HCVF蛋白质和其用途制造技术

源于ＨＣＶ　　Ｆ蛋白质的分离的免疫原性肽和相应的核酸、抗体、组合物、疫苗和微阵列。这些产物被用于预防、治疗和诊断ＨＣＶ感染以及用于ＨＣＶ重组多肽的生产。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及肽和相应的核酸以及其在预防、治疗和诊断丙型肝炎病 毒(HCV)感染中的应用，并且尤其涉及源于HCV F蛋白质的肽和相 应的核酸、其制备方法、以及其在预防、治疗和诊断HCV感染中的应 用。
技术介绍
由CD4+辅助性T细胞(Th )和CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL) 构成的细胞介导的免疫应答构成在宿主中能够控制HCV复制的主要机 制[l-4。由于重叠的传播途径和靶群体，很大比例的慢性丙型肝炎病毒 (HCV)携带者也受到I型人免疫缺陷病毒(HIV-1)的感染，这显著 地恶化了成年患者中HCV疾病的预后[5, 6。认为这至少部分地是由 HIV-1对HCV特异性体液和细胞介导免疫的抑制而造成的[7-9。利用选 择性读码框(alternate reading frames )由病毒或细胞基因产物的翻译所 产生的隐蔽表位已知将会引起这样的反应，并且最近已证实在某些形式 的人癌症中其是肿瘤特异性抗原的重要来源[10，11。细菌、植物和动物 的各种RNA和DNA病毒使用重叠的开放读码框(ORF)以弥补大小限 制对病毒基因组的影响和/或调节病毒蛋白质的表达。同样地，HCV编 码选择性144-162个氨基酸、17kDa的未知功能多肽，其被称为F蛋白 质或选择读码框蛋白(ARFP)，其来自核心基因的5，部分[12-14。F蛋 白质在转染细胞中表达[15并且能够被分离自HCV感染患者的血清和T 细胞所识别，这表明它是^体内产生的[13,14， 16， 17。由于HCV感染和相关疾病的流行和负面影响，因此需要开发用于预 防、治疗和诊断HCV感染的方法和药剂。专利
技术实现思路
本专利技术涉及源自HCVF蛋白质的表位和其应用。"HCV F蛋白质"在本领域中也被称为"选择性读码框蛋白质 (ARFP)" [14。这两个术语在意思上是等同的并且在本文中可互换使 用。在第一方面，本专利技术提供源于HCVF蛋白质的分离的免疫原性多肽， 前提是所述多肽不是列于SEQ ID NO: 8的全长HCV F蛋白质。在一个实施方案中，HCV F蛋白质来源于不同于HCV-lb的HCV 亚型。在另一个实施方案中，HCVF蛋白质源于选自HCV-la、 HCV-2a、 HCV-3a、 HCV誦4a、 HCV-5a和HCV-6a的HCV亚型。在一个实施方案中，根据表16中所规定的HCV F蛋白质内的起始 和终止位置来定义所述多肽。在某些实施方案中，本专利技术的多肽或表位包含具有以下通式I的氨 基酸序列(见表14):X、x2-X3-X4誦x5画x6-X7-X8-X9-X"-X"-XU画X"画X"-X"國X"-nX"誦x20誦^^21 ^^22 ^^23其中，Xi选自V、 A和D或者缺失；XZ是R或者缺失；X"是S或者缺失；X"是L或者缺失；xs选自V和A或者缺失；XS是E或者缺失；乂7选自F和Y或者缺失；XS是T或者缺失；X9是C;X11是R; X"是A;X"选自G和R或者缺失；X"是A或者缺失；X"选自L、 P和H或者缺失；X"选自D、 G和N或者缺失；X"是W或者缺失；X"是V或者缺失；X^选自C和S或者缺失；X^是A或者缺失；X21是R或者缺失；X22选自R、 Q和L或者缺失；和X23选自E、 G和V或者缺失。在另一些实施方案中，本专利技术的多肽或者杀^位包含具有以下通式II的 絲,列(见表15):Z、Z2國Z3画Z4-ZS國Z6-Z7誦Z8画Z9-ZW画ZH画ZU國Z"-Z"画Z15其中，W选自P和H或者缺失； Z2选自V、 E和E或者缺失； Z'选自V和A或者缺失；Z-选自L和P或者缺失； Z5选自G、 V和D或者缺失； Z6选自L、 P、 H和R或者缺失； Z7选自A、 L、 P、 I、 T和V或者缺失； Z8是G;Z"选自P和Q; Z"选自Q和M;Z"是P;Z"选自G和A;Z"选自V、 I和G。