PRAME制造技术

本发明专利技术涉及对

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PRAME特异性T细胞受体与嵌合共刺激受体的组合


[0001]本专利技术涉及对
PRAME
肽
SLLQHLIGL
具有特异性的
T
细胞受体
(TCR)
与嵌合共刺激受体的组合，所述嵌合共刺激受体包含源自
PD
‑
1(CD279)
的胞外结构域和源自4‑
1BB(CD137)
的胞内结构域
。
特别地，本专利技术涉及包含所述
TCR
和嵌合共刺激蛋白的细胞
。
此外，本专利技术涉及编码
TCR
和共刺激受体的核酸
、
相应的载体和相应的核酸组合物
。
此外，本专利技术涉及相应的药物组合物
。
因此，本专利技术还涉及用作药物的细胞和核酸构建体，特别是涉及用于治疗癌症的
TCR。

技术介绍

[0002]PRAME
是在多种肿瘤，优选黑色素瘤中表达的肿瘤相关抗原
。
此外，
PRAME
已被描述为转移
(
例如葡萄膜黑色素瘤
)
的独立生物标志物
(Fiedl
等人
,Clin Cancer Res 2016March
；
22(5):1234
‑
1242)
和
DLBCL
的预后标志物
(Mitsuhashi
等人
>,Hematology 2014,1/2014)。
除睾丸外，它不在正常组织中表达
。
这种表达模式类似于其他癌症睾丸
(CT)
抗原，例如
MAGE、BAGE
和
GAGE。
然而，与这些其它
CT
抗原不同，该基因也在急性白血病中表达
。
编码的蛋白质充当视黄酸受体的阻遏物，并可能通过此功能赋予癌细胞生长优势
。
选择性剪接导致多种转录变体
。
还发现三阴性乳腺癌中的
PRAME
过表达通过诱导上皮间质转化来促进癌细胞运动
(Al
‑
Khadairi
等人
,Journal of Translational Medicine 2019
；
17:9)。
已经在慢性淋巴细胞白血病中报道了
PRAME
缺失，然而，这与功能无关，因为该基因不在
B
细胞中表达，并且缺失是生理性免疫球蛋白轻链重排的结果
。
根据所描述的
CT
抗原
PRAME
的特征，它构成了使用
TCR
导向的基于细胞的免疫疗法治疗不同类型癌症的合适靶标
。
为此，需要对抗原具有高特异性的
TCR
，其使细胞产物能够发挥肿瘤清除所需的效应功能，包括细胞因子的释放
、
细胞毒性和增殖
。
[0003]利用
TCR
修饰的
T
细胞的免疫疗法的成功不仅取决于靶抗原的选择，还取决于具有高抗原特异性和敏感性的
TCR
的选择
。
另一个挑战
(
特别是在实体瘤的治疗中
)
是免疫抑制性肿瘤微环境
(TME)
，它会对
TCR
修饰的
T
细胞的功效
、
适应性和持久性产生负面影响
。
除了抑制性细胞因子和必需代谢因子的缺乏之外，
T
细胞还面临
TME
中的抑制性检查点
PD
‑
1/PD
‑
L1
轴，这会减少
T
细胞浸润并导致其衰竭
。
因此，需要新的策略来使
TCR
修饰的
T
细胞具有克服抑制性免疫抑制肿瘤微环境的特性
。
更具体地，需要具有高特异性并具有增强的增殖
、
细胞因子释放和细胞毒性的靶向
PRAME
的
TCR
修饰的
T
细胞
。

技术实现思路

[0004]为了满足这些需要，本专利技术提供了本专利技术的高亲合力
TCR
和嵌合共刺激受体的组合，其允许产生具有增强的细胞因子释放
、
增殖和细胞毒性的靶向
PRAME
的高度特异性
T
细胞
。
[0005]因此，本专利技术的一个目的是提供一种细胞，包含
[0006](A)PRAME
特异性
T
细胞受体
(TCR)
，包含
[0007]‑
TCR
α
链，所述
TCR
α
链包含具有
SEQ ID NO:2
的氨基酸序列的
CDR1、
具有
SEQ ID NO:3
的氨基酸序列的
CDR2
和具有
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR3
，和
[0008]‑
TCR
β
链，所述
TCR
β
链包含具有
SEQ ID NO:5
的氨基酸序列的
CDR1、
具有
SEQ ID NO:6
的氨基酸序列的
CDR2
和具有
SEQ ID NO:7
的氨基酸序列的
CDR3
；和
[0009](B)
嵌合共刺激受体，包含
[0010]‑
含有源自
PD
‑1的多肽的胞外结构域，
[0011]‑
跨膜结构域，和
[0012]‑
含有源自4‑
1BB
的多肽的胞内结构域
。
[0013]所使用的
PRAME
特异性
TCR
能够结合具有氨基酸序列
SLLQHLIGL(SEQ ID NO:1)
或其部分或其
HLA
‑
A2
结合形式的
PRAME
肽
。
它提供了高功能亲合力和有利的肿瘤细胞识别和杀伤特性
。
特别地，本专利技术的
TCR
比现有技术公开的
TCR
具有更高的功能亲合力，最好地识别所测试的肿瘤细胞系，并且更有效地裂解
PRAME
阳性肿瘤细胞
。
共刺激受体逆转抑制性检查点轴
PD
‑
1/PD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种细胞，包含
(A)PRAME
特异性
T
细胞受体
(TCR)
，包含
‑
TCR
α
链，所述
TCR
α
链包含具有
SEQ ID NO:2
的氨基酸序列的
CDR1、
具有
SEQ ID NO:3
的氨基酸序列的
CDR2
和具有
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR3
，和
‑
TCR
β
链，所述
TCR
β
链包含具有
SEQ ID NO:5
的氨基酸序列的
CDR1、
具有
SEQ ID NO:6
的氨基酸序列的
CDR2
和具有
SEQ ID NO:7
的氨基酸序列的
CDR3
；和
(B)
嵌合共刺激受体，包含
‑
含有源自
PD
‑1的胞外结构域的胞外结构域，
‑
跨膜结构域，和
‑
含有源自4‑
1BB
的胞内结构域的胞内结构域
。2.
根据权利要求1所述的细胞，其中所述
TCR
能够结合具有氨基酸序列
SLLQHLIGL(SEQ ID NO:1)
或其部分或其
HLA
‑
A2
结合形式的
PRAME
肽
。3.
根据权利要求2所述的细胞，其中所述
HLA
‑
A2
是
HLA
‑
A*02:01、HLA
‑
A*02:02、HLA
‑
A*02:04
或
HLA
‑
A*02:09
编码的分子
。4.
根据前述权利要求中任一项所述的细胞，其中所述
TCR
包含具有与
SEQ ID NO:8
相同或至少
80
％相同的氨基酸序列的可变
TCR
α
区和具有与
SEQ ID NO:9
相同或至少
80
％相同的氨基酸序列的可变
TCR
β
区
。5.
根据前述权利要求中任一项所述的细胞，其中所述
TCR
包含，具有
SEQ ID NO:10
的氨基酸序列的恒定
TCR
α
区和具有
SEQ ID NO:11
的氨基酸序列的恒定...

【专利技术属性】
技术研发人员：纳德加，
申请(专利权)人：基因医疗免疫疗法有限责任公司，
类型：发明
国别省市：