一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法及其应用技术

一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法，采用供试品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件为，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以0.025‑0.1％的磷酸溶液为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：0‑12min，A：B为5％：95％→10.6％：89.4％，12‑30min，A：B为10.6％：89.4％→15％：85％，30‑65min，A：B为15％：85％→25.5％：74.5％，65‑74min，A：B为25.5％：74.5％→31％：69％，74‑85min，A：B为31％：69％→44.6％：55.4％。本发明专利技术可以有效且全面的对侧柏炭的药物制剂进行检测。

【技术实现步骤摘要】
一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法及其应用
本专利技术涉及中药检测领域，具体涉及一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法。
技术介绍
侧柏炭配方颗粒是通过对中药侧柏炭进行提取、浓缩、制粒所得。侧柏炭为柏科植物侧柏Platycladusorientalis(L.)Franco的干燥枝梢和叶，主要含有挥发油、黄酮类、鞣质类、有机酸类和微量元素等多种成分，主要用于血热所致的各种出血证。《中国药典》2020年版对侧柏炭的质量控制包括原植物品种、饮片炮制、饮片性状、理化鉴别、浸出物含量测定等项目，文献也对侧柏炭中化学成分进行阐述，包括含有挥发油、黄酮类、鞣质类、有机酸类和微量元素等成分。然而，一方面，通过上述单一成分的含量测定或鉴别侧柏炭配方颗粒，不能从整体上检测和控制其质量；另一方面，通过单一成分的含量测定联合其他成分的鉴别侧柏炭配方颗粒，费时、费力，难以广泛地应用于生产实践。而现有技术中，对侧柏炭的质量控制都是针对侧柏炭饮片，并非是针对侧柏炭的药物制剂，现有技术中针对侧柏炭饮片的检测方法并不能适用于侧柏炭的药物制剂。因此，建立一种能够全面地、快速地检测侧柏炭药物制剂的方法，对于其全面质量检测和整体质量控制具有重要意义。
技术实现思路
因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中公开的适用于侧柏炭饮片的检测方法并不能适用于侧柏炭的药物制剂的问题，从而提供一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法及其应用。一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法，采用供试品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以0.025-0.1％的磷酸溶液为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：0-12min，A：B为5％：95％→10.6％：89.4％，12-30min，A：B为10.6％：89.4％→15％：85％，30-65min，A：B为15％：85％→25.5％：74.5％，65-74min，A：B为25.5％：74.5％→31％：69％，74-85min，A：B为31％：69％→44.6％：55.4％。所述色谱条件中还包括检测波长为254nm，柱温为35℃。所述梯度洗脱的程序还包括：85-100min，A：B为44.6％：55.4％→100％：0％。所述梯度洗脱的程序还包括：100-101min，A：B为100％：0％→5％：95％，101-105min，A：B为5％：95％。所述色谱柱为InertsustainC18色谱柱，规格为4.6mm×250mm×5μm，流速为0.8-1.2mL/min。所述供试品溶液的进样量为5-20μL，流速为1.0mL/min。所述供试品溶液的制备方法为：取供试品，精密加入溶剂，密塞，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。所述溶剂为甲醇。一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法在侧柏炭的药物制剂的质量控制中的应用。所述质量控制时，检测图谱中包括至少9个共有峰，该9个共有峰中以槲皮素所在峰为S峰，计算检测图谱中各共有峰与S峰的相对保留时间，该相对保留时间应在规定值的±10％范围之内；规定值为：0.078、0.17、0.19、0.26、0.32、0.33、0.79、1.00、1.14。所述侧柏炭配方颗粒对照特征图谱的相似度大于0.990。本专利技术技术方案，具有如下优点：1.本专利技术提供的检测方法分离度好，可以同时测定原儿茶酸、杨梅素、槲皮素和山柰素的含量，而且该检测方法的精密度较高、稳定性和重复性较好，因此，能够全面地、快速地检测侧柏炭配方颗粒中有效成分及其含量。2.本专利技术提供的检测方法可以选择S峰槲皮素作为指纹图谱中的内参考峰，并且可以确定侧柏炭配方颗粒的9个共有特征峰，并根据S峰槲皮素计算出各个共有特征峰的相对保留时间，有利于侧柏炭配方颗粒的全面质量检测和整体质量控制，从而有助于提高该药物使用的安全性和稳定性。