一种抗HBeAg抗体及其应用制造技术

本发明专利技术属于抗体技术领域。具体而言，涉及一种抗HBeAg抗体及其应用。本发明专利技术提供的抗HBeAg抗体对HBeAg的亲和力高，能够特异性结合HBeAg，且其结合活性显著高于对照抗体，成本低、稳定性高，在检测/诊断HBV感染、制备检测/诊断HBV感染的试剂/试剂盒中的应用前景广泛。诊断HBV感染的试剂/试剂盒中的应用前景广泛。

【技术实现步骤摘要】
一种抗HBeAg抗体及其应用


[0001]本专利技术属于抗体
更具体地，涉及一种抗HBeAg抗体及其应用。

技术介绍

[0002]乙肝病毒(HBV)感染是全球肝病的主要原因之一，目前有超过20亿的人感染了乙肝病毒。这种疟疾在很大程度上是通过接触含有病毒的体液传播，包括无保护措施的性接触、输血、受污染针头和注射器的重复使用，分娩期间母婴传播等。乙肝是严重危害人类健康的重大传染病，我国是乙肝感染大国。慢性乙型肝炎是指由乙型肝炎病毒持续感染引起的肝脏慢性炎症性疾病，慢性乙型肝炎至今仍缺乏有效的控制手段和彻底解决方案，HBV与肝细胞及免疫细胞之间相互作用的分子机制研究进展相对滞后，是严重影响新型治疗方法和药物研发的重要原因之一。
[0003]乙肝e抗原(HBV e antigen，HBeAg)为HBV感染的病毒学标志物被广泛应用于临床，具有重要的临床价值。HBeAg不是病毒体的必要结构成分，并且它似乎也不参与病毒复制周期。HBeAg在围产期感染HBV后的慢性化过程中发挥了重要作用，HBeAg阳性母亲的新生儿，在围产期感染HBV后，往往会出现慢性HBV感染。HBeAg消失而HBeAb出现的转换过程，通常情况下(除外前C/C基因变异所致)意味着病毒复制水平的降低和肝脏炎症活动程度的减弱；因此，国内外学者一直都将HBeAg血清学转换作为评价抗病毒治疗疗效的重要指标之一。
[0004]HBeAg的检测方法有很多，主要是基于抗原
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抗体反应的夹心方法。该方法具有成本低、操作简单、适用于大规模筛选等优点，是目前最为常用的检测方法。近年来，相继有新的检测方法与技术问世，包括微粒子酶免疫分析、化学发光免疫分析和时间分辨荧光免疫测定法等方法，这些方法均是在原始的双抗体夹心法的基础上进行了优化和升级。这些方法大多主要是基于抗原和抗体特异性的结合反应，总体而言，特异性好且敏感性高的单克隆抗体始终是各种方法与技术发展的基础与前提。
[0005]目前检测HBeAg的抗体来源少，亲和力、灵敏度和特异性等性能都存在缺陷。因此，亟需性能更优、效果更好的检测HBeAg的抗体。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是克服现有检测HBeAg的抗体性能不好的缺陷和不足，提供一种抗HBeAg抗体及其应用。
[0007]本专利技术的目的是提供抗HBeAg抗体或其抗原结合片段，所述抗体含有以下重链互补决定区HCDRs：
[0008]氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的HCDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的HCDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的HCDR3。
[0009]本专利技术另一目的是提供所述抗HBeAg抗体或其抗原结合片段相关的核酸、载体或细胞。
[0010]本专利技术还提供了所述抗HBeAg抗体或其抗原结合片段，及其相关的核酸、载体或细胞在制备用于检测/诊断HBV感染的试剂/试剂盒中的应用。
[0011]本专利技术还提供了一种用于检测/诊断HBV感染的试剂/试剂盒，含有所述抗体或其抗原结合片段、所述核酸、所述载体或所述细胞。
[0012]本专利技术还提供了一种检测HBeAg的方法，将所述抗体或其抗原结合片段与待测样本接触。
附图说明
[0013]图1是4E6RMb1抗体的还原性SDS
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PAGE结果。
具体实施方式
[0014]以下结合具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。
[0015]除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
[0016]本专利技术涉及一种抗HBeAg抗体或其抗原结合片段，所述抗体含有以下重链互补决定区HCDRs：
[0017]氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的HCDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的HCDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的HCDR3。
[0018]在一些实施方式中，所述抗体还含有以下轻链互补决定区LCDRs：
