米索前列醇固体制剂中有关检测及供试品溶液的制备方法技术

本发明专利技术提供一种规格为5μg～80μg的米索前列醇固体制剂中有关物质检测所用的供试品溶液的制备方法，及一种检测规格为5μg～80μg的米索前列醇固体制剂中有关物质的HPLC方法。本发明专利技术提供的供试品溶液的制备方法，可为规格为5μg～80μg的米索前列醇固体制剂配制出适合HPLC法检测有关物质的供试品溶液，本发明专利技术提供的检测方法，分离效果好、重现性好、灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】
米索前列醇固体制剂中有关检测及供试品溶液的制备方法
本专利技术涉及制剂分析方法
，特别涉及一种低剂量米索前列醇固体制剂(规格：5μg～80μg)有关物质HPLC检测方法及检测中所用的供试品溶液的制备方法。
技术介绍
米索前列醇，是一种前列腺素E1衍生物，由于活性极高，临床应用只需要微克级别即可。米索前列醇已成功开发并批准用于治疗胃溃疡或者流产，规格为200μg。临床应用中进一步发现，米索前列醇还有多种用途，比如在较低剂量下(如5μg～80μg)可用于足月引产等。研究人员需要针对不同适应症开发不同规格的米索前列醇制剂，由于携带和使用方便，米索前列醇固体制剂是一种较好的选择。制剂开发中质量控制、尤其是有关物质控制尤为重要。米索前列醇降解杂质包括已知的8-表米索前列醇、A-构型米索前列醇、B-构型米索前列醇及未知杂质等。米索前列醇固体制剂有关物质分析方法开发中的一个重要难题是，规格越小，米索前列醇在制剂中的占比越低，辅料干扰越大，越难于检测，灵敏度达不到要求。本领域技术人员就米索前列醇有关物质检测方法做了一些尝试。USP42-NF37中公开了米索前列醇分散体有关物质的检测方法及供试品溶液的制备方法。叶皓等发表了《高效液相色谱法同时测定奥湿克片中两组分的含量及有关物质》一文，采用高效液相色谱法同时测定双氯芬酸钠、米索前列醇(200μg)的含量和有关物质，该方法灵敏度较低，8-表米索前列醇的检测限为0.16％、A-构型米索前列醇的检测限0.13％，均大于报告限0.1％，不满足检测要求；S.A.Carr等发表了《Analyticalmethodologytodeterminethepotencyandqualityofmisoprostoltablets》一文，描述了一种HPLC等度洗脱检测200μg米索前列醇片的方法；GetuKahsay等发表了《DevelopmentandvalidationofLCmethodsfortheseparationofmisoprostolrelatedsubstancesanddiastereoisomers》一文，描述了LC法用于分离米索前列醇原料药、4％分散体和100μg片和200μg片中的有关物质。但是，上述方法均仅适用于米索前列醇、米索前列醇-分散体和/或规格≥100μg的米索前列醇制剂。按照上述文献提供的供试品溶液制备方法及检测方法，无法用于检测规格为5μg～80μg的米索前列醇固体制剂，辅料干扰大或者检测限达不到要求。因此，目前急需要一种适于低剂量(规格：5μg～80μg)米索前列醇固体制剂的有关物质检测方法，该方法必须可同时检测已知杂质和未知杂质、灵敏高、分离效果好，同时需要适用于该检测的供试品溶液的制备方法，以此来控制低剂量(规格：5μg～80μg)米索前列醇固体制剂的质量。
技术实现思路
基于上述技术问题，为了克服现有技术的上述不足之处，本专利技术提供一种可供低剂量(规格：5μg～80μg)米索前列醇固体制剂中有关物质检测的HPLC方法及检测所用的供试品溶液的制备方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：提供一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂(规格为5μg～80μg)中有关物质的供试品溶液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：1)称量：称取米索前列醇固体制剂适量作为供试品；2)提取：用第一种溶媒溶解供试品，得米索前列醇提取液，所述提取液浓度为5～80μg/ml；优选地，其中所述第一种溶媒为乙酸乙酯、甲醇或乙醇中的至少一种，更优选地所述第一种溶媒为甲醇。由此，可充分提取供试品中的米索前列醇，且较容易将提取溶液浓缩干燥至所需供试品溶液浓度，同时避免杂质在提取过程中增加。3)浓缩干燥：取适量提取液浓缩干燥后得供试品提取物；4)溶解：用第二种溶媒溶解供试品提取物，制成供试品溶液，所述供试品溶液浓度为100～200μg/ml，其中所述第二种溶媒为可使米索前列醇溶解的极性有机溶剂、极性有机溶剂-水溶液或极性有机溶剂-缓冲盐溶液；优选地，所述极性有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈中的至少一种。由此，供试品溶液浓度可满足检测灵敏度要求，且专属性好，且可以避免辅料浓度过大而干扰检测。优选地，其中所述所述提取的方式为超声或振摇，更优选地为超声。优选地，其中所述提取时间为5～60min。优选地，其中所述浓缩干燥的方式为真空干燥或惰性气体吹干，更优选地为氮气吹干。优选地一种方案为，其中所述第一种溶媒为甲醇，提取方式为超声，提取时间为15～40min，提取液浓度为10～50μg/ml，浓缩干燥的方式为氮气吹干，供试品溶液浓度为100～150μg/ml，由此，主成分和各杂质均能充分提取，且辅料干扰较小。优选地，所述米索前列醇固体制剂为米索前列醇阴道片。优选地，所述米索前列醇固体制剂的规格为25μg。用本专利技术提供的供试品溶液制备方法配制的供试品溶液，适用于HPLC法检测米索前列醇有关物质。