酶解－膜超滤提取精制青稞苗黄酮的工艺制造技术

本发明专利技术为青稞苗中黄酮类化合物的提取精制技术领域，特涉及一种酶解－膜超滤提取精制青稞苗总黄酮的工艺。其工艺为预处理、打浆、酶解、提取、超滤、干燥得产品六步骤完成；预处理中将生长高度为２５～４０ｃｍ的鲜青稞苗割取；纤维素酶与青稞苗的重量比是１∶１００～１０００，温度３０～６０℃，ｐＨ值３．５～６，搅拌时间０．５～４小时；提取中青稞苗浆与４０～９５％乙醇重量比是１∶３～１０，回流提取１～３小时，合并两次提取液；超滤中将提取液分别通过１、０．５、０．１μｍ的微滤膜微滤，将微滤液通过超滤膜超滤，操作压力０．１５～０．２５ＭＰａ，温度为２５～４５℃，将超滤透过液通过超滤膜超滤，操作压力０．１５～０．２５ＭＰａ，温度为２５～４５℃，收集过滤液。本工艺简便，黄酮得率高，纯度高且保持活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于青稞苗中黄酮类化合物的提取精制方法
，尤其 涉及一种酶解-膜超滤提取精制青稞苗总黄酮的工艺。
技术介绍
黄酮类化合物又称类黄酮化合物，主要指具有色酮环与苯环为基本结构的一类化 合物的总称，具有C6-C3-C6基本构型，为植物体多酚类的代谢物，是目前人们比较关注的 一类化合物。黄酮类化合物具有广泛的生物活性，包括抗氧化、抗突变、抗衰老、抗肿瘤、抗 菌等，提取精制黄酮类化合物已成为国内外天然产物开发利用研究的热点。青稞(Hordeum vulgare L. var. nudum Hook. F.)是禾本禾斗大麦属(Hordeum vulgare)的一种禾谷类作物。青稞在青臧高原具有悠久的栽培历史，主要分布在西藏、青海 等海拔为4200 4500米的高寒地区，是青藏高原农业文化的象征。青稞具有丰富的营养 价值和突出的医药保健作用。据《藏药志》记载“青稞，甘、凉而重；益精壮阳，除尿中油脂， 清热化湿、 祛风寒、宁肺定喘；治阳虚肾亏，油脂过多”。藏医典籍《晶珠本草》更把青稞作为 一种重要药物，用于治疗多种疾病。据报道，青稞苗中含有高活性、结构独特的黄酮类物质，总黄酮提取物具有明显的 抗疲劳和耐缺氧功效。近年来，有关青稞苗提取总黄酮的研究也有少量报道，但现行加工方 法存在工艺复杂、提纯效果不理想、成本高而效益低，资源浪费严重等缺点，限制了产品的 推广与应用。超滤膜技术根据分子的形状和相对分子质量的大小，通过膜孔的筛分、吸附等作 用，对体系中的不同组分实现选择性分离，达到分子水平上的分离、纯化和浓缩，同时操作 简单易行。超滤已经广泛应用于食品、医药、工业废水处理、超纯水制备及生物技术工业。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种适合于大规模工业生产，黄酮含量较高，成本低而效益 高，质量稳定可控的酶解_膜超滤提取精制青稞苗黄酮工艺。酶解-膜超滤提取精制青稞苗黄酮的工艺，它包括下列步骤1、预处理将生长高度为25 40cm的鲜青稞苗割取后进行挑选，除去枯萎叶苗、 泥土及杂草。最好选用无空气污染、无土壤污染、不施用化学肥料的幼苗；将挑选过的青稞 苗用水清洗干净后待用。2、打浆将青稞苗用打浆机处理制成青稞苗浆液。3、酶解往青稞苗浆液中加纤维素酶，在一定条件下降解处理。酶解参数是纤维 素酶与青稞苗浆液的重量比是1 100 1000，温度30 60°C，PH值为3. 5 6，搅拌酶 解时间为0. 5 4小时。PH值的调节可用盐酸或醋酸以及其它不影响食用的酸调节。4、提取将酶解好的青稞苗浆液中加入浓度为40% 95%的乙醇溶液，青稞苗浆 液与乙醇溶液的重量比是1 3 10，回流提取1 3小时后，离心分离；重复上述操作， 合并两次提取液。5、超滤先将提取液分别通过1、0. 5、0. Iym的微滤膜进行微滤，得微滤液；将微滤液通过截留相对分子量60000 70000道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力0. 15 0. 25MPa，温度为25 45°C，得超滤透过液，此操作可有效截留微滤液中含有的大分子杂质 如淀粉、糖类和蛋白质；将超滤透过液通过截留相对分子量5000 10000道尔顿的超滤膜 进行超滤，操作压力0. 15 0. 25MPa，温度为25 45°C，得过滤液。6、干燥得产品将过滤液喷雾或冷冻干燥得青稞黄酮。本专利技术中黄酮提取率显著提高，甚至可提高30%左右。这由于青稞苗细胞壁主要 是纤维素、半纤维素和木质素等物质致密组成，常规提取过程细胞内黄酮溶出不够充分。酶 解后，细胞壁的骨架结构被纤维素酶逐级降解，利于黄酮的充分溶出。本专利技术先截留微滤液中大分子杂质如淀粉、糖类和蛋白质，然后截留相对分子量 5000 10000道尔顿物质，过滤液经高效液相检测，青稞苗提取物中黄酮的质量分数提高 到35% 45%，可见超滤对黄酮的提纯起到了很好的效果。本专利技术工艺流程简便，黄酮得率高，纯度高且易于保持其活性，无环境污染。同时， 本专利技术也可以应用其他低分子量活性物质的提取精制。