衍生化气相色谱-质谱联用测定药物中硫酸二甲酯的方法技术

本发明专利技术公开了一种衍生化气相色谱‑质谱联用测定药物中硫酸二甲酯的方法；在药物样品中添加衍生化溶液，将硫酸二甲酯衍生为碘甲烷，通过气相色谱‑质谱联用检测碘甲烷的含量来得到硫酸二甲酯的含量；所述衍生化溶液为添加微量硫代硫酸钠的饱和碘化钠水溶液。采用本发明专利技术的方法能够实现药物中遗传毒性杂质硫酸二甲酯含量的准确测定，具有操作方便，能够降低非挥发性药物基质的干扰等诸多优点。

【技术实现步骤摘要】
衍生化气相色谱-质谱联用测定药物中硫酸二甲酯的方法
本专利技术属于医药检测
，涉及一种衍生化气相色谱-质谱联用测定药物中硫酸二甲酯的方法，尤其涉及一种采用在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中遗传毒性杂质硫酸二甲酯含量的方法。
技术介绍
遗传毒性杂质是一种DNA反应性物质，能够造成DNA损伤从而引起突变，并且有可能诱发癌症。为保障患者的用药安全，需要对药物中的遗传毒性杂质予以关注并进行控制。硫酸二甲酯是一种强有力的甲基化试剂，广泛应用于药物及其中间体的化学合成中，当硫酸二甲酯直接应用于药物合成中时，则有可能存在未被完全清除而残留于药物中的风险。硫酸二甲酯进入人体后，其强力的化学反应性将转化为强有力的生物活性，从而导致基因突变并可能对人体产生致癌作用。因此，建立准确、耐用的分析检测方法对药物中的硫酸二甲酯进行定量测定至关重要。目前对硫酸二甲酯的的检测方法主要有气相色谱法、液相色谱法及液相色谱-质谱联用法，但由于硫酸二甲酯无紫外吸收基团，极性大，稳定性差，因此准确测定药物中残留的痕量硫酸二甲酯极具挑战性。通过对现有专利文献的检索发现，CN109696509A公开了一种液质联用检测药品中硫酸二甲酯残留的方法，该方法将氨基比林作为衍生剂，与药品中硫酸二甲酯残留反应生成甲基化氨基比林，液质联用仪通过检测甲基化氨基比林间接检测药品中硫酸二甲酯残留。然而，其衍生反应时间长(2小时)，且在检测甲基化氨基比林的过程中难以避免其他药物基质的干扰，进而影响检测的专属性、精确度。
技术实现思路
<br>针对上述问题，本专利技术的目的在于提供了一种专属、耐用的在线衍生化的气相色谱-质谱联用测定药物中硫酸二甲酯的方法；将硫酸二甲酯衍生转化为挥发性的碘甲烷，通过检测碘甲烷的含量来反映硫酸二甲酯的含量，从而实现药物中遗传毒性杂质硫酸二甲酯含量的准确测定，具有操作方便，能够降低非挥发性药物基质的干扰等诸多优点。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：本专利技术涉及一种在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中硫酸二甲酯含量的方法，在药物样品中添加衍生化溶液，将硫酸二甲酯衍生为碘甲烷，通过气相色谱-质谱联用检测碘甲烷的含量来得到硫酸二甲酯的含量；所述衍生化溶液为添加微量硫代硫酸钠的饱和碘化钠水溶液。进一步的，在药物样品中添加衍生化溶液和乙腈制得供试品溶液；将硫酸二甲酯对照溶液和供试品溶液注入气相色谱-质谱联用仪，照外标法以碘甲烷峰面积计算得供试品溶液中硫酸二甲酯的含量；所述硫酸二甲酯对照溶液由硫酸二甲酯乙腈溶液和衍生化溶液配制而得。进一步的，所述衍生化溶液中含碘化钠1.01～1.21g/mL，硫代硫酸钠0.0004～0.0006g/mL。在本专利技术的体系中，碘化钠浓度过低时，可能衍生不完全，过高时，碘化钠已经达到饱和；硫代硫酸钠过低时，可能无法保证碘化钠不被氧化，过高时，可能会导致衍生产物的降解。进一步的，每0.04g药物样品中添加1mL衍生化溶液和1mL乙腈，得供试品溶液；每1mL100ng/mL的硫酸二甲酯乙腈溶液加入1mL衍生化溶液，得硫酸二甲酯对照溶液。进一步的，采用顶空气相色谱-质谱联用仪进行检测，色谱柱采用中等极性色谱柱(如VF-624ms)或极性色谱柱(如DB-WAXUI).进一步的，检测过程中色谱柱以35～45℃为起始柱温，保持1～5min，然后程序升温至50～100℃，再程序升温至色谱柱的最高使用温度，保持1～10min。进一步的，待测溶液在顶空气相色谱-质谱联用仪的顶空进样器中进行平衡，平衡温度为50～70℃，平衡时间为10～40min。优选平衡温度为60℃，平衡时间为30min。进一步的，检测器采用质谱检测器，电子轰击离子源，离子源温度为230℃。进一步的，检测时，定量模式为选择离子监测(SIM)模式，以m/z127作为辅助定性离子、m/z142作为硫酸二甲酯衍生产物碘甲烷的定量离子。进一步的，所述药物包括盐酸雷尼替丁。进一步，本专利技术所述的检测方法用于硫酸二甲酯的测定主要包括如下步骤：(1)每称取碘化钠60.0g、硫代硫酸钠0.03g，加纯水溶解并稀释至50mL，作为衍生化溶液。(2)移取乙腈1ml与衍生化溶液1ml置顶空瓶中，密封，摇匀，作为空白溶液。