一种药物制剂中挥发性成分的检测方法技术

本发明专利技术提供一种药物制剂中挥发性成分的检测方法，该检测方法采用HS‑GC/MS(顶空‑气相质谱联用)法同时检测本发明专利技术中药制剂中甲基丁香酚、黄樟醚、3,5‑二甲氧基甲苯、1,2,3‑三甲氧基‑5‑甲基苯、肉豆蔻醚、榄香素、2‑十一烯醛、9‑葵烯醛、十四酸、龙脑、异龙脑、棕榈酸、油酸、β‑谷甾醇、三十一碳烷、2,3‑二氢‑3,5‑二羟基‑6‑甲基‑4‑氢‑吡喃酮、1‑碘代十二烷烃、石竹烯、石竹烯氧化物、异补骨脂素、补骨脂素、补骨脂酚等22个物质成分。该检测方法可起到全面检测药物内在质量的作用，以保证其该产品用药的安全性和有效性。

【技术实现步骤摘要】
一种药物制剂中挥发性成分的检测方法
本专利技术涉及属于药物成分检测分析领域，尤其具体涉及一种药物制剂中挥发性成分的检测方法。
技术介绍
本专利技术所述的药物制剂是由红参、淫羊藿、补骨脂、枸杞子、麻黄、细辛、丹参、水蛭组成。该药物制剂为已上市产品，生产厂家为山东步长制药股份有限公司，上市的产品名称为参仙升脉口服液，用于阳虚脉迟证，症见脉迟、脉结、心悸、胸闷、畏寒肢冷、腰膝酸软、气短乏力或头晕、舌质暗淡或有齿痕、或舌有瘀斑、瘀点，相当于轻、中度窦房结心动过缓(心率>50次)和轻度病态窦房结综合征，不合并有室上性快速心律失常的心肾阳虚，寒凝血脉证。该药国药准字号为Z20080183，有研究表明其在治疗缓慢性心律失常和慢性心力衰竭在临床疗效优于单纯西药组，在疗效和安全性方面有着自己独特的优势。本申请人对该产品之前已经两件专利技术专利申请：其专利号为：200710019161.5、201010275244.2，上述专利保护内容主要集中在处方、生产工艺、质量检测控制方法、临床新用途方面。而目前该产品的执行标准为国家食品药品监督管理局标准WS3-065(Z-010)-2003(Z)，但其质量检测方法对红参、麻黄、补骨脂、淫羊藿、丹参药材进行薄层鉴别(TLC)，以及人参皂苷分子式单一指标成分进行质量控制，方法简单初级，且检测成分较少，因此现有检测对本专利技术中药的内在质量无法达到有效评价，需要进行更深入的研究。气相色谱是一种可以将中成药中复杂化学成分进行逐步分离的色谱技术，但其定性、鉴定结构的能力较差；其配合质谱对未知化合物结构有较强的鉴别能力，灵敏度高，检测快速，但质谱检测其实其本身具有无法实现复杂化合物的分离的缺点，因此对未知化合物鉴定时需要高纯度的样本。气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)则是利用气相色谱技术对复杂组分样品进行有效分离，得到高纯度的样品正好满足质谱鉴定的要求，色谱高分辨率和质谱的高灵敏度、强鉴别能力两者相结合，在中成药成分检测分析过程中具有较强的优势。本专利技术申请人对现有技术文献中涉及到“气相-质谱联用”测定方法进行系统检索，并整理分析如下，该检测方法主要包括：黄小安，蓝云英，等人，气相色谱质谱联用技术分析皂角刺挥发油成分，广州中医药大学学报，2020-05-19，该文章记载了：采用气相色谱质谱联用(GC-MS)技术测定皂角刺挥发油中的化学成分,并结合NIST2014质谱库进行检索,用峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。从皂角刺挥发油中共鉴定出65个成分，占挥发油成分的64.85％。皂角刺挥发油的主要成分为棕榈酸、亚油酸、芳樟醇、正己醛、2-正戊基呋喃、正十四烷、糠醛、反油酸、植酮、苯乙醛等。罗志翔，李晓如，GC-MS结合化学计量学分析厚朴汤化学成分，广州化工，利用气质联用技术，比较分析了厚朴汤(药对厚朴-白术)及其单味药的共有成分，对药对与单味药的挥发油进行了定性和定量分析。鉴定出药对的挥发性组分62种，占总含量的91.60％，厚朴的挥发性组分54种，占总含量的90.43％，白术的挥发性成分53种，占总含量的91.83％。