一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法技术

本发明专利技术属于中药质量评价技术领域，公开了一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，包括：采用甲醇回流提取4小时；分别进行供试品溶液的制备和混合对照品溶液的制备；色谱条件选择；以230nm作为咽康含片成分含量测定检测波长并同时作为指纹图谱的检测波长；方法学考察：指纹图谱稳定性试验、指纹图谱精密度试验、指纹图谱重复性试验。本发明专利技术采用HPLC梯度洗脱法建立含片的指纹图，建立HPLC同时测定咽康含片中4种成分的方法，提高了咽康含片的质量可控性，增强产品的市场竞争力，为咽康含片的质量控制与综合评价提供科学的参考依据；在工业生产中可以此为参考建立经济、高效并且适合生产过程的指纹图谱质量控制方案。

【技术实现步骤摘要】
一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法
本专利技术属于中药质量评价
，尤其涉及一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法。
技术介绍
咽康含片，由冬凌草、玄参、甘草、麦冬、薄荷脑等多味药材加工而成的复方制剂，具有清热解毒，养阴利咽之功效，临床用于急慢性咽喉炎治疗。咽康含片现行质量标准(WS-10001-(HD-1136)-2002)的含量测定项目只对薄荷脑进行定量控制，难以全面反映制剂的化学成分特征。经检索，未见有关咽康含片定量控制的文献报道。同时，咽康含片的质量标准也存在问题，现有质量控制标准较为简单，仅局限于二项性状鉴别和对薄荷脑的含量测定，其测定方法的专属性较差，缺乏对制剂主药的定性定量控制，难以全面评价制剂的内在质量，已无法满足中药现代化的发展需要。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：(1)现有技术中关于咽康含片中主药定量控制的方法尚未见报道。(2)现有咽康含片的质量控制标准较为简单，仅局限于二项性状鉴别和对薄荷脑的含量测定，其测定方法的专属性较差，缺乏对制剂主药的定性定量控制，难以全面评价制剂的内在质量，已无法满足中药现代化的发展需要。解决以上问题及缺陷的难度为：现有技术无法针对主药冬凌草进行测定,难以知道咽康含片中有效成分冬凌草甲素的含量。解决以上问题及缺陷的意义为：本专利技术不仅能准确地测定咽康含片中有效成分冬凌草甲素的含量,还能以指纹图谱确保咽康含片的专属性,以防假冒。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法。本专利技术是这样实现的，一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，所述基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法包括：步骤一，提取方法选择：经试验比较，采用甲醇回流提取4小时。步骤二，分别进行供试品溶液的制备和混合对照品溶液的制备。步骤三，色谱条件选择：采用HPLC对咽康含片指纹图谱和多指标成分含量测定进行质量评价。步骤四，含量测定检测波长和指纹图谱检测波长的选择：以230nm作为咽康含片成分含量测定检测波长并同时作为指纹图谱的检测波长。步骤五，方法学考察：指纹图谱稳定性试验、指纹图谱精密度试验、指纹图谱重复性试验。进一步，步骤二中，所述供试品溶液的制备方法包括：(I)取咽康含片粉末8g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量；(II)加热回流提取4小时，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；(III)取续滤液25ml，浓缩至近干，残渣加甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，用0.2μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液，即得。进一步，步骤二中，所述混合对照品溶液的制备方法包括：1)取甘草苷对照品5.33mg、甘草酸铵对照品9.90mg、哈巴俄苷对照品9.36mg和迷迭香酸对照品9.70mg，分别置于10ml容量瓶中，精密称定；2)加甲醇溶解并稀释至刻度，得储备液1、储备液2、储备液3和储备液4；3)分别精密吸取储备液1、2、3、4各1ml于5ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，得混合对照品标准溶液。进一步，步骤三中，所述色谱条件选择包括：采用HPLC对咽康含片指纹图谱和多指标成分含量测定进行质量评价，以5uC18(250×4.6mm，5μm)为色谱柱，流动相为80％乙腈-0.05％磷酸，流速1mL·min-1，梯度洗脱，柱温40℃，进样10μl。进一步，步骤五中，所述方法学考察包括：(1)指纹图谱稳定性试验照供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按0、2、4、6、8、24小时分别进样，测定各指标成分峰面积，结果供试品溶液在24小时内稳定。(2)指纹图谱精密度试验取同一供试品溶液10μl，连续进样6次，测定峰面积，结果6次进样峰面积平均值的RSD％在0.18～0.65之间，说明精密度良好。(3)指纹图谱重复性试验取同一批号(20130624)的咽康含片6份，每份8g，精密称定，照供试品溶液制备方法制备供试品溶液，分别测定个指标成分，计算各指标含量。