用于在放射免疫疗法之前测定血液学毒性的新临床参数制造技术

报道了新的临床参数，它们可以充当与放射性标记的治疗性抗体有关的血液学毒性的预报变量，特别是定向具有定位于骨髓趋势的淋巴瘤细胞的那些抗体。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术报道用于预报血液学毒性的新临床参数，这能够根据放射性标记的治疗性抗-CD20抗体以及其他具有定向免疫细胞潜力的治疗性抗体给药加以预测。本专利技术的临床参数是在治疗之前用γ-放射性标记的抗体进行剂量测定法试验的有用的替代选择。
技术介绍
脊椎动物(例如灵长动物，包括人、无尾猿、猴等)的免疫系统由大量器官和细胞类型组成，它们已经进化为准确和特异性地识别侵入脊椎动物宿主的外来微生物(“抗原”)；特异性地与这类外来微生物结合；消除/破坏这类外来微生物。淋巴细胞以及其他细胞类型对免疫系统起决定性作用。淋巴细胞是在胸腺、脾和骨髓(成年)中产生的，占到人(成年)循环系统中总白细胞的约30％。淋巴细胞有两种主要的亚种群T细胞和B细胞。T细胞负责细胞介导的免疫，B细胞负责抗体的产生(体液免疫)。不过，T细胞和B细胞可以被认为是相互依赖的——在典型的免疫应答中，抗原片段与抗原呈递细胞表面上的主要组织相容性复合体(“MHC”)糖蛋白结合，当T细胞受体再与该抗原片段结合时，T细胞被活化；这类活化导致生物递质(“白介素”)的释放，它从本质上刺激B细胞分化和产生对抗该抗原的抗体(“免疫球蛋白”)。宿主内的每个B细胞在其表面上表达不同的抗体——因而一个B细胞将表达一种抗原特异性的抗体，另一个B细胞将表达不同抗原特异性的抗体。因此，B细胞是相当多样的，这种多样性对免疫系统起决定性作用。在人类中，每个B细胞能够产生大量的抗体分子(即约107至108个)。当外来抗原已被中和时，这类抗体产生大多通常停止(或者基本上减少)。不过，特定B细胞的增殖偶尔将继续不减弱；这类增殖能够导致被称为“B细胞性淋巴瘤”的癌症。T细胞和B细胞都包含细胞表面蛋白，它们能够用作分化和鉴定的“标记”。一种这类人B细胞标记是人B淋巴细胞限制性分化抗原Bp35，称为“CD20”。CD20是一种B淋巴细胞限制性分化抗原，它在前B细胞发育早期被表达，并保留至血浆细胞分化。有人认为CD20分子可以调节B细胞活化过程中细胞周期引发与分化所需的步骤。而且，CD20通常在瘤性(“肿瘤”)B细胞上被高水平表达。CD20抗原满足定向疗法的要求，因为它不脱落、调制或内在化。因而，CD20表面抗原是B细胞性淋巴瘤“定向”的有力候选。本质上，这类定向可以概括如下将B细胞的CD20表面抗原特异性抗体例如注射给患者。这些抗-CD20抗体特异性地结合(表面上)正常与恶性B细胞的CD20细胞表面抗原；与CD20表面抗原结合的抗-CD20抗体可以引起瘤性B细胞的破坏和消耗。另外，具有破坏肿瘤潜力的化学试剂或放射性标记能够与抗-CD20抗体缀合，以便试剂被特异性地释放至例如瘤性B细胞。无论什么方法，主要目标都是破坏肿瘤所采用的特定抗-CD20抗体决定了具体方法，因而，可用于定向CD20抗原的方法可能是各不相同的。例如，已经报道了针对这种CD20表面抗原定向所作的努力。据报道将鼠(小鼠)单克隆抗体1F5(一种抗-CD20抗体)通过连续静脉内输注对B细胞性淋巴瘤患者给药。据报道为消耗循环中的肿瘤细胞需要极高水平(＞2克)的1F5，结果被描述为“瞬时的”。Pres s等“人B细胞性淋巴瘤的单克隆抗体1F5(抗-CD20)血清疗法”《血液》69/2584-591(1987)。这种方法的潜在问题是非人类单克隆抗体(例如鼠单克隆抗体)通常缺乏人效应器功能性，也就是它们尤其不能通过抗体依赖性细胞毒性或Fc-受体介导的吞噬作用介导补体依赖性溶胞作用或者溶解人靶细胞。