在一个实施方案中，所述肽选自(a)包含选自SEQIDNO: 9、 11、 12、 14至38、 51至103和/或122至128的氨基酸序列的多肽；和/或(b ) (a)的功能性变体或片段，其中所述功能性变体或片段具有免疫相关活 性。在一个实施方案中，所述免疫相关活性选自(i)诱导抗HCV的免 疫应答；(ii)诱导T细胞裂解活性；(iii)结合人白细胞抗原(HLA) 或MHCI类分子；(iv)与来自HCV感染对象的血清的免疫反应性；(v) 改变细胞因子或趋化因子的表达或产生；以及(vi) (i)至(v)的任何 组合。在一个实施方案中，所述HLA分子是HLA-A分子(例如 HLA-A*0201分子)。在一个实施方案中，所述多肽长度为50个氨基酸或更短。在一个实施方案中，所述多肽基本由选自SEQIDNO: 9、 11、 12、 14至38、 51至103和/或122至128的^J^酸序列所组成。在一个实施方案中，所述多肽是重组的。在另外的一个方面中，本专利技术提供包含上述多肽的制备物，其中所述制备物基本没有除HCVF蛋白质之夕卜的HCV蛋白质。在一个实施方案 中，所述除HCVF蛋白质以外的HCV蛋白质是HCV核心蛋白质。在另外的一个方面中，本专利技术提供分离的HCV F蛋白质的肽表位 (peptide epitope )，其中所述肽表位具有免疫相关活性，前提是所述肽 表位不是列于SEQIDNO: 8的全长HCVF蛋白质。在一个实施方案中，所述免疫相关活性选自(i)诱导T细胞裂解 活性；(ii)结合人白细胞抗原(HLA)或者MHCI类分子；(iii)与来 自HCV感染对象的血清的免疫反应性；(iv)改变细胞因子或趋化因子 表达或产生；以及(v) (i)至(iv)的任何组合。在某些实施方案中，所述分离的肽表位基本上由选自SEQIDNO: 9、 11、 12和/或122至128的氨基酸序列的约8至约50个连续氨基酸所 组成，在另一些实施方案中，其基本上由选自SEQ ID NO: 9、 11、 12 和/或122至128的氨基酸序列的约8至约15个连续氨基酸所组成，在 另一些实施方案中，其基本上由选自SEQIDNO: 9、 11、 12和/或122 至128的氨基酸序列的9、 10或15个连续氨基酸所组成。在另一些实施方案中，所述分离的肽表位包含选自SEQIDNO: 9、11、 12、 14至38、 51至103和/或122至128的氨基酸序列。在另一个 实施方案中，所述分离的肽表位包含添加至选自SEQ ID NO: 9、 11、12、 14至38、 51至103和/或122至128的氨基酸序列的另外1-15个氨 基酸，在另一个实施方案中包含添加至选自SEQ ID NO: 9、 11、 12、 14至38、 51至103和/或122至128的氨基酸序列的另外1至30个氨基 酸。在另一个实施方案中，所述分离的肽表位基本上由选自SEQ ID NO: 9、 11、 12、 14至38、 51至103和/或122至128的氨基酸序列所组成。在另一方面中，本专利技术提供包含上述分离的多肽或肽表位以及药用 可接受载体的药物组合物。在一个实施方案中，所述组合物还包含辅剂。 在一个实施方案中，所述组合物还包含MHC分子。在另一方面中，本专利技术提供包含上述分离的多肽或肽表位以及辅剂 的组合物。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种源于ＨＣＶＦ蛋白质的分离的免疫原性多肽，条件是所述多肽不是列于ＳＥＱＩＤＮＯ：８的全长ＨＣＶＦ蛋白质，进一步的条件是所述ＨＣＶＦ蛋白质源于不同于ＨＣＶ－１ｂ的ＨＣＶ亚型。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡戈苏戴恩斯，迈里亚姆特勒施，埃米莉贾尔伯特，
申请(专利权)人：瓦勒瑞萨欣HSJ有限合伙公司，
类型：发明
国别省市：CA[]