【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种微生物体内合成生物柴油的方法，主要步骤为：Ａ）分别将不动杆菌蜡脂合成酶基因ａｔｆＡ、大肠杆菌脂酰辅酶Ａ合成酶基因ｆａｄＤ、运动发酵单胞菌的丙酮酸脱羧酶基因ｐｄｃ和乙醇脱氢酶基因ａｄｈＢ四个基因克隆到表达载体ｐＥＴ２８ｂ上，基因的两端分别带上ＮｄｅＩ和ＳｐｅＩ酶切位点，使上述四个基因都置于Ｔ↓［７］启动子下游，由Ｔ↓［７］启动子驱动表达；Ｂ）通过ＳｐｅＩ和ＸｂａＩ是同尾酶这一特点，将ｆａｄＤ基因插入到ａｔｆＡ基因片段后的ＳｐｅＩ位点得到质粒ｐＸＴ９，将ａｄｈＢ基因插入到ｐｄｃ基因片段后的ＳｐｅＩ位点得到质粒ｐＸＴ１０；再将ｐｄｃ＋ａｄｈＢ基因片度插入到ａｔｆＡ＋ｆａｄＤ基因片段后的ＳｐｅＩ位点得到四个基因共表达的质粒ｐＸＴ１１；Ｃ）将ｐＸＴ１１转入到含有质粒ｐＭＳＤ８和ｐＭＳＤ１５的大肠杆菌菌株得到大肠杆菌菌株ＸＴ３１；Ｄ）大肠杆菌菌株ＸＴ３１经过ＩＰＴＧ和阿拉伯糖诱导产生生物柴油。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吕雪峰，谈晓明，段仰凯，蔡轲，朱至，
申请(专利权)人：青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：95
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