此外，非人类单克隆抗体可能被人宿主识别为外来蛋白质；因此，这类外来抗体的反复注射可能诱导引起有害过敏反应的免疫应答。关于基于鼠的单克隆抗体，这经常被称为人抗小鼠抗体应答，或“HAMA”应答。另外，这些“外来”抗体可以受到宿主免疫系统的攻击，以致它们实际上在到达它们的靶部位之前即被中和。一种致力于补偿鼠抗体效应器功能缺乏的方法是将这类抗体缀合在毒素或放射性标记上。淋巴细胞和淋巴瘤细胞天生对放射疗法敏感。因此，B细胞恶性肿瘤是放射免疫疗法(RIT)的有力目标，这有若干原因放射性标记抗体电离放射的局部发射可以杀死带有或没有靶抗原(例如CD20)的细胞，靶抗原非常靠近与抗原结合的抗体；穿透辐射、即β发射体可以避免在庞大或多血管化肿瘤中接近抗体有限的问题；可以减少所需抗体总量，从而减轻潜在HAMA应答的严重性。放射性核素发射放射性粒子，能够损害细胞DNA至细胞修复机理不能使细胞继续存活的程度；因此，如果靶细胞是肿瘤，那么放射性标记有益于杀死肿瘤细胞。按照定义，放射性标记抗体包括放射性物质的使用，这可能要求预先警告患者(即可能的骨髓移植)以及健康护理人员(也就是在放射性条件下工作时需要高度谨慎)。现已公开了大量特异性抗体可与放射性标记或毒素缀合，以便该标记或毒素定位于肿瘤部位。例如，上述IF5抗体已经用碘-131(131I)“标记”，据报道评价了两名患者的生物分布。参见Eary，J.F.等“B细胞性淋巴瘤的造影与治疗”《核医学杂志》31/81257-1268(1990)；另见Press，O.W.等“用放射性标记的MB-1(抗-CD37)抗体治疗顽固性非何杰金氏淋巴瘤”《临床肿瘤学杂志》7181027-1038(1989)(指出用131I标记IF5治疗的一名患者达到“部分应答”)；Goldenberg，D.M.等“用碘-131标记LL2单克隆抗体定向B细胞性淋巴瘤和剂量测定法与放射免疫疗法”《临床肿瘤学杂志》9/4548-564(1991)(据报道接受多次注射的八名患者中有三名发展为HAMA应答)；Appelbaum，F.R.“非何杰金氏淋巴瘤治疗中的放射性标记单克隆抗体”《Hem./Onc.Clinics of N.A.》5/51013-1025(1991)(评论文章)；Press，O.W.等“带有自体骨髓支架的B细胞性淋巴瘤的放射性标记抗体疗法”《新英格兰医学杂志》329/171219-1223(1993)(碘-131标记的抗-CD20抗体IF5和B1)；Kaminski，M.G.等“使用131I抗-B1(抗-CD20)抗体的B细胞性淋巴瘤的放射免疫疗法”《新英格兰医学杂志》329/7(1993)(碘-131标记的抗-CD20抗体B1；另见Kaminski的美国专利No.5,843,398)。还已将毒素(即化学治疗剂，例如阿霉素或丝裂霉素C)与抗体缀合。例如参见PCT公布的申请WO 92/07466(1992年5月14日公布)。美国申请08/475,813、08/475,815和08/478,967引用在此作为参考文献，其中公开了用于定向和破坏B细胞性淋巴瘤和肿瘤细胞的放射性标记的治疗性抗体。特别是公开了Y2B8抗体，它是一种抗人CD20鼠单克隆抗体2B8，经由双官能螯合剂MX-DTPA与钇-[90](90Y)连接。选择这种放射性核素用于治疗有若干原因。90Y长达64小时的半衰期足以允许肿瘤的抗体蓄积，例如不象131I，它是一种高能的纯β发射体，在其衰退中不伴有γ辐射，范围为100至1000个细胞直径。最小穿透放射量允许90Y标记抗体对门诊病人给药。此外，杀死细胞不要求标记抗体的内在化，电离放射的局部发射对缺乏靶抗原的相邻肿瘤细胞应当是致命性的。涉及螯本文档来自技高网...

