用于进行凝集测定的容器制造技术

本发明专利技术公开了一种用于进行血细胞凝集测定的容器。一个屏障在温育期间将反应剂保留在上室中，然后，响应一个力的作用，使试剂进入含有用于分离凝集物的基质的下室。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及凝集测定法领域，尤其涉及用于进行凝集测定并分离凝集物的容器。血型血清学需要在给病人输血或器官移植之前测定供血者和受血者之间的血细胞相容性。通过证实病人血清中含有的抗体与来自供血者的血细胞中的抗原之间无免疫反应而测定细胞的相容性。在每个个体的红血球的表面上发现许多不同的血型抗原。血型鉴定通常是检验红血球以便测定抗原是否存在的过程。通常利用已知特异性的抗体来完成这个过程。为了检验病人的血清或血浆中的抗体，将含有具有已知抗原的血细胞的试剂与血清样品混合。将反应物温育一段时间，当针对那些抗原的抗体存在时，这段时间足以使红血球发生凝集。然后将混合物离心，如果存在被凝集的红血球，那么在反应容器的底部可清晰地目视到这些凝集物，这样就表明样品中存在直接针对红血球上已知抗原的抗体。如果样品中不存在直接针对红血球上已知抗原的抗体，就不会发生凝集，这表明离心以后没有凝集的红血球。
技术介绍
最近，业已研究出这样的系统即在一部分容器中进行凝集反应，而在同一容器的另一部分中利用一种将被凝集的细胞从试剂/样品混合物的其它组分中分离出来的基质来分离所凝集的红血球。在共同待审查中的美国专利申请No.08/407,747和08/112,402中公开并描述了这样一个系统，这两篇文献是号申请号为08/023,500的美国专利(现在已放弃)的后续申请，这些申请一般为本申请的占有者所拥有。因此每篇申请的内容在此一并作为参考。按照本专利技术的凝集反应和分离容器也可用于前述申请文本中所公开的专利技术中，是由Ortho Diagnostic SystemsInc.，Raritan，New Jersey，under thetrademark BIOVUETM制造和销售的。这样的反应容器是具有一个上室和一个下室的柱形，其中上室的直径比下室大。下室含有用于将凝集细胞从未凝集细胞中分离出来的基质。下室的直径窄得足以在将试剂和样品加入到上室中时(典型地是用移液管加入)，如果不施加额外的力，试剂和样品就像留在上室中，而不会进入下室。间接抗球蛋白试验(称作库姆斯试验)是一个用于测定病人血清中是否具有针对红血球表面上特异性抗原IgG抗体的血液试验。在库姆斯试验中，在存在红血球试剂的情况下温育血清，以便使抗体与红血球表面上的抗原结合。这些IgG抗体本身几乎不会使红血球凝集，或者只稍微凝集，不足以用常规技术目视检验。通常需要加入针对人IgG的第二抗体，以便易于得到可观测的凝集。在红血球分型中，一个血液试验用于测定红血球表面是否存在特定抗原，将待分析的红血球加入到上室中，随后施加一个力，例如离心力，使红血球进入含有针对特定红血球抗原的抗体和分离基质的下室。如果红血球在其表面具有与下室中的特异性抗体结合的抗原，则形成凝集物，并用基质分离凝集物。在其它类型的血液测定法中(例如反向分型)，是测定病人血清中直接凝集的、针对红血球抗原的抗体，将病人血清和其表面具有已知抗原的红血球试剂加入到上室中，并且施加一个力(例如离心力)，以使反应物进入含有液体介质和分离基质但无抗体的下室。在此测定中，病人血清中所存在的直接凝集的抗体产生利用基质分离的凝集物。在另一种类型的血液测定中，使具有已知的针对红血球抗原的特异性的抗体试剂与病人的红血球一起沉积在上室中。如果抗体试剂是直接凝集抗体，则施加一个力(例如离心力)，而没有以前的温育过程，内含物被压到下室中，下室含有处于水溶液中的分离基质。然后用基质分离凝集物。另外，还可使病人的红血球沉淀在上室中并加入具有已知特异性的IgG抗体试剂，随后进行温育，以便使抗体结合到红血球表面上预定的抗原上。温育以后，施加一个力(例如离心力)，以便使反应物进入下室，下室含有分离基质和特异于用于温育上室中的红细胞的IgG抗体试剂的抗-IgG抗体。如果抗体试剂存在于病人的细胞表面上，则下室中的抗-IgG抗体易于形成利用基质分离的凝集物。