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例1中高效液相色谱得到15批侧柏炭配方颗粒的特征指纹图谱；图2是本专利技术实施例1中15批侧柏炭配方颗粒生成的对照特征指纹图谱；图3是本专利技术实施例1中对照特征指纹图谱与不同特征峰的对照品的定位图；图4是批号1611001W的侧柏炭配方颗粒的精密度实验色谱图；图5是本专利技术实施例2中专属性实验中侧柏炭配方颗粒的特征图谱；图6是本专利技术实施例2中专属性实验中阴性对照溶液的特征图谱；图7是本专利技术实施例3中侧柏炭配方颗粒的特征图谱；图8是本专利技术实施例4中0.025％的磷酸溶液条件的特征图谱；图9是本专利技术实施例4中0.1％的磷酸溶液条件的特征图谱；图10是本专利技术实施例5中0.8mL/min流速下的特征图谱；图11是本专利技术实施例5中1.2mL/min流速下的特征图谱；图12是本专利技术对比例1中15批的侧柏炭配方颗粒进行检测的特征图谱；图13是本专利技术对比例2中330nm的检测波长条件下的特征图谱；图14是本专利技术对比例2中375nm的检测波长条件下的特征图谱；图15是本专利技术对比例3中第(2)号色谱柱检测得到的特征图谱；图16是本专利技术对比例3中第(3)号色谱柱检测得到的特征图谱；图17是本专利技术对比例3中第(4)号色谱柱检测得到的特征图谱；图18是本专利技术对比例4中柱温为30℃条件下的特征图谱；图19是本专利技术对比例4中柱温为40℃条件下的特征图谱。具体实施方式提供下述实施例是为了更好地进一步理解本专利技术，并不局限于所述最佳实施方式，不对本专利技术的内容和保护范围构成限制，任何人在本专利技术的启示下或是将本专利技术与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本专利技术相同或相近似的产品，均落在本专利技术的保护范围之内。本专利技术中所用仪器与试药如下：高效液相色谱仪：Waterse2695色谱系统、G1311B型四元泵、G1367E型自动进样器、G1316A型PDA二极管阵列检测器、G1330B型柱温箱、色谱工作站；天平：METTLERTOLEDO(瑞士梅特勒)XS-205的十万分之一天平，METTLERTOLEDO(瑞士梅特勒)MS36S的十万分之一天平；超声波发生器：SK5200H上海科导超声仪器有限公司；超纯水系统：美国Millipore(密理博)公司；乙腈为色谱纯(德国Merk公司)，水为超纯水(电阻率18.2mΩ.cm)，其他试剂均为分析纯；原儿茶酸对照品(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法，其特征在于，采用供试品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件为，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以0.025-0.1％的磷酸溶液为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：/n0-12min，A：B为5％：95％→10.6％：89.4％，/n12-30min，A：B为10.6％：89.4％→15％：85％，/n30-65min，A：B为15％：85％→25.5％：74.5％，/n65-74min，A：B为25.5％：74.5％→31％：69％，/n74-85min，A：B为31％：69％→44.6％：55.4％。/n

【技术特征摘要】
1.一种侧柏炭的药物制剂的指纹图谱的检测方法，其特征在于，采用供试品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件为，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A、以0.025-0.1％的磷酸溶液为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：
0-12min，A：B为5％：95％→10.6％：89.4％，
12-30min，A：B为10.6％：89.4％→15％：85％，
30-65min，A：B为15％：85％→25.5％：74.5％，
65-74min，A：B为25.5％：74.5％→31％：69％，
74-85min，A：B为31％：69％→44.6％：55.4％。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序还包括：85-100min，A：B为44.6％：55.4％→100％：0％。


3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序还包括：
100-101min，A：B为100％：0％→5％：95％，
101-105min，A：B为5％：95％。


4.根据权利要求1-3任一所述的检测方法，其特征在于，所述色谱条件中检测波长为254nm，柱温为35℃；
所述色谱柱为Inertsus...

【专利技术属性】
技术研发人员：江斌，张辉，谭沛，郑晓英，刘华明，
申请(专利权)人：华润三九医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44