测定注射用透明质酸钠复合溶液中盐酸赖氨酸含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定注射用透明质酸钠复合溶液中盐酸赖氨酸含量的方法。所述方法包括下述步骤：供试品溶液制备：利用透明质酸酶对注射用透明质酸钠复合溶液进行酶解；标准品溶液制备：将盐酸赖氨酸标准品溶解得到；检测步骤：使用高效液相色谱法，利用在线衍生技术，检测所述的供试品溶液和标准品溶液，使用外标法确定盐酸赖氨酸的含量。本发明专利技术使用透明质酸酶对供试品进行前处理，并结合液相色谱分离技术测得供试品中盐酸赖氨酸含量，方法准确度高，检测限低。按照本发明专利技术的方法，能够避免交联透明质酸钠对盐酸赖氨酸含量测定的干扰，提高检测准确度，降低检测限。同时又能够减少交联透明质酸钠复合溶液对色谱柱的损耗，延长色谱柱使用寿命。

【技术实现步骤摘要】
测定注射用透明质酸钠复合溶液中盐酸赖氨酸含量的方法
本专利技术涉及氨基酸检测的
，尤其涉及一种酶解法联合HPLC法测定注射用透明质酸钠复合溶液中盐酸赖氨酸含量的方法。
技术介绍
透明质酸(Hyaluronicacid，HA)是人和动物皮肤、玻璃体、关节润滑液和软骨组织的重要成分，一般为其钠盐，即透明质酸钠(Sodiumhyaluronate,SH)，习惯上仍称为透明质酸。分子式为(C14H21NO11)n，它由(1-β-4)D-葡糖醛酸和(1-β-3)N-乙酰基-D-氨基葡糖双糖单位重复连接而成，其聚合物在体内的分子量大小范围从5000至2000万道尔顿不等，被认为是一种填充空间、稳定结构、涂层细胞和保护细胞的多糖。透明质酸被广泛使用在修复手术、眼部手术或作为美容产品填充皱纹。透明质酸具有良好的理化性能及生物相容性。然而，它在体内受到透明质酸酶的酶解作用而迅速降解，存留时间较短，需要重复注射才能达到疗效。交联透明质酸是透明质酸经交联剂交联修饰得到的具有三维立体结构的高分子凝胶，可以弥补透明质酸钠存留时间短等缺点，同时仍具有良好的生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定注射用透明质酸钠复合溶液中盐酸赖氨酸含量的方法，其包含下述步骤：/n供试品溶液制备：利用透明质酸酶对注射用透明质酸钠复合溶液进行酶解；/n标准品溶液制备：将盐酸赖氨酸标准品溶解得到；/n检测步骤：使用高效液相色谱法，利用在线衍生技术，检测所述的供试品溶液和标准品溶液，使用外标法确定盐酸赖氨酸的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种测定注射用透明质酸钠复合溶液中盐酸赖氨酸含量的方法，其包含下述步骤：
供试品溶液制备：利用透明质酸酶对注射用透明质酸钠复合溶液进行酶解；
标准品溶液制备：将盐酸赖氨酸标准品溶解得到；
检测步骤：使用高效液相色谱法，利用在线衍生技术，检测所述的供试品溶液和标准品溶液，使用外标法确定盐酸赖氨酸的含量。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述透明质酸酶为细菌酶，优选的，在35-45℃酶解，进一步优选为42℃；优选的，酶解3-3.5h，进一步优选为2-3h；优选的，酶解pH为6.0-6.5。


3.根据权利要求1-2任一项所述的方法，其中，在线衍生技术包括下述步骤：将所述供试品溶液与衍生化试剂在缓冲溶液存在下混合，优选的，所述缓冲溶液为硼酸盐缓冲溶液。


4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述衍生化试剂为邻苯二甲醛。


5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其中，在检测步骤中，使用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，优选为PoroshellHPH-C18色谱柱或者ZORBAEclipse-AAA色谱柱。


6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘英，陈玉娟，陈雯雯，李芸，万金玉，沈延臻，刘建建，郭学平，
申请(专利权)人：华熙生物科技股份有限公司，山东华熙海御生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37