一种高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法技术

本发明专利技术一种高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法，包括非瘟病毒种毒的制取、一免抗原的制取、二免抗原的制取，异源动物血清的制取。非瘟病毒种毒的制取：在无菌条件下取因患猪非瘟病死亡的猪内脏(包括心、肝、脾、肺、脑)，放入组织捣碎机中捣碎。一免抗原的制取；将所述方法制取的非瘟病毒种毒，放入浓度为0.8％的生理盐水中稀释100倍，形成非瘟病毒种毒稀释液。二免抗原的制取，取一免抗原的制取方法中经接种非瘟病毒种毒后死亡的猪胚体放入组织捣碎机中捣碎，按总重量为100计算，取占总重量为10

【技术实现步骤摘要】
一种高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法


[0001]本专利技术一种动物血清的制备方法领域。涉及一种高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法。

技术介绍

[0002]猪非瘟是由病毒引起的急烈性传染病所致，涉及面广、发病率高、死亡率均在90％以上，给饲养猪禽的单位或个人带来极大的经济损失，同时，由于对病亡的猪禽处理不当，往往造成病毒的漫延，产生更大的恶果。目前，社会上尚未发现一种高产高效专用于治疗猪非瘟的特效药物，这是猪禽饲养单位或个人最感头痛的事。

