PRAME特异性T细胞受体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能够与包含氨基酸序列LYVDSLFFL的多肽或其部分或其HLA

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】2019；17:9)。PRAME缺失已在慢性淋巴细胞白血病中被报道，然而，这在功能上并不相关，因为该基因不在B细胞中表达，并且缺失是生理性免疫球蛋白轻链重排的结果。
[0006]考虑到2012年全球有约1410万新发癌症病例，并且目前癌症占全世界所有人类死亡的约14.6％，因此迫切需要新颖有效的治疗方案。
[0007]因此，本专利技术的技术问题是符合上述目的。该技术问题已通过如本文所述、实施例中说明和权利要求中定义的手段和方法解决。
[0008]本专利技术涉及一种T细胞受体(TCR)，其能够与以下结合
[0009]包含根据氨基酸序列LYVDSLFFL(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列或由其组成的多肽，其中不超过4个氨基酸被替换，或
[0010]所述多肽的部分，或
[0011]所述多肽或其部分的相应HLA
‑
A结合形式，
[0012]其中所述TCR包含：
[0013](A)CDR3，
[0014](Aa)具有包含与SEQ ID NO:12至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％相似或相同(优选相同)或优选100％相似或相同(优选相同)的氨基酸序列或由其组成的TCRα链，和/或
[0015](Ab)具有包含与SEQ ID NO:14至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％相似或相同或优选100％相似或相同(优选相同)的氨基酸序列或由其组成的TCRβ链，
[0016]或
[0017](B)CDR3，
[0018](Ba)具有包含与SEQ ID NO:40至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％相似或相同(优选相同)或优选100％相似或相同(优选相同)的氨基酸序列或由其组成的TCRα链，和/或
[0019](Bb)具有包含与SEQ ID NO:42至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％相似或相同或优选100％相似或相同(优选相同)的氨基酸序列或由其组成的TCRβ链。
[0020]正如在本专利技术的上下文中令人惊奇地发现的，PRAME肽的部分，即包含根据氨基酸序列LYVDSLFFL(SEQ ID NO:2；PRAME
301
‑
309
)的氨基酸序列或由其组成且其中不超过4个氨基酸被替换的多肽，由细胞通过人白细胞抗原A类(HLA
‑
A)呈递并被如本文所述和提供的TCR有效识别。包含本专利技术的TCR的细胞与所述多肽的结合导致显著的IFN
‑
gamma(IFN
‑
γ)分泌以及用本专利技术的TCR转导的T细胞对装载有此类多肽的细胞的有效杀伤。如本文进一步所述和提供的，包含根据氨基酸序列LYVDSLFFL(SEQ ID NO:2；PRAME
301
‑
309
)的氨基酸序列或由其组成且其中不超过4个氨基酸被替换的多肽在本文中也被称为“PRAME
L
‑
L
‑
肽”。
[0021]如本文所用，术语“T细胞受体”或“TCR”包括所有语法形式的天然TCR以及TCR变体、片段和构建体。因此，该术语包括包含TCRα和β链的异二聚体以及多聚体和单链构建体；任选地包含另外的结构域和/或部分。
[0022]根据本专利技术，在其天然形式下，TCR作为T细胞表面上几个蛋白质的复合体存在。T细胞受体由两条(独立的)蛋白质链组成，它们由独立的T细胞受体alpha和beta(TCRα和TCRβ)基因产生，分别称为alpha(α
‑
)和beta(β
‑
)链。TCR的每条链都具有一个N末端免疫球蛋白样(Ig)可变(V)结构域/区域、一个Ig恒定样(C)结构域/区域、将链锚定在质膜中的跨膜/跨
细胞膜区域和C末端的短细胞质尾部。
[0023]根据本专利技术，抗原特异性由α链和β链的可变区赋予。TCRα链和β链的可变结构域都包含三个高变或互补决定区(CDR1α/β、CDR2α/β和CDR3α/β)，其由框架(FR)区围绕。CDR3是抗原识别和特异性(即识别特定抗原并与之相互作用的能力)的主要决定区，而CDR1和CDR2主要与呈递抗原肽的MHC分子相互作用。
[0024]天然TCR识别与抗原呈递细胞表面的主要组织相容性复合体(MHC)分子结合(“在其上呈递/展示”)的抗原肽。在MHC分子上呈递的抗原肽在本文中也被称为“肽:MHC复合体”或“肽:HLA(
‑
A)复合体”。有两种不同类别的MHC分子：MHC I和MHC II，它们呈递来自不同细胞区室的肽。MHC I类分子在整个人体所有有核细胞的表面上表达，并将肽或蛋白质片段从细胞内区室展示给细胞毒性T细胞。在人类中，MHC也被称为人白细胞抗原(HLA)。MHC I类有主要三种类型：HLA
‑
A、HLA
‑
B和HLA
‑
C。一旦TCR与其特定的肽:MHC(例如，肽:HLA
‑
A)复合体结合，T细胞就会被激活并发挥生物效应功能。
[0025]在本专利技术的一个实施方案中，根据本专利技术描述和提供的TCR特异性结合它们的抗原靶标，即包含根据氨基酸序列LYVDSLFFL(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列或由其组成且其中不超过4个氨基酸被替换的多肽(PRAME
L
‑
L
‑
肽)，或所述多肽的部分，或所述多肽或其部分的相应HLA
‑
