因子Ⅶ多肽的液体组合物制造技术

一种液体含水组合物，其包含（ｉ）因子Ⅶ多肽，（ｉｉ）适合保持ｐＨ约４．０－８．０的试剂；（ｉｉｉ）选自以下的试剂：钙盐、镁盐或其混合物，其中（ｉｉｉ）的浓度至少１５ｍＭ。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及包含因子VII多肽的液体含水组合物以及制备和使用该组合物的方法。本专利技术更特别涉及对化学和/或物理降解稳定的液体组合物。
技术介绍
已经鉴定了凝血过程涉及的多种因子，包括血浆糖蛋白因子VII(FVII)。血管壁受损后，暴露于循环血中的组织因子(TF)与循环中存在的、相当于约1％FVII蛋白质总量的FVIIa之间形成复合物，从而启动止血。FVII主要以单链酶原存在于血浆中，由FXa断裂成双链活化形式FVIIa。重组的活化因子VIIa(rFVIIa)已开发为前止血剂(pro-haemostatic agent)。因抗体形成而不能利用其它凝血因子产品治疗的出血血友病受试者，给予rFVIIa可产生快速、高效的前止血反应(pro-haemostatic response)。FVIIa也可以成功治疗因子VII缺陷受试者、或凝血系统正常但过量流血的受试者的出血。希望有适合保存和输送的给药形式的因子VIIa。理想上药物产品以液体保存和给药。或者，药物产品是冻干的，例如冷冻干燥，然后就在患者使用之前加入合适稀释剂重新溶解。理想上药物产品具有足够稳定性，可以长期保存，即6个月以上。通常根据蛋白质药物在给药形式中的稳定性，来决定使最终药物产品保持液体抑或冻干。蛋白质稳定性特别受到以下因素影响，例如离子强度、pH、温度、冷冻/融化的重复循环以及受到剪切力。活性蛋白质可因物理不稳定性包括变性和凝聚(可溶性及不可溶性凝聚物形成)、以及化学不稳定性包括例如水解、脱酰胺作用和氧化作用而丧失，仅举几个例子。蛋白质药物稳定性的一般综述参见例如Manning等人，Pharmaceutical Research 6903-918(1989)。虽然广泛理解可能发生蛋白质不稳定性，但不可能预测特定蛋白质的特定不稳定性问题。以上任何不稳定性均可导致形成活性降低、毒性增加和/或免疫原性提高的蛋白质副产品、或衍生物。实际上，蛋白质沉淀可能引起血栓形成、剂量形式和数量的不均一性以及注射器阻塞。此外，翻译后修饰例如某些N端谷氨酸残基的γ羧基化以及添加糖侧链产生可能在保存期间对修饰敏感的潜在位点。因子VIIa特异性的丝氨酸蛋白酶也可能因自身催化而发生片段化(酶促降解)。因此，任何蛋白质组合物的安全和效率与其稳定性直接相关。液体形式保持稳定性通常与冻干形式不同，因其分子运动大大增加，从而提高了分子相互作用的几率。浓缩形式保持稳定性也不同，因为高蛋白质浓度易于形成凝聚物。开发液体组合物时，要考虑很多因素。短期，即6个月以下，液体稳定性一般取决于避免总体结构性变化，例如变性和凝聚。文献中描述了针对许多蛋白质的的这类方法，也存在许多稳定剂的例子。众所周知，有效稳定某一蛋白质的试剂实际上使另一种不稳定。一旦使蛋白质的总体结构性变化稳定，形成长期稳定(例如超过6个月)的液体组合物则取决于进一步稳定蛋白质不受特异性针对该蛋白质的各类降解。更特异性的各类降解可能包括，例如二硫键错乱、某些残基氧化、脱酰胺作用、环化。尽管未必可能确切指出各个降解种类，但发展了测定方法来监控精细变化，以便监控特定赋形剂独特稳定目的蛋白质的能力。除了稳定性考虑之外，通常选择由各个世界医学管理机构批准的赋型剂。希望组合物的pH在注射/输注时位于生理合适范围内，否则可能引起疼痛和不适。蛋白质组合物的综述参见例如Cleland等人The development ofstable protein compositionsA closer look at protein aggregation，deamidation and oxidation，Critical Reviews in Therapeutic DrugCarrier Systems 1993(4)307-377以及Wang等人，Parenteralcompositions of proteins and peptidesStability and stabilizers，Journal of Parenteral Science and Technology 1988(增刊)，42(2S)。有关蛋白质稳定的其它出版物如下。U.S.20010031721 A1(American Home Products)涉及高度浓缩、冻干及液体因子IX组合物。U.S.5,770,700，700(Genetics Institute)涉及液体IX组合物。WO 97/19687(American Red Cross)涉及血浆蛋白质的液体组合物，特别是因子VIII和因子IX。U.S.4,297,344，344公开了通过加入所选氨基酸例如甘氨酸、丙氨酸、羟脯氨酸、谷氨酰胺和氨基丁酸以及糖类例如单糖、寡糖或糖醇，使凝血因子II和VIII、抗凝血酶III及纤溶酶原对热稳定。因子VIIa经历若干降解途径，特别是聚集(二聚)、氧化和自溶型断裂(肽主链剪切)。此外，可能发生沉淀。从蛋白质中去除水分可以显著降低上述许多反应。然而，形成因子VIIa的含水组合物的好处在于，消除重新溶解失误而提高了给药准确性，并且简化了产品的临床使用，从而增加了患者合作。理想上因子VIIa组合物应在各种蛋白质浓度下稳定6个月以上。这提供了给药方法的灵活性。一般而言，较高度浓缩的形式可以给予较低的体积，从患者观点极其希望如此。液体组合物较之冷冻干燥产品在易于给药和使用方面具有很多优点。如今，唯一商品化重组制备的FVII多肽组合物是冷冻干燥的因子FVIIa产品，在使用前重新溶解，包含相对较低的因子VIIa浓度，例如约0.6mg/ml。一瓶(1.2mg)NovoSeven(Novo Nordisk A/S，Denmark)包含1.2mg重组人因子VIIa、5.84mg NaCl、2.94mg CaCl2、2H2O、2.64mg GlyGly、0.14mg聚山梨酯(polysorbate)80和60.0mg甘露醇；利用2.0ml注射用水(WFI)重新溶解到pH 5.5。重新溶解后，蛋白质溶液稳定使用24小时。因此，目前没有商品化的液体即用型或浓缩的因子VII产品。故而本领域需要提高因子VII多肽包括人因子VIIa稳定性(化学和/或物理稳定性)、增加浓度、保持活性水平以及提供适于保存的液体组合物的方法。因此，本专利技术目的在于提供含水因子VII多肽组合物，对化学和/或物理降解产物例如酶促降解或自身催化产物提供合适控制。专利技术概述本专利技术人发现，因子VII或其类似物(″因子VII多肽″)与缓冲剂、浓度至少15mM的钙或镁盐或其混合物一起配制成含水溶液时，在pH约4-约8范围内稳定。一方面，本专利技术提供了一种液体含水组合物，其包含(i)因子VII多肽，(ii)适于使pH保持在约4.0-约8.0的试剂；(iii)选自以下的试剂钙盐、镁盐或其混合物，其中(iii)的浓度为至少15mM。在不同实施方案中，试剂(iii)存在的浓度为至少约25mM、50mM、100mM、200mM、400mM、800mM、900mM或至少1000mM。在另一实施方案中，该组合物另外包含(iv)离子强度改变剂。在不同实施方案中，该离子强度改变剂选自中性盐例如氯化钠；氨基酸；或小肽，或至少两种所述改变剂的混合物。在优选实施方案中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液体含水组合物，其包含（ｉ）因子Ⅶ多肽；（ｉｉ）适合保持ｐＨ在约４．０－约８．０范围内的试剂；（ｉｉｉ）选自以下的试剂：钙盐、镁盐或其混合物；其中（ｉｉｉ）的浓度至少１５ｍＭ。

