【技术实现步骤摘要】
一种分析外泌体电荷异质性的方法
[0001]本专利技术属于外泌体检测与分析领域,尤其是涉及一种分析外泌体电荷异质性的方法。
技术介绍
[0002]外泌体是由多泡体(MVB)与质膜融合而分泌的,是被磷脂双层膜包裹的颗粒。这些类型的细胞外囊泡(EVs)直径为30 ~ 150 nm,富含与细胞内信号传导相关的物质。外泌体可以从多种体液中分离出来,如血液、尿液、唾液、母乳、羊水、腹水和脑脊液。实验证明外泌体在调节细胞生长中起着至关重要的作用,特别是在肿瘤细胞的生长和转移中。外泌体能够通过细胞间信号传导介导对病原体和肿瘤的适应性免疫应答。外泌体传递的蛋白质、RNA和DNA分子等物质可以将信号转导到其他细胞,然后在生理和病理状态下调节这些细胞的功能。它们也可能是重要的生物标志物,用于人类疾病的诊断,或预测和监测治疗结果,特别是癌症。外泌体的研究已成为近年来的热门话题,特别是在转化医学领域。
[0003]外泌体一般呈现微观不均一性,即“异质性”,包括电荷、分子量、形态等相关的异构体。这些异构体可能来自本身,例如外泌体表面的糖基化修饰蛋白、磷脂等分子,也可能来自纯化、制剂等制造过程及贮存过程的任何阶段。其中由于外泌体分子所带电荷差异造成的异质性称为电荷异构体,电荷异质性对外泌体的稳定性及其生物学功能发挥的影响还有待进一步的验证。
技术实现思路
[0004]为解决上述技术问题,本专利技术提供一种分析外泌体电荷异质性的方法。
[0005]本专利技术采用的技术方案是:一种分析外泌体电荷异质性的方法,采用离子 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:采用离子交换色谱对外泌体溶液进行检测和/或分离,流动相A和流动相B进行梯度洗脱,所述流动相A 和所述流动相B中还包含保护剂,所述保护剂浓度为0.5
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5%,洗脱过程中包括多于两个的固定值洗脱阶段;所述流动相A为缓冲液,所述流动相B为缓冲液
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盐溶液,所述保护剂为蔗糖、乳糖和海藻糖中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:离子交换色谱柱为阴离子色谱柱。3.根据权利要求1或2所述的分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:所述流动相A和所述流动相B的pH值为7.0
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8.0;所述缓冲液浓度为5
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50mM;所述盐浓度为0.2
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2M。4.根据权利要求3所述的分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:所述缓冲液为Tris缓冲液,所述盐溶液为钠盐溶液。5.根据权利要求1、2和4中任一所述的分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:所述保护剂浓度为2%。6.根据权利要求1、2和4中任一所述的分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:洗脱过程中包括6个固定值洗脱阶段,固定值依次为62%流动相A、54%流动相A、46%流动相A、38%流动相A、28%流动相A和18%流动相A,相邻固定值洗脱阶段调整时长为0.1
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3min。7.根据权利要求6所述的分析外泌体电荷异质性的方法,其特征在于:梯度洗脱条件包括0.0
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2.0min,100%流动相A;2.0
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5.0min,100
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75%流动相A;5.0
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5.2min,75
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【专利技术属性】
技术研发人员:葛啸虎,韩春乐,赵刚刚,陆路,董凤伟,
申请(专利权)人:天九再生医学天津科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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