MMP抑制的用途制造技术

提供了减少CD28脱落、降低可溶性CD28水平、治疗癌症和改善免疫疗法的方法，其包括抑制基质金属蛋白酶。还提供了生产用于执行本发明专利技术方法的试剂的方法。明方法的试剂的方法。明方法的试剂的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】MMP抑制的用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年12月2日提交的美国临时专利申请号62/942,240、2019年12月30日提交的美国临时专利申请号62/954,802以及2020年3月12日提交的国际专利申请号PCT/IL2020/050297的优先权权益，其内容都通过引用以其全部并入本文。


[0003]本专利技术属于免疫调节和免疫疗法领域。

技术介绍

[0004]已知一些共刺激分子具有几种生理形式。除了膜结合形式外，还描述了在稚免疫细胞中表达的可溶性形式，这增加了T细胞生物学的复杂性。CD28的可溶性形式(sCD28)归因于交替剪接的基因产物和CD28的膜形式(mCD28)的主动脱落。剪接事件导致移码，结果是在翻译终止前在137位甘氨酸后添加了两个谷氨酸残基。最终产物缺少整个跨膜和细胞质区域，重要的是缺少141位处的半胱氨酸残基，该残基介导二聚体CD28的二硫键(Magistrelli G.,Biochem Biophy Res Commun,1999)。相比之下，对于CD28脱落的机制和切割的确切位点知之甚少，脱落的sCD28分子的序列也是未知的。
[0005]sCD28已显示抑制针对癌症的免疫反应并且与自身免疫严重性相关。此外，sCD28抑制基于PD
‑
1和PD
‑
L1的免疫疗法的效果。因此，非常需要抑制sCD28产生的方法。特别是，非常需要阻断sCD28脱落的方法和组合物。阻断sCD28脱落具有双重作用，因为其减少免sCD28并增加疫细胞上的mCD28。这两种作用都增强了针对癌症的免疫监视。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了减少CD28脱落、降低可溶性CD28水平、治疗癌症和改善免疫疗法的方法，其包括抑制基质金属蛋白酶2(MMP
‑
2)和/或基质金属蛋白酶13(MMP
‑
13)。还提供了生产用于执行本专利技术方法的试剂的方法。
[0007]根据第一方面，提供了减少CD28从表达膜CD28(mCD28)的细胞表面脱落的方法，该方法包括使细胞与基质金属蛋白酶
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2(MMP
‑
2)抑制剂、基质金属蛋白酶
‑
13(MMP
‑
13)抑制剂或两者接触，从而减少CD28从细胞表面脱落。
[0008]根据另一方面，提供了降低有需要的受试者中可溶性CD28(sCD28)水平的方法，该方法包括向受试者施用MMP
‑
2抑制剂、MMP
‑
13抑制剂或两者，从而降低受试者中的sCD28水平。
[0009]根据另一方面，提供了治疗和/或预防有需要的受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者施用MMP
‑
2抑制剂、MMP
‑
13抑制剂或两者，从而治疗和/或预防受试者中的癌症。
[0010]根据另一方面，提供了改善有需要的受试者中基于PD
‑
1和/或PD
‑
L1的免疫疗法的方法，该方法包括向受试者施用MMP
‑
2抑制剂、MMP
‑
13抑制剂或两者，从而改善受试者中基于PD
‑
1和/或PD
‑
L1的免疫疗法。
[0011]根据一些实施方式，需要免疫疗法的受试者患有癌症。
[0012]根据一些实施方式，受试者不应答或低应答基于PD
‑
1和/或PD
‑
L1的免疫疗法。
[0013]根据一些实施方式，在降低之前受试者的血液包括至少5ng/mL sCD28。
[0014]根据一些实施方式，癌症选自黑色素瘤、尿路上皮癌、头颈癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、肾癌、胃癌和结肠直肠癌。
[0015]根据一些实施方式，方法增加细胞表面或受试者中的mCD28表达，和/或增加细胞或受试者中mCD28介导的免疫细胞活化。
[0016]根据一些实施方式，方法包括施用MMP
‑
2抑制剂。
[0017]根据一些实施方式，抑制剂对MMP
‑
2具有特异性。
[0018]根据一些实施方式，抑制剂对MMP
‑
2诱导的CD28的脱落具有特异性。
[0019]根据一些实施方式，方法包括施用MMP
‑
13抑制剂。
[0020]根据一些实施方式，抑制剂对MMP
‑
13具有特异性。
[0021]根据一些实施方式，抑制剂对MMP
‑
13诱导的CD28的脱落具有特异性。
[0022]根据一些实施方式，抑制剂抑制mCD28的P144和L145之间诱导的mCD28切割。
[0023]根据一些实施方式，抑制剂结合mCD28并抑制MMP
‑
2诱导的CD28的脱落。
[0024]根据一些实施方式，抑制剂结合mCD28并抑制MMP
‑
13诱导的CD28的脱落。
[0025]根据一些实施方式，抑制剂结合mCD28的茎区(stalk region)，其中茎区，
[0026]a.包括氨基酸序列GKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO:7)、KGKHLCPSPLFPGPS(SEQ ID NO:8)或KGKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO:9)；
[0027]b.由氨基酸序列HVKGKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO:10)构成；或
[0028]c.(a)和(b)两者。
[0029]根据一些实施方式，抑制剂结合、封闭或阻断茎区中的MMP
‑
2、MMP
‑
13或两者切割位点PX1X2/X3，其中X3是疏水残基。
[0030]根据一些实施方式，切割位点是PSPL，并且MMP
‑
2/MMP
‑
13在P和L之间切割。
[0031]根据一些实施方式，本专利技术的方法还包括向受试者施用另一种免疫疗法。
[0032]根据一些实施方式，免疫疗法选自：
[0033]a.限制点抑制剂；
[0034]b.基于嵌合抗原受体(CAR)的疗法；和
[0035]c.癌症疫苗。
[0036]根据一些实施方式，限制点抑制剂是基于PD
‑
1和/或PD
‑
L1的免疫疗法。
[0037]根据另一方面，提供了生产用于执行本专利技术方法的试剂的方法，该方法包括：
