【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及放射免疫反应中快速检测待测抗原浓度的方法。
技术介绍
放射免疫反应(RIA)是标记抗原4Ag和非标记抗原Ag(待测抗原或其标准品)对有限量的特异性抗体Ab进行竞争性结合反应,终产物中标记抗原抗体复合物的放射性强度与非标记抗原的含量呈逆相关的数学关系。示意图-1如下*Ag+Ag+Ab *Ag-Ab+Ag-Ab*Ag-Ab代表标记抗原抗体复合物,Ag-Ab代表非标记抗原抗体复合物。在上式的反应体系中-Ag和Ag彼此竞争与有限量的Ab起结合反应,分别形成相应的复合物。,Ag和Ag的免疫性完全相同,对Ab具有同样的亲和力,当+Ag与Ab为恒量,*Ag与Ag的总量大于Ab上的有效结合位点时,*Ag、 Ag、 Ab三者混合后,*Ag-Ab的形成量与Ag量成反比,剩下的未结合或游离的*八8则与Ag成正比。因此,在反应达到平衡时*八§的放射性强度按一定比例在游离(F)和结合(B)两种状态之间。如Ag量增加,将抑制*八8与八5的结合,游离的*Ag量相对增加,Ag-Ab的形成量则增加。由此测定*Ag_Ab或Mg的放射性强度,即可推算出未Ag的量。这种现象称竞争结合反 ...
【技术保护点】
一种时间竞争放射免疫反应检测待测抗原浓度的方法,其特征在于,采用足量浓度的抗体,用对倍稀释法稀释成不同倍数浓度的抗体,分别与标记抗原进行放射免疫反应,测定放射性强度,找出最大结合率B↓[0]在75-95%的稀释倍数浓度的抗体;用此稀释倍数浓度的抗体再与标记抗原进行放射免疫反应,测放射性强度,找出最大结合率在30-60%范围内的恒温温育时间T;用此温育时间T和最大结合率在75-95%的稀释倍数浓度的抗体进行放射免疫反应,测定待测抗原浓度;所述足量浓度的抗体是指能与标记抗原进行充分放射免疫反应的抗体;所述的最大结合率是指固定量标记抗原与抗体反应,结合达到平衡后,分离抗原的结合部 ...
【技术特征摘要】
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