RSD％在0.2～0.7之间，表明试验的重复性良好。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：本专利技术提供的基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，按照《中药、天然药物研究技术指导原则》和《中药新药质量标准研究的技术要求》，建立了HPLC同时测定咽康含片中原来无法控制的冬凌草甲素、甘草苷、甘草酸铵、迷迭香酸4种成分的方法，进一步提高了咽康含片的质量可控性，增强产品的市场竞争力，为咽康含片的质量控制与综合评价提供科学的参考依据。本专利技术采用HPLC梯度洗脱法建立含片的指纹图，对本品的质量控制提升起到推动作用，在工业生产中可以此为参考建立经济、高效并且适合生产过程的指纹图谱质量控制方案。附图说明图1是本专利技术实施例提供的基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的两种提取方法光谱图与其对照品光谱比较图；图2中：A.索氏提取方法；B.回流提取方法；C.混合对照品；1.甘草苷；2.迷迭香酸；3.冬凌草甲素；4.甘草酸铵。图3是本专利技术实施例提供的各定量成分色谱峰与混合对照品比较图；图3中：A.混合对照品；B.咽康含片(215nm)；C.咽康含片(230nm)；1.甘草苷；2.迷迭香酸；3.冬凌草甲素；4.哈巴俄苷；5甘草酸铵。图4是本专利技术实施例提供的缺冬凌草样品各定量成分色谱峰与其对照品比较示意图；图4中：A.缺冬凌草样品(215nm)；B.缺冬凌草样品(230nm)；C.混合对照品；1.甘草苷；2.迷迭香酸；3.冬凌草甲素；4.哈巴俄苷；5.甘草酸铵。图5是本专利技术实施例提供的缺甘草样品各定量成分色谱峰与其对照品比较示意图；图5中：A.缺甘草样品(215nm)；B.缺甘草样品(230nm)；C.混合对照品；1.甘草苷；2.迷迭香酸；3.冬凌草甲素；4.哈巴俄苷；5.甘草酸铵。图6是本专利技术实施例提供的缺玄参样品各定量成分色谱峰与其对照品比较示意图；图6中：A.缺冬凌草样品(215nm)；B.缺冬凌草样品(230nm)；C.混合对照品；1.甘草苷；2.迷迭香酸；3.冬凌草甲素；4.哈巴俄苷；5.甘草酸铵。图7是本专利技术实施例提供的指纹图谱稳定性考察(215nm)示意图。图8是本专利技术实施例提供的指纹图谱定稳定性考察(230nm)示意图。图9是本专利技术实施例提供的指纹图谱精密度试验(215nm)示意图。图10是本专利技术实施例提供的指纹图谱精密度试验(230nm)示意图。图11是本专利技术实施例提供的重复性试验(215nm)示意图。图12是本专利技术实施例提供的重复性试验(230nm)示意图。图13是本专利技术实施例提供的代表咽康含片样品的HPLC指纹图谱。图14是本专利技术实施例提供的批咽康含片样品指纹图谱。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，其特征在于，所述基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法包括：/n步骤一，采用甲醇回流提取4小时；/n步骤二，分别进行供试品溶液的制备和混合对照品溶液的制备；/n步骤三，采用HPLC对咽康含片指纹图谱和多指标成分含量测定进行质量评价；/n步骤四，以230nm作为咽康含片成分含量测定检测波长并同时作为指纹图谱的检测波长；/n步骤五，指纹图谱稳定性试验、指纹图谱精密度试验、指纹图谱重复性试验。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，其特征在于，所述基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法包括：
步骤一，采用甲醇回流提取4小时；
步骤二，分别进行供试品溶液的制备和混合对照品溶液的制备；
步骤三，采用HPLC对咽康含片指纹图谱和多指标成分含量测定进行质量评价；
步骤四，以230nm作为咽康含片成分含量测定检测波长并同时作为指纹图谱的检测波长；
步骤五，指纹图谱稳定性试验、指纹图谱精密度试验、指纹图谱重复性试验。


2.如权利要求1所述的基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，其特征在于，步骤二中，所述供试品溶液的制备方法包括：
(1)取咽康含片粉末8g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量；
(2)加热回流提取4小时，放冷再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；
(3)取续滤液25ml，浓缩至近干，残渣加甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，用0.2μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。


3.如权利要求1所述的基于水提工艺的咽康含片的质量测定方法，其特征在于，步骤二中，所述混合对照品溶液的制备方法包括：
1)取甘草苷对照品5.33mg、甘草酸铵对照品9.90mg、哈巴俄苷对照品9.36mg和迷迭香酸对照品9.70mg，分别置于10ml容量瓶中，精密...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘智，付荻秋，李晓菲，李明，
申请(专利权)人：贵州医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：贵州;52