【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于制备生物汽油的工程大肠杆菌。本专利技术还涉及利用上述工程大肠杆菌制备生物汽油的方法。
技术介绍
随着石油资源的日益减少和环境污染的日益加剧，生物液体燃料作为一种清洁的 可再生能源，正受到世界各个国家的关注和重视。目前发展比较成熟的生物液体燃料包括 生物乙醇和生物柴油(脂肪酸甲酯)，但乙醇的能量密度低，易吸水，不方便储存和运输， 而生物柴油的黏度较大，容易凝固，会导致柴油机过滤器容易堵塞以及低温启动性能不佳 (Atsumi etal.，2008 ；李春梅等，2008)。因此，有必要发展生物丁醇和生物汽油等新一代 生物液体燃料以克服现有生物液体燃料的不足。生物汽油和化石汽油的组成成分相同，均 为C8-C12的烷烃，因此利用生物汽油替代化石汽油不存在任何技术障碍。所生产的烷烃分 泌到菌体细胞外，可以直接从培养液中萃取获得，简化了分离工艺，可以有效地降低生产成 本。利用大肠杆菌生产生物汽油的主要技术路线是将大肠杆菌产生的脂肪酸逐步还 原为烷烃。大肠杆菌具有遗传背景清楚，生长速度快，可实现高密度培养的优点，因此可以 很好的用于代谢产物的生产。烷烃生产...
【技术保护点】
一种用于制备生物汽油的工程大肠杆菌，通过下述方法得到 通过聚合酶链式反应扩增乙酰－ＣｏＡ羧化酶基因、硫脂酶基因、脂酰－ＣｏＡ还原酶基因和脂肪醛脱羧酶基因，用胶回收试剂盒回收目的片段，然后分别双酶切目的片段和原核表达载体ｐＥＴ－３０ａ（＋）或ｐＡＣＹＣＤｕｅｔ－１，载体片断胶回收后，将载体∶基因片段按摩尔比为１－２∶４－５的比例混合，加入Ｔ４ＤＮＡ连接酶后４－７℃连接１５－３０小时，连接产物３８－４２℃热击转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α感受态细胞，涂布平板培养过夜，ＰＣＲ筛选阳性克隆；阳性克隆提取质粒ＤＮＡ，酶切和测序鉴定后，热击转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３），最后敲除该工...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：咸漠，杨建明，郑艳宁，刘炜，徐鑫，
申请(专利权)人：青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：95
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