技术实现思路

[0003]1、本专利技术一种高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法。
[0004]2、本专利技术抗非瘟异源动物血清的制备方法包括：非瘟病毒种毒的制取一免抗原的制取、二免抗原的制取、异源动物血清的制取，其具体制备方法为。
[0005]具体实施过程
[0006]a、非瘟病毒种毒的制取：
[0007]1、在无菌条件下取因患猪非瘟病死亡的猪内脏(包括心、肝、脾、肺、脑)，放入组织捣碎机中捣碎；
[0008]2、按总重量为1 00计算，取占总量为10
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20％的被捣碎的猪组织与占总重量为80
‑
90％的浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混合组织悬液；
[0009]3、将混合组织悬液放入离心机中，在4 000转/分条件下离心20
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40分钟后取其上清液；
[0010]4、在其上清液中，按每毫升上清液各加入2 000单位青霉素和2 0 00单位链霉素的配比加入青霉素和链霉素后即形成非瘟病毒种毒，并将其放入冰箱中在
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4℃条件下储藏备用；
[0011]b、一免抗原的制取
[0012]将a中所述方法制取的非瘟病毒种毒，放入浓度为0.8％的生理盐水中稀释1 00倍，形成非瘟病毒种毒稀释液，用0.1毫升剂量的非瘟病毒种毒稀释液接种于9
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12日龄的猪胚尿囊中，接种后选取在48
‑
1 20小时之间具有出血、水肿等特征死亡的猪胚，取其尿囊液，在每毫升尿囊液中各加入2000单位的毒霉素和2 000单位的链霉素后即形成为一免猪非瘟抗原，并将其放入冰箱中在
‑
4℃条件下储藏备用。
[0013]c、二免抗原的制取取一免抗原的制取方法中经接种非瘟病毒种毒后死亡的猪胚体放入组织捣碎机中捣碎，按总重量为100计算，取占总重量为10
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20％的被捣碎的猪胚体组织与占总重量为80
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90％的浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混合组织悬液将混合组织悬液放入离心机中，在4 000转/分条件下离心20
‑
40分钟后取其上清液，在其上清液中按每毫升上清液各加入2 000单位青霉素和2 000单位链霉素的配比加入青霉素和链霉素，并按
总重量的0.4％的配比加入福尔马林液做成灭活苗，即成为二免猪非瘟抗原，并在室温下保存备用。
[0014]d、异源动物血清的制取异源动物高免血清的制取选健康无病的异源动物(如马、牛、猪、羊、兔等)，按所选异源动物体重每10公斤在其颈部、腹部两侧多点(5
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10点)皮下注射一免猪非瘟抗原1毫升，7天后进行二免，即对一免后的异源动物，按其体重每10公斤在其皮下多点(5
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10点)各注射1毫升二免猪非瘟抗原，再经7天后进行三免即对二免后的异源动物，按其体重每10公斤在颈、腹部多点(5
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10点)注射3.5毫升一免猪非瘟抗原。三免注射后每隔5天采血一次，进行抗体效价检测，30天后当抗体效价在1∶16
‑
1∶128范围时，对该异源动物在无菌条件下进行采血，将被采集的血放入无菌容器中进行自然分离后吸取其血清，在其血清中按每毫升血清加入2 000单位青霉素和2 000单位链霉素后，再按其总重量的1/1 0000量加入硫柳汞后即成为高免血清，对其高免血清分装、封口，并置于
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18℃条件下保存。。
[0015]以下将根据实施例对本专利技术高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法作进一步说明：
[0016]实施例1
[0017]在无菌条件下取因患猪非瘟病死亡的猪内脏(包括心、肝、脾、肺、脑)放入组织捣碎机中捣碎，取占总重量的10％的被捣碎的猪组织，占总重量的90％浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混合组织悬液，并将其放入离心机中在4 000转/分条件下离心20分钟，取其上清液，在上清液中按每毫升上清液各加入2 000单位青霉素和2 000单位链霉素后即形成非瘟病毒种毒。将非瘟病毒种毒放入浓度为0.8％的生理盐水中稀释100倍，形成非瘟病毒种毒稀释液，用0.1毫升剂量的非瘟病毒稀释液接种于9日龄的猪胚尿囊中，接种后选取在48小时出血、水肿等特征死亡的猪胚，取其尿囊液，在每毫升尿囊液中各加入2 000单位的青霉素和2 000单位的链霉素，即形成一免猪非瘟抗原。取接种非瘟病毒种毒后死亡的猪胚体放入组织捣碎机中捣碎，取占总量为10％的被捣碎的猪胚体组织与占总量为90％浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混合组织悬液，并将其放入离心机中，在4000转/分条件下离心20分钟后，取其上清液，在其上清液中按每毫升各加入2000单位青霉素和2000单位链霉素，并按总量的0.4％的配比加入福尔马林液做成灭活苗、即成为二免猪非瘟抗原。
[0018]选健康无病的猪，按其体重每10公斤在其腹部两侧5点皮下注射一免非瘟病毒1毫升，7天后对其按体重每10公斤在皮下5点各注射二免非瘟病毒1毫升，再经7天后对其体重每10公斤在皮下5点注射一免猪非瘟抗原3.5毫升，注射后每隔5天采血一次进行抗体效价检测，30天后当抗体效价在1∶16时，对该异源动物在无菌条件下采血，将被采集的血放入无菌容器中实行自然分离后吸取其血清，在血清中按每毫升血清加入2 000单位青霉素和2000单位链霉素后再按其总重量的1/1 0000量加入硫柳汞后即为本专利技术所述的高免血清。
[0019]实施例2
[0020]在无菌条件下取因患猪非瘟病死亡的猪内脏(包括心、肝、脾、肺、脑)放入组织捣碎机中捣碎，取占总重量的15％的被捣碎的猪组织，占总重量的85％浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混合组织悬液，并将其放入离心机中在4000转/分条件下离心30分钟，取其上清液，在上清液中按每毫升上清液各加入2 000单位青霉素和2 000单位链霉素后即形成非瘟病毒种毒。将非瘟病毒种毒放入浓度为0.8％的生理盐水中稀释100倍，形成非瘟病毒种
毒稀释液，用0.1毫升剂量的非瘟病毒稀释液接种于11日龄的猪胚尿囊中，接种后选取在80小时出血、水肿等特征死亡的猪胚，取其尿囊液，在每毫升尿囊液中各加入2 000单位的青霉素和2000单位的链霉素，即形成一免猪非瘟抗原。取接种非瘟病毒种毒死亡的猪胚体放入组织捣碎机中捣碎，取占总量为15％的被捣碎的猪胚体组织与占总量为85％浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产高效抗非瘟异源动物高免血清的制备方法，其特点在于本发明是a、非瘟病毒种毒的制取：(1)在无菌条件下取因患猪非瘟病死亡的猪内脏(包括心、肝、脾、肺、脑)，放入组织捣碎机中捣碎；(2)按总重量为100计算，取占总量为10
‑
20％的被捣碎的猪组织与占总重量为80
‑
90％的浓度为0.8％的生理盐水混合，形成混合组织悬液；(3)将混合组织悬液放入离心机中，在4000转/分条件下离心20
‑
40分钟后取其上清液；(4)在其上清液中，按每毫升上清液各加入2000单位青霉素和2000单位链霉素的配比加入青霉素和链霉素后即形成非瘟病毒种毒，并将其放入冰箱中在
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4℃条件下储藏备用。一免抗原的制取；将a中所述方法制取的非瘟病毒种毒，放入浓度为0.8％的生理盐水中稀释100倍，形成非瘟病毒种毒稀释液，用0.1毫升剂量的非瘟病毒种毒稀释液接种于9
‑
12日龄的猪胚尿囊中接种后选取在48
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120小时之间具有出血、水肿等特征死亡的猪胚，取其尿囊液，在每毫升尿囊液中各加入2000单位的毒霉素和2000单位的链霉素后即形成为一免猪非瘟抗原并将其放入冰箱中在
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4℃条件下储藏备用；二免抗原的制取取一免抗原的制取方法中经接种非瘟病毒种毒后死亡的猪胚体放入组织捣碎机中捣碎，按总重量为100计算，取占总重量为10
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20％的被捣碎的猪胚体组织与占总重量为80
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90％的浓度为0.8％的生理盐水...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁之铨，杨金龙，刘侠，
申请(专利权)人：杨金龙刘侠，
类型：发明
国别省市：