A结合形式。如本文所用的术语“特异性(地)结合”通常表示与随机的、无关的非靶标抗原相比，TCR通过其抗原结合位点更容易结合其预期的抗原靶标。抗原相互作用位点与其特异性抗原的特异性相互作用也可导致所述位点与抗原的简单结合。此外，抗原相互作用位点与其特异性抗原的特异性相互作用可替代地导致信号的启动，例如由于诱导抗原构象的变化、抗原的寡聚化等。通常，在本文中和根据本专利技术，如本文所用的“特异性结合”是指由高于10
‑5M或10
‑6M的半数最大IFN
‑
γ分泌(EC
50
)确定的功能亲和力。优选地，在本专利技术的上下文中，当结合亲和力为约10
‑
11
至10
‑8M(EC
50
)，优选约10
‑
11
至10
‑9M时，结合被认为是特异性的。
[0026]如本文所示，在本专利技术的上下文中描述和提供的TCR识别如本文所述和具体说明的PRAME
L
‑
L
‑
肽或其部分，特别是当通过HLA
‑
A分子(即以其各自的HLA
‑
A结合形式)呈递在细胞上时。当抗原肽与HLA
‑
A分子(其可以存在于抗原呈递细胞如树突细胞或肿瘤细胞的表面上，或者可以通过例如包被到本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种T细胞受体(TCR)，能够与以下结合：包含根据氨基酸序列LYVDSLFFL(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列的多肽，其中不超过4个氨基酸被替换，或所述多肽的部分，或所述多肽或其部分的相应HLA
‑
A结合形式，其中所述TCR包含：(A)CDR3，(Aa)具有包含与SEQ ID NO:12至少80％相似的氨基酸序列的TCRα链，和/或(Ab)具有包含与SEQ ID NO:14至少80％相似的氨基酸序列的TCRβ链，或(B)CDR3，(Ba)具有包含与SEQ ID NO:40至少80％相似的氨基酸序列的TCRα链，和/或(Bb)具有包含与SEQ ID NO:42至少80％相似的氨基酸序列的TCRβ链。2.根据权利要求1所述的TCR，其中包含根据(A)的CDR3的所述TCR还包含(Aa1)包含与SEQ ID NO:4的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRα链CDR1，和/或包含与SEQ ID NO:8的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRα链CDR2，和/或(Ab1)包含与SEQ ID NO:6的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRβ链CDR1，和/或包含与SEQ ID NO:10的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRβ链CDR2，或其中包含根据(B)的CDR3的所述TCR还包含(Ba1)包含与SEQ ID NO:32的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRα链CDR1，和/或包含与SEQ ID NO:36的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRα链CDR2，和/或(Bbl)包含与SEQ ID NO:34的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRβ链CDR1，和/或包含与SEQ ID NO:38的氨基酸序列至少80％相似的氨基酸序列的TCRβ链CDR2。3.根据权利要求1或2所述的TCR，其中所述HLA
‑
A是HLA
‑
A*24或HLA
‑
A*02编码的分子。4.根据前述权利要求中任一项所述的TCR，其中所述TCR与所述多肽或其部分或其HLA
‑
A结合形式的结合诱导包含所述TCR的细胞的IFN
‑
γ分泌。5.根据权利要求4所述的TCR，其中在与包含根据氨基酸序列LYVDSLFFL(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列且其中不超过4个氨基酸被替换的多肽、或所述多肽的部分、或所述多肽或其部分的相应HLA
‑
A结合形式结合之后，所述诱导包含所述TCR的细胞的IFN
‑
γ分泌与不包含所述TCR的对照细胞相比为至少5倍高。6.根据前述权利要求中任一项所述的TCR，其中包含根据(A)的CDR3的所述TCR包含(Aa2)TCRα链可变区，包含与SEQ ID NO:16至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:16的位置47至51至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:16的位置69至75至少80％相似的氨基酸序列，并且
包含与SEQ ID NO:16的位置109至123至少80％相似的氨基酸序列，和/或(Ab2)TCRβ链可变区，包含与SEQ ID NO:18至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:18的位置46至50至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:18的位置68至73至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:18的位置110至122至少80％相似的氨基酸序列，或者其中包含根据(B)的CDR3的所述TCR包含(Ba2)TCRα链可变区，包含与SEQ ID NO:44至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:44的位置45至49至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:44的位置67至73至少80％相似的氨基酸序列，并且包含与SEQ ID NO:44的位置10...

【专利技术属性】
技术研发人员：卡里娜，
申请(专利权)人：基因医疗免疫疗法有限责任公司，
类型：发明
国别省市：