与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段及其应用，涉及抗体技术领域。该与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区和/或重链可变区；轻链可变区具有由氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、2和3所示，或分别如SEQ ID NO:11、12和13所示的CDR

【技术实现步骤摘要】
与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段及其应用


[0001]本专利技术涉及抗体
，尤其是涉及一种与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段及其应用。

技术介绍

[0002]人乳头状瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)是一种无包膜的小DNA病毒，目前约有200多种，HPV主要感染皮肤和粘膜组织，其中有40多种HPV感染可以导致人类疾病，根据HPV感染与癌症发生的关系，HPV可以分为高危型和低危型，其中HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58及59等为高危型，高危型HPV持续性感染可引发宫颈癌、肛门癌和阴道癌等恶性肿瘤。世界范围内，宫颈癌在女性高发恶性肿瘤中排名第三，全球每年约有60万女性新发宫颈癌，超过30万的女性死于宫颈癌。其他的HPV亚型都属于低危型，主要引起皮肤黏膜的疣状增生，表现为尖锐湿疣、扁平疣等良性病变，目前在临床上还没有很好的治疗方法。流行病学调查及临床研究表明，生殖器尖锐湿疣组织中以HPV 6和HPV 11型检出率最高，统计显示HPV 6和HPV 11感染引起生殖器疣与复发性呼吸道乳头瘤病的比率超过90％。
[0003]预防HPV感染最有效的方法是接种HPV疫苗，目前国内外已上市的5个宫颈癌疫苗均以HPV主要衣壳蛋白L1为有效抗原，通过基因重组技术在一定条件下组装为病毒样颗粒(Virus
‑
like particles，VLPs)，再辅以不同的佐剂配制成疫苗。基于重组HPV L1 VLPs疫苗的成功上市及广泛应用，充分表明了L1 VLPs高度还原了天然HPV的结构，保留了天然病毒的关键中和表位，具有与野生同型病毒相同或相似的抗原性和免疫原性，可诱导高滴度的中和抗体，进而很好地预防HPV持续感染、宫颈癌及其他相关疾病。目前已上市的HPV疫苗，Merck公司的四价疫苗“Gardasil”和九价疫苗“Gardasil 9”以及国内外研制的超过二价次的HPV疫苗多数包含HPV 6型的疫苗成分。
[0004]在HPV疫苗生产的全程，保持正确的中和表位和稳定的VLPs结构，是保证疫苗质量和有效性的前提。在疫苗生产工艺的各个环节建立准确、灵敏、特异的检测方法对抗原结构和定量进行全程监控既是技术的需要，也是法规的指导原则。利用经典的抗原抗体反应原理，采用中和抗体对抗原中和表位进行鉴定是疫苗质控的有效手段，通过Western
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blot、ELISA和IVRP等检测方法对HPV疫苗原液、半成品及成品中的抗原成分进行鉴别实验、抗原含量检测、抗原体外效力测定，可为疫苗的检测放行提供依据。因此单克隆中和抗体作为是疫苗抗原质控的重要反应试剂，并且同时具有特异性和中和活性的单克隆抗体在疫苗质控过程中具有不可替代的作用。另外，疫苗效力检测是疫苗成品放行的重要指标，目前HPV疫苗效力是通过疫苗免疫动物后采集血清，采用假病毒中和实验来检测血清的中和效价来进行评价，虽然该方法能够较好地反映疫苗成品的中和抗体水平，但也同时存在着动物用量较多，检测值波动较大，检测周期长，成本较高的缺点，同时也违背动物实验的“3R”(减少、替代和优化)原则，国内外一些企业已在响应国际组织的倡导，在逐渐淘汰动物实验检测疫苗成品效力的方法。目前已被认同和用于部分实践的，基于中和抗体针对疫苗抗原的中和表位和体外活性的质控和表征，已经是一种高效、经济和可行的替代方法，例如美国默克公
司的HPV疫苗、国内的甲肝和乙肝疫苗，都已经部分或全部使用中和抗体而非动物实验放行疫苗产品。
[0005]目前关于HPV11型中和活性单克隆抗体相对于其他高危型别HPV抗体研究报道较少，国外已有质量可靠的抗体，但是由于自主知识权利的限制，国内厂商很难获得和大量制备，这对于开发国产多价HPV疫苗带来较大壁垒，因此开发出HPV11型中和活性单克隆抗体用于HPV疫苗开发和生产具有重要意义。
[0006]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0007]本专利技术的第一目的在于提供一种与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段，所述与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段只与HPV11型抗原特异反应，具有良好的特异性和中和活性，缓解了现有技术中缺乏HPV11型中和活性抗体或其抗原结合片段的问题。
[0008]本专利技术的第二目的在于提供一种能够编码或产生上述种与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段的生物材料或杂交瘤细胞株。
[0009]本专利技术的第三目的在于提供一种上述与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段、上述生物材料或上述杂交瘤细胞株的应用。
[0010]为解决上述技术问题，本专利技术特采用如下技术方案：
[0011]根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包含轻链可变区和/或重链可变区；
[0012]所述轻链可变区具有由CDR
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L1、CDR
‑
L2、CDR
‑
L3组成的轻链CDR，所述CDR
‑
L1、CDR
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L2、CDR
‑
L3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、2和3所示，或者分别如SEQ ID NO:11、12和13所示；
[0013]所述重链可变区具有由CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3组成的重链CDR，所述CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、5和6所示，或者分别如SEQ ID NO:14、15和16所示。
[0014]根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了一种生物材料，所述生物材料包括核酸片段、载体或宿主细胞；