上述成分检测体现气相-色谱技术在越来越多的中成药检测分析中得到广泛的应用。为了提升参仙升脉口服液内在质量标准研究，以及弄清楚该中成药知己中所含的有效成分，保证其生产及临床应用中用药安全。本研究将采用GC-MS检测技术对参仙升脉口服液进行物质成分研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种药物制剂中挥发性成分检测方法，该检测方法采用HS-GC/MS(顶空-气相质谱联用)法同时检测本专利技术药物制剂中甲基丁香酚、黄樟醚、3,5-二甲氧基甲苯、1,2,3-三甲氧基-5-甲基苯、肉豆蔻醚、榄香素、2-十一烯醛、9-葵烯醛、十四酸、龙脑、异龙脑、棕榈酸、油酸、β-谷甾醇、三十一碳烷、2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4-氢-吡喃酮、1-碘代十二烷烃、石竹烯、石竹烯氧化物、异补骨脂素、补骨脂素、补骨脂酚等22个物质成分。可为本专利技术药物制剂的内在质量控制提供科学参考依据。本申请检测方法不需要样品的处理，可以直接进样检测，其操作步骤简便可行。该检测方法可起到全面检测本专利技术药物制剂的内在质量及稳定性的作用，以保证其该产品用药的安全性和有效性。本专利技术药物制剂的组方是由红参、淫羊藿、补骨脂、枸杞子、麻黄、细辛、丹参、水蛭组成，该药物制剂具体处方配比为：由红参100份、淫羊藿250份、补骨脂750份、枸杞子250份、麻黄250份、细辛50份、丹参375份、水蛭250份组成。本专利技术药物制剂的制备方法为：称取红参100g、淫羊藿250g、补骨脂750g、枸杞子250g、麻黄250g、丹参375g、水蛭250g、细辛50g；细辛加水6倍，水蒸气蒸馏提取6小时，滤过，收集挥发油，滤液另器收集；挥发油加聚山梨酯-80适量使其溶解备用；红参用75％乙醇回流提取三次，第一次1.5小时，其余每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，加水至100ml，冷藏72小时，滤过，滤液备用；其余淫羊藿、补骨脂、枸杞子、麻黄、丹参、水蛭等6味加水10倍，煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与蒸馏后的滤液合并，浓缩至40℃相对密度为1.09，加乙醇使含醇量达70％，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水至700ml，冷藏48小时，滤过，滤液加入上述红参药液及细辛挥发油，加炼蜜适量，甜菊素适量，调节pH值为7，加水至1000ml，搅匀，滤过，灌封，灭菌，即得。本专利技术药物制剂中挥发性成分检测方法所提供的技术方案如下：一种药物制剂中挥发性成分检测方法，包括如下步骤：⑴供试品样品的制备：精密量取市售参仙升脉口服液，即本专利技术口服液，置顶空进样瓶中，快速压盖密封瓶口，置顶空自动进样系统，上述样品溶液采用顶空-气相-质谱检测条件，注入色谱仪进行检测分析；⑵、所述顶空检测条件为：①、顶空条件，样品瓶加热温度为：60～80℃；孵育时间：20～40min；定量环加热温度：70～90℃；吸取样品体积：0.5～2mL；⑵所述气相检测条件为：色谱柱：HP-5MS；进样方式：分流；分流比：20:1；柱箱初始温度：60℃；进样口温度：280℃；程序升温：初始温度60℃，保持1min，以3℃/min速率升至195℃，保持5min，再以5℃/min速率升至240℃，保持5min；载气：氮气；柱流量：1.5mL/min；吹扫流量：3mL/min；⑷、所述质谱检测条件为：所选离子源：EI离子源；离子源温度：230℃；接口温度：260℃；溶剂延迟时间：4min；采集时间：5-65min