具体实施例方式实施例1 预处理中将生长高度为25cm左右的鲜青稞苗割取后进行挑选，除去枯 萎叶苗、泥土及杂草。选用无空气污染、无土壤污染、不施用化学肥料的青稞幼苗；将挑选过 的青稞苗用水清洗干净后待用。打浆中将青稞苗用打浆机处理制成青稞苗浆液。酶解中往 青稞苗浆液中加纤维素酶，酶解参数是纤维素酶与青稞苗浆液的重量比是1 100，温度 30°C左右，PH值为3. 5，搅拌酶解时间为0.5小时。PH值的调节用盐酸调节。提取中将酶解 好的青稞苗浆液中加入浓度为40%的乙醇溶液，青稞苗浆液与乙醇溶液的重量比是1 3， 回流提取1小时左右后，离心分离；重复上述操作，合并两次提取液。超滤中先将提取液分 别通过1、0. 5,0. 1 μ m的微滤膜进行微滤，得微滤液；将微滤液通过截留相对分子量60000 道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力0. 15MPa，温度为25°C左右，得超滤透过液，此操作可 有效截留微滤液中含有的大分子杂质如淀粉、糖类和蛋白质；将超滤透过液通过截留相对 分子量5000道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力0. 15MPa，温度为25°C左右，得过滤液。再 喷雾干燥过滤液得产品青稞黄酮。实施例2 预处理中将生长高度为40cm左右的鲜青稞苗割取后进行挑选，除去枯 萎叶苗、泥土及杂草。将挑选过的青稞苗用水清洗干净后待用。打浆中将青稞苗用打浆机 处理制成青稞苗浆液。酶解中往青稞苗浆液中加纤维素酶，酶解参数是纤维素酶与青稞苗 浆液的重量比是1 1000，温度60°C左右，PH值为6，搅拌酶解时间为4小时，PH值的调节 用醋酸调节。提取中将酶解好的青稞苗浆液中加入浓度为95%的乙醇溶液，青稞苗浆液与 乙醇溶液的重量比是1 10，回流提取3小时左右后，离心分离；重复上述操作，合并两次 提取液。超滤中先将提取液分别通过1、0. 5,0. 1 μ m的微滤膜进行微滤，得微滤液；将微滤 液通过截留相对分子量70000道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力0. 25MPa，温度为45°C左 右，得超滤透过液，此操作可有效截留微滤液中含有的大分子杂质如淀粉、糖类和蛋白质； 将超滤透过液通过截留相对分子量10000道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力0. 25MPa，温 度为45°C左右，得过滤液。再冷冻干燥过滤液得产品青稞黄酮。 实施例3 预处理中将生长高度为30cm左右的鲜青稞苗割取后进行挑选，除去枯萎叶苗、泥土及杂草。将挑选过的青稞苗用水清洗干净后待用。打浆中将青稞苗用打浆机 处理制成青稞苗浆液。酶解中往青稞苗浆液中加纤维素酶，酶解参数是纤维素酶与青稞苗 浆液的重量比是1 500，温度50°C左右，PH值为5，搅拌酶解时间为3小时，PH值的调节用 醋酸调节。提取中将酶解好的青稞苗浆液中加入浓度为75%的乙醇溶液，青稞苗浆液与乙 醇溶液的重量比是1 8，回流提取2小时左右后，离心分离；重复上述操作，合并两次提取 液。超滤中先将提取液分别通过1、0. 5,0. 1 μ m的微滤膜进行微滤，得微滤液；将微滤液通 过截留相对分子量65000道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力0. 20MPa，温度为35°C左右， 得超滤透过液，此操作可有效截留微滤液中含有的大分子杂质如淀粉本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酶解－膜超滤提取精制青稞苗黄酮的工艺，其特征是：（一）工艺步骤为：预处理、打浆、酶解、提取、超滤、干燥得产品六步骤完成；（二）工艺条件为：预处理中将生长高度为２５～４０ｃｍ的鲜青稞苗割取后进行挑选；酶解中酶解参数是纤维素酶与青稞苗的重量比是１∶１００～１０００，温度３０～６０℃，ＰＨ值３．５～６，搅拌时间０．５～４小时；提取中将酶解好的青稞苗浆中加入浓度４０～９５％乙醇溶液，青稞苗浆与乙醇溶液重量比是１∶３～１０，回流提取１～３小时后，离心分离，重复上述操作，合并两次提取液；超滤中先将提取液分别通过１、０．５、０．１μｍ的微滤膜进行微滤，得微滤液，将微滤液通过截留相对分子量６００００～７００００道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力０．１５～０．２５ＭＰａ，温度为２５～４５℃，将上述超滤透过液通过截留相对分子量５０００～１００００道尔顿的超滤膜进行超滤，操作压力０．１５～０．２５ＭＰａ，温度为２５～４５℃，收集过滤液；。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈元涛，张炜，郭守明，范燕青，石獒，洪美花，王婧，段黎昊，王晓兰，蔡林森，张建东，张立鹏，解赛芬，
申请(专利权)人：陈元涛，
类型：发明
国别省市：63[中国|青海]