一种参仙升脉口服液多指标成分含量及其指纹图谱检测方法技术

本发明专利技术提供一种参仙升脉口服液多指标成分含量及其指纹图谱检测方法，本发明专利技术采用HPLC波长切换法建立了参仙升脉口服液的指纹图谱，同时又测定了丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、阿魏酸、迷迭香酸、人参皂苷Rg1、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C和淫羊藿苷10个重要活性成分的含量，既可全面、系统的定性鉴别参仙升脉口服液的质量，又实现了多指标成分的定量分析，为有效控制参仙升脉口服液质量提供更加全面的科学依据。质量提供更加全面的科学依据。质量提供更加全面的科学依据。

【技术实现步骤摘要】
一种参仙升脉口服液多指标成分含量及其指纹图谱检测方法


[0001]本专利技术涉及属于中成药化学检测分析领域，尤其具体涉及一种参仙升脉口服液多指标成分含量及其指纹图谱检测方法。

技术介绍

[0002]参仙升脉口服液是由红参、淫羊藿、补骨脂（盐炙）、枸杞子、麻黄、细辛、丹参和水蛭8味药材制成的中药复方制剂。该药是山东步长制药有限公司的产品（参仙升脉口服液），其功能主治，温补心肾，活血化瘀。本品用于阳虚脉迟证，症见脉迟、脉结、心悸、胸闷、畏寒肢冷、腰膝酸软、气短乏力或头晕、舌质暗淡或有齿痕、或舌有瘀斑、瘀点。相当于轻、中度窦性心动过缓和轻度病态窦房结综合征不合并室上性快速心律失常的心肾阳虚，寒凝血脉证。本申请人针对该产品已布局多件专利技术专利申请：其专利申请号为200710019161.5、200830117798.3、201010275244.2、202010831085.3、202210879150.9，上述专利保护主题主要集中在治疗心律失常的药物组合物、制备工艺、挥发性成分的检测方、检测方法、超高效液相检测方法、防治糖尿病并发症药物中的应用等。
[0003]该药临床上用于治疗缓慢性心律失常，为国家三类新药。但由于参仙升脉口服液组方药材种类相对较多，化学成分复杂，完善健全的质量评价体系对其质量控制非常重要。现有技术文献报道， 杨娟英、林玉红、谢伟等，陕西中医杂志，2011
‑
09
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05公开发表，“参仙生脉口服液HPLC指纹图谱研究”，但其检测并鉴定的特征峰数目较少，仅标定了人参皂苷Rb、Rg、淫羊藿苷3个成分，也未见有更多指标成分含量测定的相关研究报道，不能全面充分的反映参仙升脉口服液的整体质量。中药色谱指纹图谱能够表达中药完整物质信息，表征化学成分的整体特性，是定性鉴别中药材及其制剂真伪、优劣、质量一致性与稳定性的经典有效方法。中药指纹图谱结合多指标成分定量，应用于中药的质量控制，可以实现定性和定量双重评价，使中药质量的稳定性得以保障，安全可控地应用于临床。本研究采用HPLC建立参仙升脉口服液的指纹图谱，并同时对其中10种指标成分进行含量测定，为其全面系统的质量控制提供科学依据。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种参仙升脉口服液多指标成分含量及其指纹图谱检测方法，本专利技术采用HPLC波长切换法建立了参仙升脉口服液的指纹图谱，同时又测定了丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、阿魏酸、迷迭香酸、人参皂苷Rg1、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C和淫羊藿苷10个重要活性成分的含量，既可全面、系统的定性鉴别参仙升脉口服液的质量，又实现了多指标成分的定量分析，为有效控制参仙升脉口服液质量提供更加全面的科学依据。
[0005]本专利技术提供的技术方案如下：一种参仙升脉口服液多指标成分检测方法，所述检测方法包括如下步骤：
⑴
、混合对照品溶液：称取丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、阿魏酸、
迷迭香酸、人参皂苷Rg1、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C和淫羊藿苷对照品，加甲醇溶解稀释，混匀，制成混合对照品溶液；
⑵
、供试品溶液：吸取参仙升脉口服液，加甲醇溶解稀释，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；
⑶
、色谱条件：色谱柱为C18，流动相为乙腈（A）和0.2%磷酸水溶液（B），梯度洗脱：0~15min，5%A；15~25min，5%~15%A；25~40min，15%~18%A；40~45min，18%~22%A；45~95min，22%~25%A；95~100min，25%~5%A，所述检测波长为210～270nm、流速为0.6～1.4mL
•
min
‑
1，柱温为25～35
°
C，进样量为5～15
µ
L；
⑷
、色谱峰测定：将采用上述步骤
⑴
、
⑵
所制得的混合对照品溶液、供试品溶液、注入液相色谱仪，按照上述步骤
⑶
的色谱条件，测定记录色谱图，即得。
