一种含有人凝血因子制造技术

本发明专利技术提供一种含有人凝血因子

【技术实现步骤摘要】
一种含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。其生理作用是，在血管出血时被激活，和血小板粘连在一起并且补塞血管上的创口。按凝血因子被发现的先后次序用罗马数字编号，有凝血因子Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，
Ⅴ
，
Ⅶ
，
Ⅷ
，
Ⅸ
，
Ⅹ
，
Ⅺ
，
Ⅻ
等。凝血因子是治疗血友病的特效药物，目前凝血因子
Ⅶ
，
Ⅷ
，
Ⅸ
和凝血酶原复合物(主要还有凝血因子Ⅱ，
Ⅶ
，
Ⅸ
，
Ⅹ
)已经开发成药物，用于甲型或乙型血友病(也称作Christmas病)的治疗。
[0003]乙型血友病是一种遗传性疾病，患者以男性为主，发病率约为男性活婴的1/30000，以自发性或创伤相关的出血为特征，出血部位主要在关节、软组织和肌肉。治疗的延迟或不足会引起各种并发症，包括关节反复出血相关的关节病和滑膜炎，严重时可导致关节畸形和功能障碍。另外，更严重的出血，尤其是颅内出血可能导致死亡。
[0004]目前治疗乙型血友病唯一有效的方法就是及时注射含凝血因子
Ⅸ
的药物以达到止血的目的，或者规律性注射含凝血因子
Ⅸ<br/>的药物预防出血。人凝血因子
Ⅸ
(F
Ⅸ
)是由肝细胞合成并分泌到血液中，并在凝血反应中发挥活性。它是相对分子质量约为57000的单链糖蛋白，由415个氨基酸残基组成，含多糖17％左右。含凝血因子
Ⅸ
的药物有血浆提取的人凝血因子
Ⅸ
、人凝血酶原复合物以及基因重组的人凝血因子
Ⅸ
等，国外有冻干人凝血因子
Ⅸ
及重组人凝血因子
Ⅸ
制品，国内目前只有冻干人凝血酶原复合物品种。临床实践表明，乙型血友病人可以自我注射纯的人凝血因子
Ⅸ
，通常不会有副作用，是比较安全的，但是注射人凝血酶原复合物却可能产生严重的副作用―血栓症，所以一般乙型血友病人输注该药时需在医院注射，留院观察以防意外。可见，纯度高的人凝血因子
Ⅸ
是治疗乙型血友病的首选药物。因此从凝血酶原复合物中获得高纯度及高活性的凝血因子
Ⅸ
，具有临床应用价值。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术旨在提出一种含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，能有效保护高纯度的凝血因子
Ⅸ
在冷冻干燥过程中凝血因子蛋白活性，减少凝血因子的活性损失，且具有良好的冻干外观。
[0006]为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0007]一种含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，所述药物组合物包括活性单位为50～200IU/ml的人凝血因子
Ⅸ
和浓度为50～120mM结构保护剂，所述结构保护剂选自氯化钠、蔗糖、甘露醇、甘油的至少一种。
[0008]进一步的，所述人凝血因子
Ⅸ
的活性单位为80～150IU/ml。
[0009]进一步的，所述人凝血因子
Ⅸ
的活性单位为100IU/ml。
[0010]进一步的，所述结构保护剂为氯化钠。
[0011]进一步的，所述药物组合物还包括浓度为30～65mM的冻干保护剂，所述冻干保护剂为氨基酸及其盐类。
[0012]进一步的，所述氨基酸及其盐类选自甘氨酸、脯氨酸、组氨酸、精氨酸、盐酸组氨酸、盐酸精氨酸、盐酸赖氨酸中的至少一种。
[0013]进一步的，所述药组组合物的结构保护剂为氯化钠，冻干保护剂为甘氨酸、盐酸赖氨酸、盐酸精氨酸中的至少一种。
[0014]进一步的，所述药组组合物的结构保护剂为氯化钠，冻干保护剂为盐酸精氨酸和/或盐酸赖氨酸。
[0015]进一步的，所述药组组合物还包括缓冲液，所述缓冲液为乙酸/乙酸盐、琥珀酸/琥珀酸盐、枸橼酸/枸橼酸盐、磷酸/磷酸盐、Tris/盐酸盐中的至少一种，所述缓冲液的加入使所述药物组合物的pH值为6.5～7.5。
[0016]进一步的，所述缓冲液为枸橼酸/枸橼酸盐。
[0017]进一步的，所述枸橼酸/枸橼酸盐缓冲液的加入使所述药物组合物的pH值为7.25
±
0.05。