【技术特征摘要】
DK 2001-12-21 PA2001019481.一种液体含水组合物，其包含(i)因子VII多肽；(ii)适合保持pH在约4.0-约8.0范围内的试剂；(iii)选自以下的试剂钙盐、镁盐或其混合物；其中(iii)的浓度至少15mM。2.权利要求1的组合物，其还包含(iv)离子强度改变剂。3.权利要求2的组合物，其中该离子强度改变剂(iv)选自中性盐例如氯化钠；氨基酸；或小肽，或至少两种所述改变剂的混合物。4.权利要求3的组合物，其中该离子强度改变剂(iv)是氯化钠。5.权利要求1-4中任一项的组合物，其中试剂(iii)存在的浓度为至少约25mM，例如至少约50mM、100mM、200mM、400mM或至少约800mM。6.权利要求2-5中任一项的组合物，其中试剂(iv)存在的浓度为至少约5mM，例如至少约10mM、20mM、50mM、100mM、200mM、400mM、800mM、1000mM、1200mM、1500mM、1800mM、2000mM或至少约2200mM。7.权利要求1-6中任一项的组合物，其中钙盐选自氯化钙、乙酸钙、葡萄糖酸钙和乙酰丙酸钙。8.权利要求1-7中任一项的组合物，其中镁盐选自氯化镁、乙酸镁、硫酸镁、葡萄糖酸镁和乙酰丙酸镁。9.权利要求6-8中任一项的组合物，其中试剂(iii)选自氯化钙、乙酸钙、氯化镁、乙酸镁、硫酸镁或其混合物；并且其中该离子强度改变剂(iv)是氯化钠。10.权利要求1-9中任一项的组合物，其还包含(v)张力改变剂。11.权利要求10的组合物，其中该张力改变剂(v)选自中性盐；单-、双-或多糖；糖醇；氨基酸；或小肽，或至少两种所述改变剂的混合物。12.权利要求10或11的组合物，其中该张力改变剂(v)存在的浓度为1mM-500mM。13.权利要求12的组合物，其中所述浓度为10-250mM。14.权利要求1-13中任一项的组合物，其还包含(vi)非离子表面活性剂。15.权利要求14的组合物，其中该非离子表面活性剂是聚山梨酯或泊洛沙姆或聚氧乙烯烷基醚，例如泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、聚山梨酯20、聚山梨酯80或聚氧23十二烷基醚。16.权利要求1-15中任一项的组合物，其还包含(vii)抗氧化剂。17.权利要求16的组合物，其中该抗氧化剂(vii)选自L-或D-甲硫氨酸、甲硫氨酸类似物、包含甲硫氨酸的肽、甲硫氨酸同系物、抗坏血酸、半胱氨酸、高半胱氨酸、谷胱甘肽、胱氨酸和胱硫醚。18.权利要求17的组合物，其中该抗氧化剂为L-甲硫氨酸。19.权利要求16-18中任一项的组合物，其中该抗氧化剂存在的浓度为约0.1-约5.0mg/m...

【专利技术属性】
技术研发人员：BL汉森，MB延森，T科恩费尔特，
申请(专利权)人：诺和诺德医疗保健公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]