【技术保护点】
预报由放射性标记的抗体对癌症患者给药所致血液学毒性的严重性并且制止或减少该血液学毒性的方法，包含：（ａ）测量基线活组织检查中的骨髓牵连程度；和（ｂ）如果所述基线骨髓牵连程度高于５％，那么将治疗学上有效量非标记的消耗抗体给药， 以便所述骨髓牵连程度减少至小于５％。

【技术特征摘要】
US 1999-8-11 60/148,288;US 2000-7-26 09/625,8561.预报由放射性标记的抗体对癌症患者给药所致血液学毒性的严重性并且制止或减少该血液学毒性的方法，包含(a)测量基线活组织检查中的骨髓牵连程度；和(b)如果所述基线骨髓牵连程度高于5％，那么将治疗学上有效量非标记的消耗抗体给药，以便所述骨髓牵连程度减少至小于5％。2.权利要求1的方法，其中所述癌症患者患有淋巴瘤或白血病型癌症。3.权利要求2的方法，其中所述非标记的消耗性抗体是人的、嵌合的、结构域缺失的或人化抗体。4.权利要求3的方法，其中所述抗体是一种抗-CD20抗体。5.权利要求4的方法，其中所述抗-CD20抗体是一种人的、嵌合的或人化抗体。6.权利要求5的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体是Rituximab。7.权利要求5的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按至少50mg/m2的剂量给药至少一次。8.权利要求7的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按每周至少50mg/m2的剂量给药至少两周。9.权利要求8的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按每周约100至约500mg/m2的剂量给药至少两周。10.权利要求9的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按每周约375mg/m2的剂量给药至少四周。11.用放射性标记的治疗性抗体治疗癌症患者的改进方法，所述改进包含(a)使用基线骨髓活组织检查作为血液学毒性的指征；和(b)根据最初的骨髓牵连百分比，将治疗学上有效量的放射性标记的抗体给药。12.权利要求11的改进方法，其中所述癌症患者患有淋巴瘤或白血病型癌症。13.权利要求12的方法，如果最初的骨髓牵连百分比大于5％，那么进一步包含将一定剂量或剂量方案的未标记抗体先于放射性标记的抗体给药。14.权利要求13的方法，如果最初的骨髓牵连百分比大于15％，那么进一步包含将最初剂量或剂量方案的未标记抗体先于放射性标记的抗体给药。15.权利要求14的方法，如果最初的骨髓牵连百分比大于25％，那么进一步包含将最初剂量或剂量方案的未标记抗体先于放射性标记的抗体给药。16.权利要求11的方法，其中所述放射性标记的抗体是一种抗-CD20抗体。17.权利要求16的方法，其中所述放射性标记的抗-CD20抗体是用α-或β-发射性同位素标记的。18.权利要求17的方法，其中所述放射性标记的抗-CD20抗体是用β-发射性同位素标记的。19.权利要求18的方法，其中所述β-发射性同位素是90Y或131I。20.权利要求19的方法，其中所述放射性标记的抗体是Y2B8。21.权利要求13的方法，其中的未标记抗体是一种抗-CD20抗体。22.权利要求21的方法，其中所述未标记抗-CD20抗体是人的、嵌合的、结构域缺失的或人化抗体。23.权利要求22的方法，其中所述抗体是嵌合抗-CD20抗体。24.权利要求23的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体是Rituximab。25.权利要求23的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按至少50mg/m2的剂量给药至少一次。26.权利要求25的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按每周至少50mg/m2的剂量给药至少两周。27.权利要求26的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按每周约100至约500mg/m2的剂量给药至少两周。28.权利要求27的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗体按每周约375mg/m2的剂量给药至少四周。29.权利要求1的方法，其中如果所述基线骨髓牵连程度高于15％，那么将所述治疗学上有效量的非标记消耗性抗体给药，以便所述骨髓牵连程度减少至小于15％。30.权利要求1的方法，其中如果所述基线骨髓牵连程度高于25％，那么将所述治疗...

【专利技术属性】
技术研发人员：W拉斯泰特，C怀特，
申请(专利权)人：拜奥根IDEC公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]