(3)称取硫酸二甲酯适量，加乙腈稀释制成每1ml中约含硫酸二甲酯2.5mg的溶液，作为储备液；将储备液用乙腈逐级稀释，得到浓度为100ng/mL的硫酸二甲酯溶液；移取1mL硫酸二甲酯溶液与1mL衍生化溶液置顶空瓶，密封，摇匀，得到浓度为50ng/mL的硫酸二甲酯对照溶液。(4)称取待测样品约0.04g于顶空瓶，加入1mL乙腈与1mL衍生化溶液，密封，摇匀，得供试品溶液。(5)将硫酸二甲酯对照溶液和供试品溶液注入顶空气相色谱-质谱联用仪，照外标法以碘甲烷峰面积计算得供试品溶液中硫酸二甲酯的残留量。在步骤(5)中，为达到气液平衡，各溶液需要在顶空气相色谱-质谱联用仪的顶空加热炉中加热平衡一段时间，顶空进样器的平衡温度为50～70℃，平衡时间为10～40min。优选平衡温度为60℃，平衡时间为30min。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：1)衍生反应仅需30分钟，所需时间大幅缩短；2)衍生反应在气相顶空炉中进行，衍生完成后即可自动进样分析，操作简单方便；3)衍生产物碘甲烷为挥发性物质，可降低非挥发性物质对检测的干扰，检测结果准确可靠；4)采用顶空进样，能够避免非挥发性药物基质等对仪器的污染，延长色谱柱、检测器等的使用寿命；5)采用气相色谱，利用载气作为流动相，无需繁杂的流动相配制，减少分析时间；6)采用质谱检测器，选择离子监测(SIM)作为定量方式，专属性和灵敏度好。附图说明通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本专利技术的其它特征、目的和优点将会变得更明显：图1是专属性试验对照溶液提取离子流色谱图(m/z＝142)；图2是专属性试验空白溶液提取离子流色谱图(m/z＝142)；图3为专属性试验样品溶液提取离子流色谱图(m/z＝142)。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干调整和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。另外，如果没有明确说明，在实施例中采用的试剂均为市场上可以获得的。本专利技术采用在线衍生化气相色谱-质谱联用法检测药物中遗传毒性杂质硫酸二甲酯含量，采用添加微量硫代硫酸钠的饱和碘化钠水溶液作为衍生化溶液，碘化钠的作用是将硫酸二甲酯衍生为碘甲烷，通过检测碘甲烷的含量来反映硫酸二甲酯的含量；硫代硫酸钠起还原剂的作用，防止碘化钠的氧化。所述衍生化反应过程如下：在本专利技术中，检测器采用质谱检测器，电子轰击离子源，定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中硫酸二甲酯含量的方法，其特征在于，在药物样品中添加衍生化溶液，将硫酸二甲酯衍生为碘甲烷，通过气相色谱-质谱联用检测碘甲烷的含量来得到硫酸二甲酯的含量；所述衍生化溶液为添加微量硫代硫酸钠的饱和碘化钠水溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中硫酸二甲酯含量的方法，其特征在于，在药物样品中添加衍生化溶液，将硫酸二甲酯衍生为碘甲烷，通过气相色谱-质谱联用检测碘甲烷的含量来得到硫酸二甲酯的含量；所述衍生化溶液为添加微量硫代硫酸钠的饱和碘化钠水溶液。


2.如权利要求1所述的在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中硫酸二甲酯含量的方法，其特征在于，在药物样品中添加衍生化溶液和乙腈制得供试品溶液；将硫酸二甲酯对照溶液和供试品溶液注入气相色谱-质谱联用仪，照外标法以碘甲烷峰面积计算得供试品溶液中硫酸二甲酯的含量；所述硫酸二甲酯对照溶液由硫酸二甲酯乙腈溶液和衍生化溶液配制而得。


3.如权利要求1或2所述的在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中硫酸二甲酯含量的方法，其特征在于，所述衍生化溶液中含碘化钠1.01～1.21g/mL，硫代硫酸钠0.0004～0.0006g/mL。


4.如权利要求3所述的在线衍生化气相色谱-质谱联用法测定药物中硫酸二甲酯含量的方法，其特征在于，每0.04g药物样品中添加1mL衍生化溶液和1mL乙腈，得供试品溶液；每1mL100ng/mL的硫酸二甲酯乙腈溶液加入1mL衍生化溶液，得硫酸二甲酯对照溶液。


5.如权利要求1所述的在线衍生化气相色谱-质谱联用法测...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘娇，谢军，李惠，姜春阳，刘雪薇，周小群，
申请(专利权)人：上海博悦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31