从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法。采用化学分离纯化及色谱分离技术从羽芒菊中分离纯化新黄酮类化合物，包括渗漉提取、大孔吸附树脂、硅胶柱色谱分离等，从羽芒菊中分离得到３个新黄酮化合物：８，３′－二羟基－３，７，４′－三甲氧基６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖黄酮苷；８，３′－二羟基－３，７，４′－三甲氧基－６－Ｏ－［α－Ｌ－鼠李糖基－（１→２）］－β－Ｄ－葡萄糖黄酮苷；８，３′－二羟基－３，７，４′－三甲氧基黄酮。该制备方法以野生的羽芒菊为原料，来源特别丰富，制备工艺较简单，经济、安全，得率高；经初步活性研究表明，制得的新黄酮类化合物具有较强的抑菌活性、抗氧化活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于黄酮类化合物及其制备方法
，具体为。
技术介绍
黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界的重要生物活性物质，具有抗氧化、抗衰 老、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用。生物的抗氧化能力与其抗病性、抗逆性及延缓衰老密切相 关，因而从天然植物中寻找有效的抗氧化剂应用于医药、食品、保健品、化妆品等中是当前 的研究热点之一。羽芒菊(Tridaxprocumbens. L)为菊科长柄菊属多年生草本植物，甘微，苦寒，羽 芒菊叶和花有抗菌消炎的作用，经常用于割伤、擦伤、创伤伤口止血，同时还可以有效阻止 脱发。羽芒菊原产于美洲热带地区，后传播于印度、中南半岛及印度尼西亚等国，我国引入 广东、台湾及海南等地。关于，经文献 检索，尚未见研究报道。
技术实现思路
针对现有技术中存在的上述问题，本专利技术的目的在于设计提供一种从羽芒菊中分 离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法的技术方案，其制备工艺简单，得率高，制得的单体 化合物具有较强的抑菌活性和抗氧化活性。所述的从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为8，3' _ 二羟基-3， 7,4'-三甲氧基-6-0-β-D-葡萄糖黄酮苷，具有(I)所示结构式<formula>formula see original document page 4</formula>所述的从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为8，3' _ 二羟基_3， 7,4'-三甲氧基-6-0--i3_D-葡萄糖黄酮苷，具有(II)所示结构式<formula>formula see original document page 5</formula>所述的从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为8，3' _ 二羟基-3， 7,4' _三甲氧基黄酮，具有(III)所示结构式<formula>formula see original document page 5</formula>所述化合物I、II、III的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)取干燥的羽芒菊全草粗粉作原料，用70%乙醇渗漉提取，收集渗漉液；2)将渗漉液真空薄膜浓缩至无醇味，回收乙醇，得到浸膏；3)将浸膏加入适量水进行超声分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将所 得各部位萃取液减压浓缩得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位；4a)将步骤3)所得的乙酸乙酯部位超声分散于水中，通过Diaion HP-20大孔吸附 树脂柱色谱，依次用 H20U0% Me0H,20% Me0H,40% Me0H,60% Me0H,70% Me2C0 进行洗脱， 得到各洗脱部位；Diaion柱的40% MeOH洗脱部位再通过S印hadex LH-20凝胶吸附树脂柱 色谱，然后以 H20、20% Me0H,40% Me0H,60% Me0H,70% Me2C0 进行洗脱；将S印hadex柱的40% MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比5-7 1-3 1 的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱，洗脱液真空浓缩干燥得化合物I的浅黄色粗品，再经甲 醇_水混合溶剂重结晶，得化合物I的浅黄色结晶；将S印hadex柱的20% MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比6-8 1-3 1-3 的乙酸乙酯_乙醇_水进行洗脱，洗脱液真空浓缩干燥得化合物II的浅黄色无定型粉末；4b)将石油醚部位通过硅胶柱色谱，以体积比20 1-1 10的石油醚-乙酸乙酯 梯度洗脱，TLC检识，相同流份合并后得8个部分，其中以化合物III为主成分的第4部分 再通过硅胶柱色谱，然后再以体积比4-6 1的石油醚-乙酸乙酯进行洗脱，洗脱液真空浓 缩干燥得化合物III的浅黄色结晶。