一种含SZFZ13-A的组合物中SZFZ13-A含量的高效液相色谱检测方法技术

本发明专利技术公开了含聚赖氨酸SZFZ13

【技术实现步骤摘要】
一种含SZFZ13
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A的组合物中SZFZ13
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A含量的高效液相色谱检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，具体涉及一种含SZFZ13
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A的组合物中SZFZ13
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A含量的高效液相色谱检测方法。

技术介绍

[0002]人乳头瘤病毒(HPV)属于乳多空病毒科乳头瘤空泡病毒A属，是球形DNA病毒，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。症状表现为寻常疣、生殖器疣(尖锐湿疣)等。随着性病中尖锐湿疣的发病率急速上升和宫颈癌、肛门癌等的增多，人乳头瘤病毒(HPV)感染越来越引起人们的关注。因此，发展预防和治疗HPV的阴道内或直肠内应用的新型的、安全的、局部的抗病毒产品是药物研发的重要目标。
[0003]专利技术专利CN108676067B公开了聚赖氨酸SZFZ13
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A具有预防HIV感染的效果，专利技术专利CN114053392A公开了聚赖氨酸SZFZ13
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A具有抗HPV6、HPV16和HPV18的效果，可将其制成局部用抗HPV组合物用于阻断生殖道HPV感染，预防宫颈癌变和宫颈癌的发生。 SZFZ13
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A的结构式如下。
[0004]目前尚无适用于SZFZ13
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A含量检测的检测方法，对SZFZ13
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A质量控制带来挑战。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在克服上述现有技术的至少一个不足，提供一种用于检测含SZFZ13
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A的组合物中SZFZ13
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A含量的高效液相色谱方法。
[0006]本专利技术所采取的技术方案是：一种用于检测含SZFZ13
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A的组合物中SZFZ13
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A含量的高效液相色谱方法，所述
SZFZ13
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A 的结构式如下：所述方法包括以下步骤：1)色谱条件为：使用亲水球状蛋白硅胶为填充剂的色谱柱，采用浓度为10～100mmol/L的磷酸氢二钾缓冲溶液
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乙腈作为流动相，其比例为60～90：40～10，检测波长为225nm～245nm，柱温为20～40℃，流动相流速为0.2～0.7ml/min；2)对照品溶液和供试品溶液的配制：将对照品用稀释剂溶解得对照品溶液，将供试品用稀释剂溶解、离心后得供应品溶液；3)测定：精密量取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，用外标法计算供试品溶液中SZFZ13
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A的含量。
[0007]在一些实施例中，所述色谱柱为Welch Xtimate SEC
‑
120，7.8mm
×
300mm，5μm或效能相当的色谱柱。
[0008]在一些实施例中，所述流动相磷酸氢二钾缓冲溶液的pH值为3.0～7.0。
[0009]在一些实施例中，所述所述流动相磷酸氢二钾缓冲溶液的浓度为20～90mmol/L。
[0010]在一些实施例中，所述流动相磷酸氢二钾缓冲溶液
‑
乙腈的比例为70～80：30～20。
[0011]在一些实施例中，所述检测波长为230nm；在一些实施例中，所述流动相的流速为0.3～0.5ml/min。
[0012]在一些实施例中，所述色谱柱柱温为25～35℃。
[0013]在一些实施例中，配制标准对照品溶液和供试品溶液的步骤为：用稀释剂1溶解后用稀释剂2定量稀释。所用的稀释剂1为水、乙醇、甲醇、丙酮中的至少一种，稀释剂2为乙醇、甲醇、丙酮或水中的至少一种，最终体系中水的体积分数为60％～40％。
[0014]在一些实施例中，所述含SZFZ13
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A的组合物中SZFZ13
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A的质量分数为0.1％～0.5％。
[0015]在一些实施例中，所述含SZFZ13
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A的组合物为凝胶、软膏、乳膏、溶液、喷雾或敷料。
[0016]在一些实施列中，所述含SZFZ13
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A的组合物用于预测和/或治疗HIV。