[0038]获得结合CD28胞外结构域或其片段的试剂，测试该试剂阻断MMP
‑
2、MMP
‑
13或两者切割mCD28的能力，并选择阻断MMP
‑
2、MMP
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13或两者切割mCD28的至少一种试剂；或...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.减少CD28从表达膜CD28(mCD28)的细胞表面脱落的方法，所述方法包括使所述细胞与基质金属蛋白酶
‑
2(MMP
‑
2)抑制剂、基质金属蛋白酶
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13(MMP
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13)抑制剂或两者接触，从而减少CD28从细胞表面脱落。2.降低有需要的受试者中可溶性CD28(sCD28)水平的方法，所述方法包括向所述受试者施用MMP
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2抑制剂、MMP
‑
13抑制剂或两者，从而降低受试者中的sCD28水平。3.治疗和/或预防有需要的受试者中的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用MMP
‑
2抑制剂、MMP
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13抑制剂或两者，从而治疗和/或预防所述受试者中的癌症。4.改善有需要的受试者中基于PD
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1和/或PD
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L1的免疫疗法的方法，所述方法包括向所述受试者施用MMP
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2抑制剂、MMP
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13抑制剂或两者，从而改善受试者中基于PD
‑
1和/或PD
‑
L1的免疫疗法。5.根据权利要求4所述的方法，其中需要免疫疗法的所述受试者患有癌症。6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述受试者不应答或低应答基于PD
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1和/或PD
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L1的免疫疗法。7.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其中在所述降低之前所述受试者的血液包括至少5ng/mL sCD28。8.根据权利要求3至7中任一项所述的方法，其中所述癌症选自黑色素瘤、尿路上皮癌、头颈癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、肾癌、胃癌和结肠直肠癌。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述方法增加所述细胞表面或所述受试者中的mCD28表达，和/或增加所述细胞或受试者中mCD28介导的免疫细胞活化。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其包括施用MMP
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2抑制剂。11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述抑制剂对MMP
‑
2具有特异性。12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述抑制剂对MMP
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2诱导的CD28的切割具有特异性。13.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其包括施用MMP
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13抑制剂。14.根据权利要求1至9和13中任一项所述的方法，其中所述抑制剂对MMP
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13具有特异性。15.根据权利要求1至9和13至14中任一项所述的方法，其中所述抑制剂对MMP
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13诱导的CD28的切割具有特异性。16.根据权利要求12或15所述的方法，其中所述抑制剂抑制mCD28的P144和L145之间诱导的mCD28切割。17.根据权利要求12或16所述的方法，其中所述抑制剂结合mCD28并抑制MMP
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2诱导的CD28的脱落。18.根据权利要求15或16所述的方法，其中所述抑制剂结合mCD28并抑制MMP
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13诱导的CD28的脱落。19.根据权利要求17或18所述的方法，其中所述抑制剂结合mCD28的茎区，其中所述茎区，a.包括氨基酸序列GKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO:7)、KGKHLCPSPLFPGPS(SEQ ID NO:8)或KGKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO:9)；b.由氨基酸序列HVKGKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO:10)构成；或
c.(a)和(b)两者。20.根据权利要求19所述的方法，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：比昂生物制剂公司，
类型：发明
国别省市：