一种有效抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ-2及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种有效抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ

【技术实现步骤摘要】
一种有效抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ
‑
2及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种有效抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ
‑
2及其应用。

技术介绍

[0002]柑橘黄龙病Huanglongbing,HLB是柑橘产业最严重的毁灭性病害。最早在18世纪，印度中部和东北部就有疑似黄龙病症状的记载，称为“梢枯病”。目前在中国的11个省区已经发现柑橘黄龙病。因其具有难发现，传播快，无法根治，毁灭性强等特点，严重地威胁着柑橘产业的发展。目前，针对柑橘黄龙病的防治主要是采取“三板斧”综合防控技术，即砍除病株，种植无毒苗，防治亚洲柑橘木虱。
[0003]柑橘黄龙病菌是一种限于韧皮部内寄生的革兰氏阴性细菌，属于变形菌门(Proteobacteria)，α
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变形菌纲(Alpha proteobacteria)，根瘤菌目(Rhizobiales)，根瘤菌科(Rhizobiaceae)，候选的韧皮部杆菌属(Candidatus Liberibacter)。可分为亚洲菌株C.Liberibacter asiatium(CLas)、非洲菌株C.Liberibacter africanus(CLaf，包含一个新变种)、美洲菌株C.Liberibacter amercanus。其中亚洲种在全球分布最广、为害最大。中国发生的柑橘黄龙病亦该种引起。
[0004]目前的管理策略包括应用杀虫剂控制传播载体亚洲柑橘木虱(ACP)和抗生素治疗抑制CLas，但两者都不能有效控制HLB。因此，迫切需要创新的治疗和预防策略来对抗这种致命的柑橘疾病，以确保柑橘产业的生存。一种新的抗菌肽(AMP)，不仅具有抗菌活性，而且具有启动活性，并可以诱导柑橘的系统防御反应。这种双功能抗菌肽(AMP)可以降低HLB阳性树，抑制HLB阳性树的疾病症状激活植物对新感染的系统防御反应。

技术实现思路

[0005]针对现有技术普遍具有的缺陷，本专利技术提供了一种可以有效抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ
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2及其应用。本专利技术提供的抗菌肽STJ
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2对柑橘黄龙病病原菌(革兰氏阴性细菌
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韧皮部杆菌)具有良好的抑制效果；此外药后罹病柑橘植株病原菌减少、整体长势良好。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0007]一种抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ
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2，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]SHVEYANLFLANLEKVLVIDEK(SEQ ID NO.1)；
[0009]本专利技术还提供了一种编码所述抗菌肽STJ
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2的核苷酸序列，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0010]TCACACGTCGAATACGCTAACCTGTTTCTGGCTAACCTGGAAAAGGTCTTGGTGATTGATTACAAG(SEQ ID NO.2)。
[0011]本专利技术还提供了一种所述的抗菌肽STJ
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2在制备抑制黄龙病菌产品中的应用。
[0012]优选地，所述抗菌肽STJ
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2对黄龙病菌的最低抑菌浓度为10mM。
[0013]本专利技术还提供了一种重组表达载体，包含编码所述氨基酸序列的核苷酸序列。
[0014]本专利技术还提供了一种所述抗菌肽STJ
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2在制备治疗黄龙病药物组合物中的应用。
[0015]优选地，所述药物组合物还包括生理盐水及药学上可接受的辅料。
[0016]优选地，所述辅料包括羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁、滑石粉、丙二醇、甘油、透明质酸、山梨酸钾中的一种或几种。
[0017]由于柑橘黄龙病的病原菌寄生于韧皮部无法进行离体培养，筛选对其有效杀菌功能的药物造成困难。使用抗生素防治植物的细菌病害被认为是一种有效的防治手段，最早在50多年前就有相关报道。研究至今已经有如下几种化学药剂被证明对柑橘黄龙病病菌有较强的杀伤性：(1)四环素，在中国，南非，菲律宾等地曾经将四环素通过躯干注射的方式运输到感病柑橘植株体内，数据表明四环素能够有效地减轻柑橘黄龙病的症状，有一定的防治效果。但是四环素杀菌效率较低，在一定时期可以有效抑制病原菌生长，并不能彻底杀死细菌。且其病菌耐药性高，若通过每年反复的长期注射，抗生素会对被处理的柑橘植株产生一定的危害。(2)青霉素，青霉素是一种具有广谱杀菌效果的抗生素。其应用于柑橘黄龙病的进一步研究表明，单独使用氨苄青霉素、羧苄青霉素、青霉素或者与链霉素共用可以抑制或者消灭黄龙病病菌。目前已经有相关国家和地区尝试使用抗生素进行柑橘黄龙病的紧急防治，但是抗生素的大量使用对环境和人体的安全问题具有很大的危害，不利于推进环境友好型、经济效益型的农业新发展。纯天然的抗菌肽STJ
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2应用于防治柑橘黄龙病对环境影响小，会减少农药残留等“3R”问题。
[0018]至今没有关于STJ
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2作为药剂防治柑橘黄龙病的相关报道，因此STJ
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2为一种新颖的具有广谱抗菌活性，对细菌有很强的杀伤作用，尤其是对某些耐药性病原菌有灭杀作用的天然多肽药剂。本专利技术通过柑橘黄龙病防治对比实验表明，STJ
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2是一种对柑橘黄龙病菌有较强的抑制作用的抗菌肽，抑制黄龙病菌繁殖增长具有突出效果。因此STJ
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2是一种具有潜力推广于田间的柑橘黄龙病防控新型药剂。
[0019]本专利技术提供的具有广谱抗菌活性、低毒性且用于抑制柑橘黄龙病菌的具有抗菌活性的抗菌肽STJ
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2，通过树干注射抗菌试验和叶面喷施试验中和表明，抗菌肽STJ
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2对柑橘黄龙病病原菌(革兰氏阴性细菌
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韧皮部杆菌)具有良好的抑制效果；此外药后罹病柑橘植株病原菌减少、整体长势良好。
[0020]与现有技术相比，本专利技术提供的抗菌肽STJ
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2具有如下优势：本专利技术首次将抗菌肽STJ用于柑橘黄龙病的防治，有效抑制了黄龙病菌的增殖，低毒性低，且抗菌性广，经本专利技术抗菌肽治疗后，柑橘可正常生长。
附图说明
[0021]图1为抗菌肽STJ
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2药剂直制加压注射过程图；
[0022]图2为注射组A、C、E药后植株长势情况图；
[0023]图3为不同处理HLB组植株平均黄龙病菌含量动态对比图。
具体实施方式
[0024]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步解释，但是应当注意的是，以下实施例仅用以解释本专利技术，而不能用来限制本专利技术，所有与本专利技术相同或相近的技术方案均在本专利技术的保护范围之内。本实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域常规技术方法和仪器说明书内容进行操作；所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。本专利技术中涉及的序列信息均于生工生物合成。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑制柑橘黄龙病病原菌增殖的抗菌肽STJ
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2，其特征在于，所述抗菌肽STJ
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2的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种编码如权利要求1所述抗菌肽STJ
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2的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.一种如权利要求1所述的抗菌肽STJ
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2在制备抑制黄龙病菌产品中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗菌肽ST...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘逸然，席荣宾，吴景森，曹革，娄兵海，
申请(专利权)人：深圳润康生态环境股份有限公司，
类型：发明
国别省市：