免疫调节组合物及其用途制造技术

提供了包含来自人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)的纤维蛋白原相关结构域(FRED)的嵌合分子。还提供了包含所述嵌合分子的免疫调节药物组合物，以及通过施用所述嵌合分子或免疫调节药物组合物来减轻受试者的炎症和治疗自身免疫性疾病的方法。免疫性疾病的方法。免疫性疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫调节组合物及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年3月31日提交的美国临时专利申请号63/002,467的优先权权益，其内容通过引用以其整体并入本文。
专利

[0003]本专利技术属于免疫调节领域。
[0004]专利技术背景
[0005]纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)，也称为纤维介素或凝血酶原酶，因为它与纤维蛋白原β和γ链同源，是纤维蛋白原超家族(纤维蛋白原相关结构域，FRED)的成员。FGL2有两种结构不同的形式：膜结合的FGL2(mFGL2)和可溶性FGL2(sFGL2)。mFGL2是一种在巨噬细胞或内皮细胞表面上表达的70kDa的II型跨膜糖蛋白，在免疫相关凝血中发挥促凝血活性。sFGL2的重量为50kDa，由CD4
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CD25
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调节性T细胞(Treg)和其他Treg群高度表达，并且可能是许多Treg类别的常见效应器分子。
[0006]Fcγ受体(FcγR)IIB和FcγRIII已被鉴定为sFGL2功能的介体。FcγRIIB在其胞质内结构域中具有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM)，并且是唯一具有抑制功能的FcγR。FcγRIII含有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITAM)，其可介导活化信号传导。与FcγR结合后，sFGL2对不同细胞类型具有区别的生物学作用，这可能是由于FcγRIIB与FcγRIII在细胞表面的不同表达比率，或sFGL2对这两种FcγR的不同亲和力。
[0007]已经认识到，sFGL2在鼠模型中作为在CD4
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CD25
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Treg的发育和功能中的重要效应器分子。已显示CD4
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CD25
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Treg在fgl2
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/
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小鼠中更丰富，但它们抑制效应器CD4
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T细胞增殖的能力显著受损。与对CD4
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CD25
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Treg活性抑制无效或较弱的IL
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10、TGF
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β或CTLA
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4的阻断相反，sFGL2中和抗体的施用在体外以剂量依赖性方式消除了鼠CD4
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CD25
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Treg的抑制活性[Shalev,I.et al.,J Immunol.,2008,180:249
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260]。最近，Joller等人揭示了鼠sFGL2对于新鉴定的TIGIT
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CD4
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CD25
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Treg细胞亚群抑制Th1和Th17细胞应答的能力是必不可少的[Joller,N.et al.,Immunity,2014,40:569
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581]。总之，sFGL2介导的免疫调节可能对维持Th细胞稳态至关重要。
[0008]然而，大多数与sFGL2作为免疫调节剂的作用相关的研究都是在鼠模型中进行的，而有许多研究强调了在T细胞调节方面人和小鼠之间的差异。因此，sFGL2作为人免疫调节剂的作用仍未得到明确证实。
[0009]定位于人染色体7q11.23和小鼠染色体5的近侧区域的fgl2基因由被一个内含子隔开的两个外显子组成。FGL2的最长开放阅读框(ORF)在人中编码439个氨基酸，和在小鼠中编码432个氨基酸。FGL2蛋白的分析预测了N末端卷曲螺旋结构域和C末端球状结构域(FRED)。在小鼠FGL2中发现的12个半胱氨酸中有11个存在于所分析的人和猪FGL2中，这表明它们对FGL2结构的重要性。线性卷曲螺旋结构域中的四个半胱氨酸，在“Cys
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X
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X
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Cys”基序中线性排列成两对，对于FGL2寡聚化至关重要。
[0010]人fgl2基因的转录可以产生4种不同的mRNA、3种可选剪接变体和1种未剪接形式。
导致mFGL2和sFGL2之间功能差异的详细切割方式仍不清楚。FGL2的N末端的一段疏水氨基酸作为sFGL2分泌的信号肽，但sFGL2如何被切割和分泌仍然未知。据报道，sFGL2的C末端区域对于sFGL2介导的免疫调节至关重要[Chan,C.W.et al.,J Immunol.,2003,170:4036
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4044]。
[0011]sFGL2在其自然状态下作为由4个单体组成的低聚物存在。最近，显示了鼠单体FGL2与寡聚FGL2相比具有增强的免疫抑制活性。此外，FGL2的所有功能基序都显示在球状FRED结构域内定位。此外，与寡聚FGL2相比时，单体FGL2显示与鼠骨髓衍生树突状细胞(BM
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DC)的结合亲和力低6到7倍(Liu,H.et al.,The international journal of biochemistry&cell biology 2013,45:408
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418)。
[0012]已经进行了若干尝试以使用全长小鼠sFGL2作为免疫调节剂。Levy等人(“USE OF SOLUBLE FGL2 AS AN IMMUNOSUPPRESSANT；WO2003/074068)描述了使用全长小鼠sFGL2来抑制异种T细胞增殖。同样，Chen等人报道了全长小鼠sFGL2抑制T细胞增殖和树突状细胞成熟，但对细胞毒性T淋巴细胞活性没有抑制作用[Chan,C.W.et al,J Immunol.,2003,170:4036
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4044]。通常非常需要免疫抑制剂和免疫调节组合物。因此，对人细胞有效且可用于治疗自身免疫性疾病的FGL2组合物是非常令人感兴趣的。