[0019]氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的LCDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的LCDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的LCDR3。
[0020]本专利技术所述抗体或其抗原结合片段对HBeAg的亲和力高、结合活性高(其活性显著高于对照抗体)，稳定性高，能够广泛应用于检测/诊断HBV感染。
[0021]在本专利技术中，术语“抗体”在最广义上使用，其可以包括全长单克隆抗体，双特异性或多特异性抗体，以及嵌合抗体，只要它们展示所需的生物学活性。术语“抗原结合片段”是包含抗体CDR的一部分或全部的物质，其缺乏至少一些存在于全长链中的氨基酸但仍能够特异性结合至抗原。此类片段具生物活性，因为其结合至抗原，且可与其他抗原结合分子(包括完整抗体)竞争结合至给定表位。此类片段选自Fab(由完整的轻链和Fd构成)，Fv(由VH和VL构成)，ScFv(单链抗体，VH和VL之间由一连接肽连接而成)或单域抗体(仅由VH组成)。此类片段可通过重组核酸技术产生，或可通过抗原结合分子(包括完整抗体)的酶裂解或化学裂解产生。在本专利技术具体实施方式中，4E6RMb1抗体能够特异性结合HBeAg，且对HBeAg具有很好的结合活性和亲和力。
[0022]在本专利技术中，术语“互补性决定区”、“CDR”或“CDRs”是指免疫球蛋白的重链和轻链的高度可变区，指包含一种或多种或者甚至全部的对抗体或其抗原结合片段与其识别的抗原或表位的结合亲和力起作用的主要氨基酸残基的区域。重链互补决定区用HCDR表示，其包括HCDR1、HCDR2和HCDR1；轻链互补决定区用LCDR表示，其包括LCDR1、LCDR2和LCDR1。本领域常用的CDR标示方法包括：Kabat编号方案、Chothia和Lesk编号方案以及1997年Lefranc等人为免疫球蛋白超家族的所有蛋白质序列引入的新的标准化编号系统。Kabat等人是第一个为免疫球蛋白可变区提出标准化编号方案的人。在过去的几十年中，序列的积累导致
了KABATMAN数据库的创建，Kabat编号方案通常被认为是编号抗体残基广泛采用的标准。本专利技术采用Kabat注释标准标示CDR区，但其他方法标示的CDR区也属于本专利技术的保护范围。在本专利技术具体实施方式中，CDRs是指4E6RMb1抗体的重链和轻链的高度可变区。
[0023]在一些实施方式中，所述抗体还含有重链可变区和轻链可变区的至少之一；所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。
[0024]在一些实施方式中，所述抗体还含有重链恒定区和轻链恒定区；所述重链恒定区为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgD、IgE或IgM中的任一种或几种，所述轻链恒定区为κ链或λ链。
[0025]在一些实施方式中，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗HBeAg抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体含有以下重链互补决定区HCDRs：氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的HCDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的HCDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的HCDR3。2.根据权利要求1所述抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体还含有以下轻链互补决定区LCDRs：氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的LCDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的LCDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的LCDR3。3.根据权利要求1所述抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体还含有重链可变区和轻链可变区的至少之一；所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。4.根据权利要求1所述抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体还含有重链恒定区和轻链恒定区；所述重链恒定区为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgD、IgE或IgM中的任一种或几种，所述轻链恒定区为κ链或λ链；所述重链恒定区和轻链恒定区的种属来源为牛、马、乳牛、猪、绵羊、山羊、大鼠、小鼠、狗...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟媛，钟冬梅，周俊，张嘉欣，熊俊文，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：