上述步骤1)中羽芒菊全草粗粉用3倍量的70%乙醇渗漉提取。上述步骤4a)中S印hadex柱的40% MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比6:2:1的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱；S印hadex柱的20% MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比7 2 2的乙酸 乙酯-乙醇-水进行洗脱。上述步骤4b)中石油醚-乙酸乙酯的体积比15 1-1 5。上述，以野生的羽芒菊为原 料，来源特别丰富，制备工艺较简单，经济、安全，得率高；制得的3个新黄酮化合物均具有 较强的抑菌活性、抗氧化活性和抗肿瘤作用，具有很好的开发利用价值，为今后的研究开发奠定了基础。本申请文件中涉及的百分含量，除另有说明外，固体物质为重量比，液体物质为体 积比。具体实施例方式现结合本专利技术的实施例和药理试验，对本专利技术作进一步说明。本专利技术所述的3个新黄酮化合物I、II、III，其制备方法包括以下步骤1)取干燥的羽芒菊全草粗粉10kg，每次用3倍量70 %的乙醇渗漉提取3次，滤过， 合并滤液；2)用真空薄膜浓缩装置进行减压浓缩至无醇味，得浓缩后的总浸膏0. 8kg ；3)将总浸膏加入适量水进行超声分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将 所得各部位萃取液进行减压浓缩得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位；4a)将所得乙酸乙酯部位取130g超声分散于水中，通过大孔吸附树脂Diaion HP-20 柱色谱，依次用 H20、10% MeOH,20% MeOH,40% MeOH,60% MeOH,70% Me2CO 洗脱； 其中Diaion柱的40% MeOH洗脱部分减压浓缩干燥后，溶于少量水后通过凝胶吸附树脂 Sephadex LH-20 柱色谱，以 H20、20% MeOH,40% MeOH,60% MeOH,70% Me2CO 洗脱，其中S印hadex LH-20柱的40% MeOH洗脱部位减压浓缩干燥后，溶于少量水后通 过160-200目硅胶柱色谱，以体积比6 2 1的乙酸乙酯-乙醇-水洗脱，得化合物I的 浅黄色粗品，经甲醇-水混合溶剂重结晶，得化合物I的浅黄色结晶1.68g。其中S印hadex LH-20柱的20% MeOH洗脱部位减压浓缩干燥后，溶于少量水后通 过160-200目硅胶柱色谱，以体积比7 2 2的乙酸乙酯-乙醇-水洗脱，得化合物II 的浅黄色无定型粉末1. 03g ；4b)将石油醚部位通过160-200目硅胶柱色谱，以体积比20 1-1 10的石油 醚-乙酸乙酯梯度洗脱，TLC检识，相同流份合并后得8个部分，其中以化合物III为主成 分的第4部分再通过硅胶柱色谱，然后再以体积比5 1的石油醚-乙酸乙酯进行洗脱，洗 脱液真空浓缩干燥得化合物III的浅黄色结晶0. 58g。上述步骤中MeOH表示甲醇、Me2CO表示丙酮。TLC检识是指薄层板为0. 5 % CMC-Na-硅胶GF254板，展开剂为乙酸乙酯-乙醇-水(7 2 3)，显色剂a 紫外灯(254nm) 下观察荧光；或显色剂b 2% FeCl3-2% K3Fe(CN)6喷洒，105°C烘烤2 5分钟。结构鉴定主要利用光谱技术，包括红外(IR)、高分辨电喷雾电离质谱 (HRESI-MS)、电喷雾电离质谱(ESI-MS)、核磁共振谱(1H-WRJ3C-WI^DEPIVH-1H COSY、 HSQC、HMBC)分析(表1-3)鉴定3个新黄酮化合物I、II、III的结构。化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为：８，３′－二羟基－３，７，４′－三甲氧基－６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖黄酮苷，具有（Ⅰ）所示结构式：　　＊＊＊　（Ⅰ）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：袁珂，徐润生，
申请(专利权)人：浙江林学院，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]