[0006]优选的，所述步骤
⑴
混合对照品溶液中，所述丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、迷迭香酸、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C、淫羊藿苷的含量线性范围，分别为32.90~246.67μg
•
mL
‑1、9.60~71.67μg
•
mL
‑1、57.30~429.33μg
•
mL
‑1、54.50~408.00μg
•
mL
‑1、2.70~20.40μg
•
mL
‑1、14.70~110.00μg
•
mL
‑1、7.00~52.67μg
•
mL
‑1、6.50~48.33μg
•
mL
‑1、5.20~38.67μg
•
mL
‑1、10.70~80.00μg
•
mL
‑1。
[0007]优选的，所述步骤
⑵
供试品溶液中，甲醇稀释倍数为8~20倍量，优选16倍量。
[0008]优选的，所述步骤
⑵
供试品溶液中，甲醇稀释倍为16倍量。
[0009]优选的，所述步骤
⑴
混合对照品溶液，所述色谱柱型号为：UltimateLP。
[0010]优选的，所述步骤
⑶
色谱条件，所述检测波长为270nm、0~16min，24~38min；210nm、16~24min，38~100min。
[0011]优选的，所述步骤
⑶
色谱条件，所述检测流速为0.6～1.4mL
•
min
‑
1，柱温为25～35
°
C，进样量为5～15
µ
L。
[0012]优选的，所述步骤
⑶
色谱条件，所述检测流速为1mL
•
min
‑
1，柱温为30
°
C，进样量为10
µ
L。
[0013]优选的，所述步骤
⑷
色谱峰测定，对10批供试品溶液进样分析，将检测数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”，结果计算，得供试品溶液与对照指纹图谱的相似度≥0.93。
[0014]为了突出体现本专利技术参仙升脉口服液含量及其指纹图谱检测方法技术方案创新性，我们将本实验过程中筛选的部分实验提供如下。
[0015]①
、供试品溶液制备方法考察参仙升脉口服液原液为水提液，本实验选用有机溶剂甲醇进行提取和稀释，分别考察了溶剂倍数为2倍、4倍、6倍、8倍和16倍，结果溶剂倍数为16倍时，色谱峰信息较为丰富，峰形较好，且相对峰面积大小较为合适，因此选择提取溶剂为16倍体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种参仙升脉口服液多指标成分检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
⑴
、混合对照品溶液：称取丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、阿魏酸、迷迭香酸、人参皂苷Rg1、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C和淫羊藿苷对照品，加甲醇溶解稀释，混匀，制成混合对照品溶液；
⑵
、供试品溶液：吸取参仙升脉口服液，加甲醇溶解稀释，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；
⑶
、色谱条件：色谱柱为C18，流动相为乙腈（A）和0.2%磷酸水溶液（B），梯度洗脱：0 ~ 15min，5%A；15 ~ 25 min，5% ~ 15%A；25~ 40 min，15% ~ 18%A；40 ~ 45 min，18% ~ 22%A；45 ~ 95 min，22% ~ 25%A；95 ~ 100 min，25% ~ 5%A，所述检测波长为210～270 nm、流速为0.6～1.4mL
·
min
‑1，柱温为25～35
°
C，进样量为5～15
µ
L；、色谱峰测定：将采用上述步骤
⑴
、
⑵
所制得的混合对照品溶液、供试品溶液、注入液相色谱仪，按照上述步骤的色谱条件，测定记录色谱图，即得。2.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述步骤
⑴
混合对照品溶液中，所述丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、迷迭香酸、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C、淫羊藿苷的含量线性范围，分别为32.90 ~ 246.67μg
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mL
‑1、9.60 ~ 71.67μg
•
mL
‑1、57.30 ~ 429.33μg
•
mL
‑1、54.50 ~ 408.00μg
•
mL
‑1、2.70 ~ 20....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘洋，李晔，刘峰，宗时宇，张红，陈衍斌，孙婷婷，王春柳，龙凯花，
申请(专利权)人：山东步长制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：