本专利技术还提供一种规格为5μg～80μg的米索前列醇固体制剂中有关物质检测的HPLC方法，其特征在于包括以下步骤：1)供试品溶液配制：按照前面所述方法配制；2)对照品溶液配制：取米索前列醇对照品适量，精密称定，加前面所述第二种溶媒溶解并定量稀释制成对照品溶液，所述对照品溶液浓度为供试品溶液浓度的1％；3)系统适用性溶液配制：取对照品加前面所述第二种溶媒溶解并稀释作为系统适用性溶液，其中对照品至少包含米索前列醇对照品和8-表米索前列醇对照品；4)色谱峰测定：将配制的供试品溶液、对照品溶液注入液相色谱仪，记录检测数据，并计算供试品溶液中米索前列醇的含量和有关物质含量，其中色谱条件为：用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，色谱柱内径为4.6mm，色谱柱柱长为150mm或250mm，色谱柱填料粒径为3～5μm，柱温为35～55℃，流速为1.0～2.0ml/min，以磷酸盐缓冲液-异丙醇为流动相，等度洗脱，样品盘控温2～10℃，进样量为50～250μl，检测波长为200～210nm，磷酸调节磷酸盐缓冲液pH值为2.5～3.5、其中磷酸盐缓冲液-异丙醇的体积比为(680～780)：(220～320)，磷酸盐为磷酸二氢钾或磷酸二氢钠。优选地，其中所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01mol/L，pH值为2.9～3.1，磷酸盐为磷酸二氢钾。优选地，所述色谱柱为PhenomenexLunaC8(2)，内径为4.6mm，柱长为150mm，填料粒径为5μm，柱温为40～50℃，流速为1.0～2.0ml/min，样品盘控温2～10℃，进样量为100～250μl，磷酸盐缓冲液-异丙醇的体积比为730:270，磷酸盐缓冲液的浓度为0.01mol/L，磷酸盐为磷酸二氢钾，pH值为2.9～3.1，检测波长为205nm。优选地，流速为1.4～1.6ml/min。优选地，进样量为100～200μl。优选地，所述米索前列醇固体制剂为米索前列醇阴道片本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：/n称量：称取米索前列醇固体制剂适量作为供试品；/n提取：用第一种溶媒溶解供试品，得米索前列醇提取液，所述提取液浓度为5～80μg/ml；/n浓缩干燥：取适量提取液浓缩干燥后得供试品提取物；/n溶解：用第二种溶媒溶解供试品提取物，制成浓度为100～200μg/ml的供试品溶液，其中所述第二种溶媒为可使米索前列醇溶解的极性有机溶剂、极性有机溶剂-水溶液或极性有机溶剂-缓冲盐溶液，所述极性有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈中的至少一种；/n其中米索前列醇固体制剂的规格为5μg～80μg。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
称量：称取米索前列醇固体制剂适量作为供试品；
提取：用第一种溶媒溶解供试品，得米索前列醇提取液，所述提取液浓度为5～80μg/ml；
浓缩干燥：取适量提取液浓缩干燥后得供试品提取物；
溶解：用第二种溶媒溶解供试品提取物，制成浓度为100～200μg/ml的供试品溶液，其中所述第二种溶媒为可使米索前列醇溶解的极性有机溶剂、极性有机溶剂-水溶液或极性有机溶剂-缓冲盐溶液，所述极性有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈中的至少一种；
其中米索前列醇固体制剂的规格为5μg～80μg。


2.根据权利要求1所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述第一种溶媒为乙酸乙酯、甲醇或乙醇中的至少一种。


3.根据权利要求2所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述第一种溶媒优选为甲醇。


4.根据权利要求1所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述提取的方式为超声或振摇。


5.根据权利要求4所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，提取时间为5～60min。


6.根据权利要求1所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述浓缩干燥的方式为真空干燥或惰性气体吹干，优选为氮气吹干。


7.根据权利要求1所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述第一种溶媒为甲醇，提取方式为超声，提取时间为15～40min，提取液浓度为10～50μg/ml，浓缩干燥的方式为氮气吹干，供试品溶液的浓度为100～150μg/ml。


8.根据权利要求7所述的一种用于HPLC法检测米索前列醇固体制剂的有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述米索前列醇固体制剂为米索前列醇阴道片。


9.一种检测米索前列醇固体制剂中有关物质的HPLC方法，其特征在于包括以下步骤：
供试品溶液配制：按照权利要求1、3、5、7或8任一项所述方...

【专利技术属性】
技术研发人员：李秀芬，赵芹，蔡思婷，温金卿，袁永玲，赵玉姣，赵志荣，卢智俊，
申请(专利权)人：广州朗圣药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44