[0017]在一些实施列中，所述含SZFZ13
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A的组合物用于预测和/或治疗HPV。
[0018]本专利技术的有益效果是：本专利技术利用反相高效液相色谱检测含SZFZ13
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A的组合物中 SZFZ13
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A的含量，该方法检测结果准确、可靠，有利于含SZFZ13
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A的组合物的质量控制，以保障产品的有效性、安全性并实现质量可控。
附图说明
[0019]图1为实施例1中对照品溶液的HPLC图谱。
[0020]图2为实施例1中供试品溶液的HPLC图谱。
[0021]图3为实施例3中对照品溶液和供试品溶液的HPLC叠加图谱。
[0022]图4为实施例5中滤膜吸附性考察的各供试品溶液的HPLC图谱。编号1
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6分别为供试品溶液过滤弃去0、1、2、3、4、5ml后进样检测的谱图，7为供试品溶液不过滤进样检测的谱图。
具体实施方式
[0023]为使本专利技术的目的、特征和效果更加清楚明白，以下结合具体实施方式，对本专利技术的构思及产生的技术效果进行详细、完整地描述。显然，所描述的实施例只是本专利技术的一部分实施例，而非全部实施例，基于本专利技术的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的的其他实施例，均属于本专利技术保护的范围。
[0024]实施例1S1：标准对照品溶液制备：精密称取SZFZ13
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A对照品适量于100ml量瓶，用水溶解后，用无水乙醇定量稀释制成每1ml中约含200μg SZFZ13
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A的溶液，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液，用乙醇水溶液稀释制成每1ml中约含10μg SZFZ13
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A的溶液，作为对照品溶液。
[0025]S2：配制供试品溶液：精密称取含SZFZ13
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A的凝胶(标示量：0.22％)适量于50ml 量瓶中，加水25ml，超声5min，边超声边振摇，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，制成每1ml中约含SZFZ13
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A10μg的供试品溶液。
[0026]S3：高效液相色谱测定：Welch Xtimate SEC
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120色谱柱：7.8
×
300mm 5μm；流动相为乙腈：磷酸氢二钾溶液(0.05mol/L，pH＝6.8)＝20:80(v/v)；进行等度洗脱，洗脱时间： 45min；流速0.5ml/min；柱温30℃；紫外检测器检测波长：230nm；进样量10μL；将对照品溶液和样品溶液注入液相色谱仪，检测结果如图1(对照品溶液)和图2(供试品溶液)所示。依据标准对作品溶液中SZFZ13
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A的峰面积与供试品溶液中SZFZ13
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种反相高效液相色谱检测含SZFZ13
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A的组合物中SZFZ13
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A含量的方法，其特征在于，所述SZFZ13
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A结构式如下所示：；所述方法包括以下步骤：1）色谱条件为：使用亲水球状蛋白硅胶为填充剂的色谱柱，采用浓度为10~100mmol/L的磷酸氢二钾缓冲溶液
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乙腈作为流动相，磷酸氢二钾缓冲溶液
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乙腈的比例为60~90：40~10，检测波长为225nm~245nm，柱温为20~40℃，流动相流速为0.2~0.7ml/min；2）对照品溶液和供试品溶液的配制：将对照品用稀释剂溶解得对照品溶液，将供试品用稀释剂溶解、离心后得供应品溶液；3）测定：精密量取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，用外标法计算供试品溶液中SZFZ13
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A的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为Welch Xtimate SEC
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120，7.8mm
×
300mm，5μm或效能相当的色谱柱。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：张翔宇，蔡俊伟，潘洁谊，赵芹，陈金嫚，陈伟强，赵玉娇，赵志荣，卢智俊，
申请(专利权)人：广州朗圣药业有限公司，
类型：发明
国别省市：