[0018]本专利技术还提供一种含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物的制备方法，包括如下步骤：
[0019]S1.按比例称取处方量的结构保护剂和冻干保护剂于配制容器中；
[0020]S2.在配制容器中加入注射用水搅拌至溶解，再加入缓冲液，调节pH至设定值，定容后作为溶液A；
[0021]S3.使用超滤法将纯化后的人凝血因子
Ⅸ
样品超滤换液至溶液A中，作为溶液B；
[0022]S4.将溶液A和溶液B混合后作为溶液C，所述溶液C经0.22μm滤膜过滤后，通N2灌装并分装；
[0023]S5.分装后进行真空冷冻干燥，冻干完成后进行干热病毒灭活，得到高纯人凝血因子
Ⅸ
药物组合物。
[0024]进一步的，步骤S5中，所述真空冷冻干燥的条件为：
[0025][0026]相对于现有技术，本专利技术所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物及其制备方法具有以下优势：
[0027](1)本专利技术所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，加入结构保护剂和冻干保护剂，经过冷冻干燥后，对人凝血因子
Ⅸ
蛋白活性有保护作用，蛋白活性回收率高，稳定性好，大大降低了活性损失，具有广阔的市场应用前景；
[0028](2)本专利技术所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，热稳定性好，颗粒尺寸细小且均一；
[0029](3)本专利技术所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物具有良好的冻干外观，冷冻干
燥后活性回收率高，复融时间短，复融外观也符合要求。
具体实施方式
[0030]下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。首先应说明的是，下述实验例中的数据是由专利技术人通过大量实验获得，限于篇幅，在说明书中只展示其中的一部分，且本领域普通技术人员可以在此数据下理解并实施本专利技术。这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些改动或修改同样落于本申请所保护的范围。
[0031]实验例1缓冲液对人凝血因子
Ⅸ
的影响
[0032]在其他参数及工艺条件相同，且取中间值的情况下，采用nanoD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括活性单位为50～200IU/ml的人凝血因子
Ⅸ
和浓度为50～120mM结构保护剂，所述结构保护剂选自氯化钠、蔗糖、甘露醇、甘油的至少一种。2.根据权利要求1所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，其特征在于，所述结构保护剂为氯化钠。3.根据权利要求1所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括浓度为30～65mM的冻干保护剂，所述冻干保护剂为氨基酸及其盐类。4.根据权利要求3所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，其特征在于，所述氨基酸及其盐类选自甘氨酸、脯氨酸、组氨酸、精氨酸、盐酸组氨酸、盐酸精氨酸、盐酸赖氨酸中的至少一种。5.根据权利要求4所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，其特征在于，所述药组组合物的结构保护剂为氯化钠，冻干保护剂为盐酸精氨酸和/或盐酸赖氨酸。6.根据权利要求1所述的含有人凝血因子
Ⅸ
的药物组合物，其特征在于，所述药组组合物还包括缓冲液，所述缓冲液为乙酸/乙酸盐、琥珀酸/琥珀酸盐、枸橼酸/枸橼酸盐、磷酸/磷酸盐、Tris/盐酸盐中的至少一种，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：安文琪，王满满，毕利利，王斌，李学琴，马小伟，
申请(专利权)人：华兰生物工程重庆有限公司，
类型：发明
国别省市：