在将样品和试剂温育一段足够的时间，以便发生直接凝集(如在细胞分型试验中)或抗体-抗原反应(如在库姆斯试验中)之后通过离心给反应容器加压，从而使反应物被挤到柱的下部并在分离基质上。离心的结果是，未凝集的物质通过分离基质向下迁移，而所凝集的细胞保留在分离基质的上面或者根据凝集程度在基质内分布。较强的凝集反应导致细胞保留在接近分离基质的上部位置上，而较弱的凝集反应导致凝集物分布在与基质上面具有各种不同距离的位置上。温育期间样品和试剂之所以保留在柱的上部是穿过柱下部的端头的表面张力的结果，其中柱下部的直径相对于上部是减小的。业已指出用此柱进行测定时两个潜在的误差源。首先，如果用过渡的力将试剂和样品直接滴到反应室的中心，则反应物可直接沉淀在下室中的分离基质上面并且在温育期间没有保留在上室中。这样，反应物在完成凝集之前开始进入分离基质。其次，含有分离基质的稀释剂或溶液有可能进入上室。例如在运送或操纵容器时通过泼溅或其它干扰能产生此误差。在含有分离基质的溶液或稀释剂还有抗体或其它直接影响试验结果的试剂时，这样的泼溅会导致用来自其它柱的某些试剂对柱造成交叉污染。此现象发生在当使用者将移液管尖头插入反应室时，泼溅的试剂污染了尖头，此尖头然后又通过移液管转移到另一容器中。这可导致凝集测定中的错误结果。
技术实现思路
因此，本专利技术的一个目的是提供一种在凝集测定的温育期间保持样品和试剂分离的改进的机构。本专利技术的再一个目的是提供用于防止柱下部中含有的物质移位的装置。本专利技术提供了一种改进的用于进行凝集反应并分离凝集物的容器。该容器包括一个容纳反应物的上室、一个分离凝集物的下室和一个分离腔室的屏障装置，此屏障在将上室的内含物引入到分离基质上之前，能使反应物保留在上室中，并且当一个力(即，大于大气压力)施加到屏障上时，可使上室的内含物从上室迁移到下室中。在一个优选的实施例中，该屏障在上下室之间包括一个狭窄的通路。在制造期间通过将具有狭孔的插件、卷边或螺旋形或其它类似几何形状的插件浇铸或插入上下室之间可形成狭窄通路。这种插件提供了一个可减小下、下室之间的孔尺寸的物理屏障，从而避免下室的内含物污染上室。而且，插件还使样品和试剂在温育时分离。当插件是螺旋形时，由螺旋的螺丝、中心轴和柱壁限定的通路小得足以在正常重力和大气压力下次地液体保留在上室中。例如，螺旋形插件的直径在大约0.110-0.140英寸的范围内。螺旋形插件轴的直径大约为0.030-0.090英寸。螺旋形插件每英寸大约有6-30个螺纹。通过对柱进行超声焊接，随后用试剂装载柱也可形成狭窄通路。通路还可包含一个隔板形屏障。在本实施例中，隔板有一个小得足以在正常重力和大气压力下将流体保留在上室中的中心孔。隔板最好是硅橡胶的。通路还可包含一个多孔塞形的屏障。多孔塞具有穿过其的通路，这些通路小得足以在正常重力和大气压力下将流体保留在上室中。多孔塞最好是聚乙烯的。在另一个实施例中，本专利技术包括一个衬套，该衬套是具有一个穿过狭窄尖端的孔的锥形部件形式。在将样品吸移到容器中之前，此衬套被放置在尖端并伸入反应容器柱，从而避免了一个容器中的稀释剂或溶液进入另一容器而造成的交叉污染，否则，在移液过程中另一容器可能被交叉污染。在吸移试剂之前最终用户便利地将所述衬套插到柱的顶端。衬套可是具有六个并排排列的锥形部件或池子的一个单本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于进行凝集测定的容器，包括：　　　　ａ）一个具有一用于接收流体反应剂的开口的上室；　　　　　ｂ）一个用于接收来自上室的流体并含有用于分离凝集物的基质的下室；以及　　　　ｃ）一个将上室和下室分开的屏障，此屏障在正常的重力和大气压条件下可将流体保持在上室中，而在大于大气压力的压力下可使流体从上室流入下室，这种屏障包括一种螺旋形结构。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：W米尔彻尼奥斯基，M祖列克，KJ雷斯，DE比尔托尔德，L戴维斯，TM塞卡维杰，DM戴维斯，
申请(专利权)人：奥索临床诊断有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]