；采集方式：Q1Scan；间隔：0.3s；扫描范围：45-600m/z，得到本专利技术药物制剂的总离子流图；⑸、成分鉴定：对上述检测数据分析，采用质谱数据归属利用工作站自带的Nist4.0数据库进行解析，主要考察基峰和二级碎片离子峰的相似程度，根据Nist4.0数据库相似性打分选择分值最高的结果作为化合物归属结果，对于打分相同的化合物归属，则根据本专利技术药物制剂中构成药材所含有挥发性成分的相关文献报道进行筛选和归属，符合度在90以上本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物制剂中挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：/n⑴、供试品样品的制备：/n精密量取本专利技术口服液，置顶空进样瓶中，快速压盖密封瓶口，置顶空自动进样系统，上述样品溶液采用顶空-气相-质谱检测条件，注入色谱仪进行检测分析；/n⑵、所述顶空检测条件为：①、顶空条件，样品瓶加热温度为：60～80℃；孵育时间：20～40min；定量环加热温度：70～90℃；吸取样品体积：0.5～2mL；/n⑶、所述气相检测条件为：/n色谱柱：HP-5MS；进样方式：分流；分流比：20:1；柱箱初始温度：60℃；进样口温度：280℃；程序升温：初始温度60℃，保持1min，以3℃/min速率升至195℃，保持5min，再以5℃/min速率升至240℃，保持5min；载气：氮气；柱流量：1.5mL/min；吹扫流量：3mL/min；/n⑷、所述质谱检测条件为：所选离子源：EI离子源；离子源温度：230℃；接口温度：260℃；溶剂延迟时间：4min；采集时间：5-65min；采集方式：Q1Scan；间隔：0.3s；扫描范围：45-600m/z，得到本专利技术中药制剂的总离子流图；/n⑸、成分鉴定：对上述检测数据分析，采用质谱数据归属利用工作站自带的Nist4.0数据库进行解析，主要考察基峰和二级碎片离子峰的相似程度，根据Nist4.0数据库相似性打分选择分值最高的结果作为化合物归属结果，对于打分相同的化合物归属，则根据本专利技术中药制剂中构成药材所含有挥发性成分的相关文献报道进行筛选和归属，符合度在90以上即能确定化合物。/n...

【技术特征摘要】
1.一种药物制剂中挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
⑴、供试品样品的制备：
精密量取本发明口服液，置顶空进样瓶中，快速压盖密封瓶口，置顶空自动进样系统，上述样品溶液采用顶空-气相-质谱检测条件，注入色谱仪进行检测分析；
⑵、所述顶空检测条件为：①、顶空条件，样品瓶加热温度为：60～80℃；孵育时间：20～40min；定量环加热温度：70～90℃；吸取样品体积：0.5～2mL；
⑶、所述气相检测条件为：
色谱柱：HP-5MS；进样方式：分流；分流比：20:1；柱箱初始温度：60℃；进样口温度：280℃；程序升温：初始温度60℃，保持1min，以3℃/min速率升至195℃，保持5min，再以5℃/min速率升至240℃，保持5min；载气：氮气；柱流量：1.5mL/min；吹扫流量：3mL/min；
⑷、所述质谱检测条件为：所选离子源：EI离子源；离子源温度：230℃；接口温度：260℃；溶剂延迟时间：4min；采集时间：5-65min；采集方式：Q1Scan；间隔：0.3s；扫描范围：45-600m/z，得到本发明中药...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘峰，黄壮壮，孙宇宏，刘宇栋，许刚，彭修娟，贺敬霞，
申请(专利权)人：山东步长制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37