫应答。抗体和细胞介导的应答的诱导都需要提供针对侵入的病原体的高度有效的抵御，目的是限制它们扩散或消除它们。疫苗需要提供或诱导2种类型的信号，以便激发强的、保护性的免疫应答。首先，疫苗需要递送所述抗原，其引发T和B淋巴细胞上的抗原特异性受体。其次，有效的疫苗需要通过抗原呈递细胞诱导共刺激性分子的表达，然后其提高引发抗原的淋巴细胞促进强应答。当应用含有活的病原体的疫苗时，这种第二信号通常由与干扰素相关的因子提供，但是通常在亚单位疫苗中缺少这种第二信号，这导致它们极低的免疫原性。加入可以促成这种第二信号的佐剂将增强疫苗的效力，并且还可以控制所激发的免疫应答的类型。这些信号指导宿主的免疫系统向后续的效应器机制发展，其突出了针对所给的传染性介质的全面免疫应答的类型和效力的特征。细胞因子代表在针对抗原和传染性介质的免疫应答过程期间，参与免疫活性细胞之间的通讯的主要因子，所述免疫活性细胞包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、和树突细胞。关于小鼠和人T辅助(Th)克隆的许多研究提供了大量的证据证明由Th细胞(叫作Th1和Th2)展现出的不同的活性的存在，其是从细胞因子分泌的模式推断出来的。因此，认为IFN-γ或IL-4的产生分别是Th1或Th2应答的典型特点。Th1型的免疫应答通常与小鼠中IgG2a的产生和细胞免疫性的发展相关，而Th2型应答与IgE产生、嗜伊红粒细胞和巨细胞的产生相关。通常认为Th1型免疫应答的诱导有助于产生针对病毒和某些细菌感染的保护性免疫应答。在这点上，重要地，注意到临床上可用的佐剂，诸如基于铝的矿物盐，倾向于诱导Th2型免疫应答，其可以引起促成它们不必要的副作用的变态反应。在高危组，包括老年人和具有损害的免疫应答的个体中，流感接种减少由流感传染引起的发病率和死亡率，但是在所有受体中其不是完全保护性的(Oxford等.，2003)。由于这样的疫苗激发极少的细胞毒性T细胞应答，并且血凝素抑制性(HI)抗体滴度通常用作保护的替代标记，所以认为由常规所用的亚单位疫苗提供的保护主要是由于针对病毒血凝素的抗体的产生。针对病毒抗原的中和性抗体(IgG2a)的产生需要CD4+T辅助细胞的参与，其识别与MHC类别II抗原相关的抗原，并且在针对流感接种“处于危险中”未应答者中观察到HLA-DRB1*7多态性频率的增加(Gelder等.，2002)。高度有效的佐剂的缺乏组成了成功开发疫苗，特别是针对胞内病原体、需要细胞免疫性的那些疫苗的显著的障碍。目前，存在对于有效的非毒性组合物或能够增强针对流感和其它疫苗的抗体应答的方法的尚未满足的需要。在这方面，由于上文证明的特点，在本领域将细胞因子，和特别的是干扰素(IFNs)，视作可能的佐剂(Heat等.，1992)。干扰素是多功能细胞因子，其基于结构分类为i)I型IFNs，由没有内含子的基因编码，并且其包括由所有的细胞型有效产生的IFN-α家族，其中的至少13种功能性IFN-α亚型，IFN-β和IFN-ω。ii)II型IFN，由含有单个内含子的基因编码，也叫作IFN-γ，并且主要由T细胞和NK细胞应答特异的抗原或促分裂原而产生。最初被认为是简单的抗病毒物质，后来表明I型IFNs显示出各种生物作用，包括在实验动物模型以及在患者中的抗肿瘤活性。已经表明I型和II型IFNs在体外对抗体产生和T细胞增殖发挥有效的抑制性作用，这引起这样的问题，即，这些细胞因子是否将在体内以刺激性或抑制性的方式起作用。最近，在不同的模型系统中获得的全体数据表明I型IFN在诱导Th1型免疫应答和支持某些T细胞亚型的增殖、功能性活性和存活中的重要性(Belardelli F.和Gresser I.，1996；和Tough等.，1996)。I型干扰素是目前在临床实践中应用最广泛的细胞因子。特别地，IFN-α在全世界多于40个国家中用于治疗一些病毒疾病(特别是丙型肝炎)和各种类型的人癌症，包括一些血液恶性病(毛细胞白血病，慢性髓细胞白血病，一些B和T细胞淋巴瘤)和某些实体瘤，诸如黑素瘤，肾癌和卡波西肉瘤。相反，发现IFN-γ有限的临床应用，至少部分是由于毒性。在最近的几年间，一些研究提供了这样的证据，即，由I型和II型IFNs行使的生物作用可以在活性类型上在不同的实验模型中基本上不同。在一些情形中，诸如黑素瘤和多发性硬化中，IFN-γ的临床应用引起与关于用I型IFN所获得的那些作用相反的作用。尽管其广泛的临床应用，I型IFN还没有用作人中的疫苗佐剂。IFNs在体内作为疫苗中的佐剂的相关应用已经为II型IFN(即，IFN-γ)显示出来。特别地，在EP 0241725中，描述了一种疫苗，其含有衍生于用约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)的剧毒YM系感染的小鼠血细胞的粗蛋白提取物，其包括IFN-γ作为佐剂。包含在疫苗中的IFN-γ的用量指定在每剂1,000-10,000单位范围内，其中产生所述佐剂效果的IFN-γ的用量指定在100-50,000单位。所用的剂量是5,000单位，即使低于200单位的剂量也表明是有效的。一些现有技术文献考虑到I型IFN作为佐剂的应用，并且表明，当用作疫苗佐剂时，I型IFN增强体内的保护性Th1型应答。IFN-α是一种有力的多克隆B细胞激活剂，其诱导强的初级体液免疫应答，所述体液免疫应答特征在于同种型转换和抗病毒激发的保护(LeBon等.，2001)。事实上，已经表明由浆细胞样树突状细胞应答病毒感染而分泌的IFN-α诱导B淋巴细胞分化成为产生抗原的浆细胞，并且必要地产生应答流感感染的特异性和多克隆的IgGs(Jego，2003)。并且，还表明IFN-α刺激特征为Th1免疫性的IgG2a抗体应答和抗病毒感染的保护(Le Bon等.，2001)，并且还表明，当与流感疫苗混合并本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种增强针对疫苗的免疫应答的方法，其包括：（ａ）通过除口腔粘膜递送以外的方式，给受试者施用有效量的疫苗或抗原；和（ｂ）口腔粘膜施用一定量的干扰素和／或至少一种其它Ｔｈ１刺激性细胞因子，足以增强针对所述疫苗的免疫应答，所述干扰素和／或其它细胞因子的施用是与所述疫苗的施用基本上是同时的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M托维，
申请(专利权)人：国家科学研究中心，奥拉凯有限公司，
类型：发明
国别省市：FR[法国]