技术实现思路

[0013]本专利技术提供免疫调节嵌合分子，其包含：来自人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)的纤维蛋白原相关结构域(FRED)或其免疫调节片段，以及人血清白蛋白(HSA)。还提供了包含嵌合分子的药物组合物，以及通过施用免疫调节药物组合物在受试者中减少炎症和治疗自身免疫性疾病的方法。
[0014]根据第一方面，提供了免疫调节嵌合分子，该嵌合分子包含：来自人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)的纤维蛋白原相关结构域(FRED)，或其免疫调节片段或类似物，以及半衰期延长部分。
[0015]根据另一方面，提供了药物组合物，其包含治疗有效量的本专利技术的嵌合分子。
[0016]根据另一方面，提供了减少有需要的受试者中炎症的方法，该方法包括向受试者施用本专利技术的嵌合分子或本专利技术的药物组合物，从而减少受试者中的炎症。
[0017]根据另一方面，提供了治疗有需要的受试者中自身免疫性疾病的方法，该方法包括向受试者施用本专利技术的嵌合分子或本专利技术的药物组合物，从而治疗受试者中的自身免疫性疾病。
[0018]根据一些实施方式，半衰期延长部分选自人血清白蛋白(HSA)和单体Fc。
[0019]根据一些实施方式，嵌合分子是比单独的人FRED更强的免疫调节剂。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种免疫调节嵌合分子，所述嵌合分子包含：来自人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)的纤维蛋白原相关结构域(FRED)，或其免疫调节片段或类似物，以及半衰期延长部分。2.根据权利要求1所述的嵌合分子，其中所述半衰期延长部分选自人血清白蛋白(HSA)和单体Fc。3.根据权利要求1或2的嵌合分子，其中所述嵌合分子是比单独的所述人FRED更强的免疫调节剂。4.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合分子，其中所述免疫调节是免疫抑制。5.根据权利要求1至4中任一项所述的嵌合分子，其中所述免疫调节包括以下至少一种：减少至少一种炎性细胞因子的分泌和减少免疫细胞的增殖。6.根据权利要求5所述的嵌合分子，其中所述免疫细胞选自T细胞、B细胞和树突状细胞。7.根据权利要求1至6中任一项所述的嵌合分子，其中所述半衰期延长部分与所述FRED或所述其免疫调节片段或类似物的N末端或C末端缀合。8.根据权利要求1至7中任一项所述的嵌合分子，其中所述FRED或其所述免疫调节片段或类似物与所述半衰期延长部分通过接头连接。9.根据权利要求8所述的嵌合分子，其中所述接头是氨基酸接头。10.根据权利要求9所述的嵌合分子，其中所述接头包含氨基酸序列GGGGS。11.根据权利要求9或10所述的嵌合分子，其中所述接头包含氨基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:4)或由其组成。12.根据权利要求9至11中任一项所述的嵌合分子，其中所述接头不包含来自FGL2的至少10个氨基酸的序列。13.根据权利要求1至12中任一项所述的嵌合分子，其中所述FRED由SEQ ID NO:3中提供的氨基酸序列组成。14.根据权利要求1至13中任一项所述的嵌合分子，进一步包含标签。15.根据权利要求14所述的嵌合分子，其中所述标签是His标签。16.根据权利要求15所述的嵌合分子，其中所述His标签是6
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His标签。17.根据权利要求14至16中任一项所述的嵌合分子，其中所述标签是C末端标签。18.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1至17中任一项所述的嵌合分子。19.根据权利要求18所述的药物组合物，进一步包含药学上可接受的载体、赋形剂或佐...

【专利技术属性】
技术研发人员：I，
申请(专利权)人：比昂生物制剂公司，
类型：发明
国别省市：