[0015]所述核酸片段选自(a1)或(a2)：
[0016](a1)、DNA或RNA，其编码上述与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段；
[0017](a2)、与(a1)中定义的核酸片段互补的核酸片段；
[0018]所述载体包括所述核酸片段；
[0019]所述宿主细胞被所述载体转化。
[0020]根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株1F9或杂交瘤细胞株1B5；
[0021]所述杂交瘤细胞株1F9的保藏编号为：CGMCC No.45155；
[0022]所述杂交瘤细胞株1B5的保藏编号为：CGMCC No.45156。
[0023]根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了一种用于检测11型HPV L1抗原的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包含所述的与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段。
[0024]根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了所述的与11型HPV结合的抗体或其抗
原结合片段，所述的生物材料，所述的杂交瘤细胞株或用于检测11型HPV的试剂或试本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.与11型HPV结合的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包含轻链可变区和/或重链可变区；所述轻链可变区具有由CDR
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L1、CDR
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L2、CDR
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L3组成的轻链CDR，所述CDR
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L1、CDR
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L2、CDR
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L3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、2和3所示，或者分别如SEQ ID NO:11、12和13所示；所述重链可变区具有由CDR
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H1、CDR
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H2、CDR
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H3组成的重链CDR，所述CDR
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H1、CDR
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H2、CDR
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H3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、5和6所示，或者分别如SEQ ID NO:14、15和16所示。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:17所示；和/或，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:19所示。3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包含轻链可变区和重链可变区；组成轻链可变区轻链CDR的CDR
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L1、CDR
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L2、CDR
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L3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、2和3所示；且组成重链可变区重链CDR的CDR
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H1、CDR
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H2、CDR
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H3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、5和6所示；或者，组成轻链可变区轻链CDR的CDR
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L1、CDR
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L2、CDR
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L3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:11、12和13所示；且组成重链可变区重链CDR的CDR
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H1、CDR
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H2、CDR
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H3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:14、15和16...

【专利技术属性】
技术研发人员：阮宝阳，曹玉锋，严嘉成，朱俊郦，任柳铭，王新峰，薛韦良，刘林，张建城，李志浩，史力，
申请(专利权)人：怡道生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：